Санкт-Петербург
+7 (812) 309 12 21
+7 (800) 700 03 03

Ваш город Санкт-Петербург?

 

закрыть

Результаты поиска: Количество результатов: 0

Анализы База знаний Акции Страницы Адреса
База знаний в вашем смартфоне или планшете
для iPhone и iPad
для Android
Пересчёт
единиц измерения
Нормы в
микробиологии

← вернуться к списку статей

Версия для печати


[13-135] Определение функциональной активности основных путей системы комплемента

Определение функциональной активности основных путей системы комплемента – оценка функционального состояния одного из важнейших компонентов иммунной системы, основанная на определении содержания в сыворотке крови конечных продуктов его активации, запускаемой тремя различными путями.

Синонимы русские

Общий скрининг системы комплемента (3 пути: классический, альтернативный, лектиновый).

Синонимы английские

Functional assay of complement activation, screening of deficiencies of complement activation pathways.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Комплемент представляет собой систему сывороточных белков, постоянно присутствующих в крови в неактивном состоянии. Белки системы комплемента обозначаются латинской буквой С и цифрой, а субъединицы белков или их активированные формы дополнительно маленькой латинской буквой (например С1q). Для активации системы комплемента требуется наличие в крови комплекса антиген-антитело либо присутствие компонентов поверхностных структур клеток микроорганизмов. Начало каскада реакций между белками комплемента зависит от того, каким субстратом запускается активация системы комплемента - в зависимости от этого выделяют три возможных пути:

  • Классический – эволюционно наиболее поздний путь активации. Для запуска каскада реакций по этому пути необходимо наличие в крови связанных с антигеном иммуноглобулинов классов G или М. Так как выработка иммуноглобулинов происходит в организме в ответ на конкретного возбудителя, классический путь активации комплемента является компонентом специфического иммунитета. Каскад реакций классического пути инициируется С1q-субъединицей комплемента после ее взаимодействия с Fc-фрагментом, связанного с антигеном иммуноглобулина.

  • Альтернативный – активация по этому пути происходит без участия антител. Инициаторными молекулами выступают компоненты поверхностных структур микроорганизмов (бактерий, грибов, простейших и некоторых вирусов), а также инфицированных вирусами клеток собственного организма. Альтернативный путь активации комплемента запускается взаимодействием С3b-субкомпонента с поверхностной структурой клетки-мишени.

  • Лектиновый путь также запускается без участия антител. В крови человека циркулирует белок MBL, способный связываться с маннозой, которая в больших количествах содержится в структурах оболочки микроорганизмов. При внедрении патогена в организм этот белок фиксируется на поверхности микроорганизма. С находящимся на поверхности микробной клетки MBL связывается фермент MBL-ассоциированная протеиназа, и в комплексе они активируют С4- и С2-компоненты комплемента.

Описанные пути активации системы комплемента отличаются друг от друга только на начальных этапах процесса, в итоге же любого из них формируется так называемый мембраноатакующий комплекс. Он представляет собой полимерную белковую структуру из белков комплемента, которая по форме напоминает воронку или цилиндр. Мембраноатакующий комплекс встраивается в оболочку клетки-мишени и формирует в ней трансмембранные каналы, через которые внутрь клетки неконтролируемо поступает вода, вызывая её разрушение.

Система комплемента включает в себя около 20 белков, при дефиците отдельных из них наблюдается функциональная недостаточность системы в целом. Это проявляется склонностью к рецидивирующим тяжелым инфекциям. Так, дефицит С3 приводит к высокой частоте гнойных инфекций. Недостаточность компонентов конечных этапов активации – С5, С6, С7 и С8, – а также компонентов альтернативного пути создает предрасположенность к инфекциям, вызываемым Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis. Дефицит некоторых компонентов классического пути (C1q, C1r и C1s, C4 или C2) ассоциирован с предрасположенностью к аутоиммунным заболеваниям, так как приводит к нарушениям процессов формирования и элиминации иммунных комплексов. Таким образом, нарушения в системе комплемента могут приводить к серьезным заболеваниям, что обуславливает важность их своевременной диагностики.

