Санкт-Петербург
+7 (812) 309 12 21
+7 (800) 700 03 03

Ваш город Санкт-Петербург?

 

закрыть

Результаты поиска: Количество результатов: 0

Анализы База знаний Акции Страницы Адреса
База знаний в вашем смартфоне или планшете
для iPhone и iPad
для Android
Пересчёт
единиц измерения
Нормы в
микробиологии

← вернуться к списку статей

Версия для печати


[02-042] Лейкоцитарная формула (с обязательной микроскопией мазка крови)

Лейкоцитарная формула (с обязательной микроскопией мазка крови) – подсчет количества общего количества и разных видов лейкоцитов, а также изучение их морфологических особенностей посредством микроскопии мазка периферической крови.

Синонимы русские

Лейкоформула.

Синонимы английские

Leukocyte Differential Count, WBC Count Differential, Diff, Blood Differential, Differential Blood Count, White Blood Cell Differential.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, капиллярную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Лейкоциты это гетерогенная популяция ядросодержащих клеток крови, которые являются важнейшей частью иммунной системы человека и играют роль в процессах воспаления, аллергии и противоопухолевой защиты. Выделяют пять типов лейкоцитов, каждый из которых выполняет свои специфические функции: три вида гранулоцитов (эозинофилы, базофилы, нейтрофилы), моноциты и лимфоциты. Изучение лейкоцитарной формулы в мазке периферической крови представляет собой подсчет количества разных видов лейкоцитов и оценку их морфологических свойств. Для исследования может использоваться как венозная, так и капиллярная кровь.

Забор венозной крови производится при помощи вакуумной системы, чаще всего из вен на локтевом сгибе. В специальной пробирке – вакутейнере уже содержится антикоагулянт (ЭДТА), который препятствует свертыванию крови. Объем набранной в вакутейнер крови должен соответствовать отметке на нём – так достигается необходимая концентрация антикоагулянта, что препятствует формированию микросгустков и, как следствие, неправильному подсчету количества клеточных элементов и искажению их морфологической структуры.

По некоторым данным, капиллярная кровь предпочтительнее для приготовления мазка. Она чаще всего берется из пальца, реже – из мочки уха, у новорожденных – из пятки. После обработки кожи антисептиком делается неглубокий прокол, первая капля крови удаляется, последующие одну-две капли крови капают на предметное стекло, другим стеклом под углом 45 градусов одним движением размазывают кровь тонким слоем. Затем стекла помещают на определенное время в фиксирующий раствор, после чего окрашивают специальными красителями (методика окраски по Романовскому-Гимзе). Окраска позволяет различать клетки и внутриклеточные структуры, кроме того разные виды лейкоцитов неодинаково восприимчивы к некоторым красителям и окрашиваются по-разному, что вместе с различиями в их морфологических свойствах (форма ядра, размеры и наличие внутриклеточных гранул) позволяет дифференцировать основные виды лейкоцитов при изучении мазка с помощью микроскопа. Традиционно подсчет проводят на сто клеток, и полученные цифры записывают в процентах. Зная общее количество лейкоцитов, проценты можно пересчитать в абсолютные значения, которые гораздо более объективно отражают состояние лейкоцитарной популяции.

Гранулоциты называются так, потому что содержат в своей цитоплазме гранулы, в которых содержатся биологически активные вещества, необходимые для выполнения лейкоцитами своих защитных функций. Выделяют три типа гранулоцитов:

  •          Зрелые нейтрофилы имеют сегментированное на 4-5 долек ядро и гранулы, которое при окраске по Романовскому-Гимзе окрашиваются в фиолетовый цвет. Сегментоядерные нейтрофилы составляют основную часть лейкоцитов периферической крови. В намного меньшем количестве в крови могут встречаться нейтрофилы предыдущей стадии созревания – палочкоядерные (с ещё неразделенным на дольки ядром). Клетки более ранних этапов созревания (метамиелоциты, миелоциты и другие) могут появляться в мазке крови в исключительных случаях – например при тяжелых инфекционных заболеваниях, когда костный мозг выбрасывает на борьбу с инфекцией еще несозревшие клетки (это называется сдвигом лейкоцитарной формулы влево), а также при хроническом миелолейкозе.
  •          Эозинофилы участвуют в противопаразитарном иммунитете и развитии аллергических реакций. В их гранулах, которые окрашиваются в оранжево-розовый цвет, содержатся медиаторы аллергии и воспаления. Эозинофилы отличаются от нейтрофилов также по строению ядра - оно у них двудольчатое.
  •          Базофилы – гранулоциты, которые принимают активное участие в аллергических реакциях немедленного типа. Они имеют S образное несегментированное ядро, которое нередко невидно из-за крупных гранул интенсивного синего цвета, содержащих медиаторы аллергии.

Лимфоциты – клетки с крупным ядром, практически лишенные цитоплазмы. При окраске по Романовскому-Гимзе их ядро окрашивается в интенсивный пурпурно-фиолетовый цвет, а цитоплазма в сине-голубой. Лимфоциты участвуют в более сложных реакциях иммунитета, связанных с узнаванием своих и чужих антигенов, выработкой антител. Существует три класса лимфоцитов: Т-лимфоциты, В-лимфоциты и NK-клетки (натуральные киллеры), однако стандартная окраска не позволяет их различать, для этого используются более сложные в техническом отношении методы (например, иммунофенотипирование).

Моноциты – относительно крупные лейкоциты, содержащие несегментированное бобовидное ядро и, в отличие от лимфоцитов, большое количество цитоплазмы. Ядро при окраске по Романовскому-Гимзе приобретает пурпурно-красный цвет, а цитоплазма – мутный голубовато-серый. Основная функция моноцитов – фагоцитоз, то есть поглощение и переваривание микроорганизмов, собственных отмирающих клеток и т. п.

Вышеперечисленные типы лейкоцитов встречаются в мазке периферической крови в норме. При некоторых заболевания в кровь из костного мозга могут выходить клетки, которых в норме в мазке быть не должно: например, бласты – морфологический субстрат острого лейкоза. В заключении к исследованию обязательно указываются количество и, по возможности, морфологические особенности атипичных клеток.

Помимо подсчета количества клеток, врач лабораторной диагностики при микроскопии мазка крови отмечает изменения морфологии лейкоцитов:

  •          Токсогенная зернистость нейтрофилов – внутри клеток присутствуют темные крупные грубые гранулы, которые образуются в результате коагуляции ("сваривания") белка цитоплазмы под влиянием продуктов интоксикации.
  •          Вакуолизация цитоплазмы – также обусловлена тяжелой интоксикацией, под влиянием которой в клетке возникает жировая дистрофия, а при фиксации мазка спиртом капельки жира растворяются и клетки приобретают характерный вид.
  •          Тельца Князькова-Деле – крупные бледно-голубые участки цитоплазмы нейтрофилов, свободные от специфических гранул. Также встречаются при воспалительных заболеваниях, сепсисе.
  •          Гиперсегментация ядер нейтрофилов – более пяти сегментов в ядре сегментоядерного нейтрофила. Может быть врожденной особенностью (в таком случае не имеет клинического значения), а также вследствие дефицита витамина В12 или фолиевой кислоты.
  •          Аномалия лейкоцитов Пельгера – врожденное нарушение созревания нейтрофилов, проявляющееся уменьшением сегментации их ядер. Зрелые нейтрофилы содержат несегментированное или двухсегментное ядро. Это не сопровождается нарушением физиологических свойств нейтрофилов.
  •          Тени Боткина-Гумпрехта – полуразрушенные ядра лейкоцитов с остатками ядрышек, получаются в процессе приготовления мазка из опухолевых клеток при хроническом лимфолейкозе.

Для чего используется исследование?