Так как система комплемента включает много индивидуальных белков, исследование каждого из них на начальных этапах диагностического поиска нецелесообразно. В качестве современного скринингового теста используется определение активности трех путей системы комплемента методом иммуноферментного анализа. ИФА выявляет конечный продукт активации комплемента – мембраноатакующий комплекс, и по его концентрации возможно судить о функциональной активности того или иного пути активации. Для теста используются три планшета, в лунках которых абсорбированы специфические активаторы классического, альтернативного и лектинового путей. Образец сыворотки крови пациента делят на три части и разбавляют каждую специальным раствором, содержащим блокаторы для возможности активации комплемента в данном образце только по одному пути. После инкубации в лунках образуются мембраноатакующие комплексы, которые выявляются путем добавления к ним специальных антител, меченных окрашивающим веществом. Интенсивность окраски в лунке отражает степень активации комплемента по соответствующему пути.

Для чего используется исследование?

  • Для скрининговой диагностики иммунодефицитных состояний, в генезе которых предполагается роль дефектов системы комплемента, а также для диагностики аутоиммунных заболеваний иммунокомплексной природы (системная красная волчанка и сходные синдромы, васкулиты, гломерулонефриты).

Когда назначается исследование?

  • При диагностике врожденных иммунодефицитов в качестве скрининга на дефицит отдельных белков системы комплемента, при рецидивирующих бактериальных инфекциях.

  • При мониторинге некоторых аутоиммунных заболеваний, обусловленных избытком и отложением в тканях иммунных комплексов.

Что означают результаты?

Референсные значения

Определение активности альтернативного пути системы комплемента: 40 - 90 %.

Определение активности классического пути системы комплемента: 75 - 120 %.

Определение активности лектинового (маннозного) пути системы комплемента: 30 - 120 %.

Снижение функциональной активности одного из путей системы комплемента отражает дефицит компонентов системы, использующихся в начале соответствующего пути. Для дефектов компонентов, участвующих в конечных этапах формирования мембраноатакующего комплекса, будет характерным снижение активности всех трех путей активации.

Что может влиять на результат?

Несоблюдение правил взятия, хранения и транспортировки биоматериала может привести к преждевременной активации комплемента и некорректным результатам исследования.



Важные замечания

  • Данный тест является скрининговым, он позволяет исключить или подтвердить функциональные нарушения системы комплемента. При выявлении патологических изменений целесообразно провести более углубленное обследование – специальные иммунохимические и функциональные тесты для выявления дефектов каждого компонента комплемента. Однако объем такого дообследования и его необходимость нужно согласовывать с доктором.

Также рекомендуется

  • С4 компонент комплемента
  • С3 компонент комплемента

  • Определение активности маннан-связывающего лектина

  • Определение уровня MASP-2

  • Предрасположенность к инфекционным заболеваниям. Недостаточность маннан-связывающего лектина (комплексное генетическое исследование, направленное на поиск частых мутаций гена MBL2, который кодирует маннан-связывающий лектин)

Кто назначает исследование?

Иммунолог, педиатр, терапевт, врач общей практики.

Литература

  • Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e  by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 941-942.
  1. Complement analysis in the 21st century. Tom Eirik Mollnes, T. Sakari Jokiranta, Lennart Truedsson, Bo Nilsson, Santiago Rodriguez de Cordoba, Michael Kirschfink - Molecular Immunology 44 (2007). Pages 3838–3849.

  2. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. II / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 21-25.

  3. Аллергология и иммунология: национальное руководство / под ред. Р. М. Хаитова, Н. И. Ильиной. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. С. 374-378.

Лабораторная служба Хеликс
г. Санкт-Петербург, Б. Сампсониевский пр-т, д. 20
Телефон: +7 (800) 700-03-03