Для определения количества отдельных видов лейкоцитов и их соотношения между собой, оценки морфологических признаков лейкоцитов.

Когда назначается исследование?

При подозрении на инфекционное заболевание, а также на патологию костномозгового кроветворения. При отклонениях количества лейкоцитов от референтных пределов по данным исследования крови, выполненного на гематологическом анализаторе.

Что означают результаты?

Референсные значения

Лейкоциты

Возраст

Референсные значения

Меньше 1 года

6 - 17,5 *10^9/л

1-2 года

6 - 17 *10^9/л

2-4 года

5,5 - 15,5 *10^9/л

4-6 лет

5 - 14,5 *10^9/л

6-10 лет

4,5 - 13,5 *10^9/л

10-16 лет

4,5 - 13 *10^9/л

Больше 16 лет

4 - 10 *10^9/л

Нейтрофилы

Возраст

Референсные значения

Меньше 1 года

1,5 - 8,5 *10^9/л

1-2 года

1,5 - 8,5 *10^9/л

2-4 года

1,5 - 8,5 *10^9/л

4-6 лет

1,5 - 8 *10^9/л

6-8 лет

1,5 - 8 *10^9/л

8-10 лет

1,8 - 8 *10^9/л

10-16 лет

1,8 - 8 *10^9/л

Больше 16 лет

1,8 - 7,7 *10^9/л

Нейтрофилы, %

Возраст

Референсные значения

Меньше 1 года

16 - 45  %

1-2 года

28 - 48  %

2-4 года

32 - 55  %

4-6 лет

32 - 58  %

6-8 лет

38 - 60  %

8-10 лет

41 - 60  %

10-16 лет

43 - 60  %

Больше 16 лет

47 - 72  %

Повышенный уровень нейтрофилов может наблюдаться при острых бактериальных инфекциях, интоксикациях и миелопролиферативных заболеваниях. Нейтропения может быть обусловлена тяжело протекающей инфекцией, сепсисом, токсическим воздействием на костный мозг (цитостатики, ионизирующее излучение, миелотоксические лекарственные препараты), апластической анемией, а также врожденными заболеваниями (нейтропения Костманна, циклическая нейтропения). Наиболее частыми причинами эозинофилии являются аллергические заболевания, паразитарные инфекции, миелопролиферативные заболевания. Повышение базофилов может свидетельствовать об аллергических реакциях или миелопролиферативных заболеваниях. Абсолютный лимфоцитоз встречается при вирусных инфекциях, в том числе инфекционном мононуклеозе и цитомегаловирусной инфекции, хроническом лимфолейкозе. К снижению количества лимфоцитов могут приводить длительный прием глюкокортикостероидов, тяжелые вирусные заболевания, врожденные и приобретенные иммунодефициты, злокачественные новообразования. Моноцитоз возможен при инфекциях, гранулематозных заболеваниях (туберкулез, бруцеллез, саркоидоз), опухолях крови, системных заболеваниях соединительной ткани. 



Важные замечания

Повышение или снижение процентного содержания какого-либо вида лейкоцитов называется относительным, и не всегда соответствует изменению абсолютного значения.

Что может влиять на результат?

Несоблюдение правил забора, хранения и транспортировки биоматериала, а также нарушение техники приготовления мазка.

Также рекомендуется

  •          Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ).
  •          Скорость оседания эритроцитов.
  •          Миелограмма.

Кто назначает исследование?

Гематолог, терапевт, педиатр, врач общей практики, инфекционист, онколог.

Литература.

  1.        Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 527-531.
  2.        A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 9th Edition, by Frances Fischbach, Marshall B. Dunning III. Wolters Kluwer Health, 2015. Pages 67-82.

Руководство по лабораторным методам диагностики / Кишкун А. А. Москва: ГЭОТАР-Мед, 2007. С. 44-60.

Лабораторная служба Хеликс
г. Санкт-Петербург, Б. Сампсониевский пр-т, д. 20
Телефон: +7 (800) 700-03-03