Anti-Treponema pallidum, IgM (иммуноблот)

Исследование, направленное на диагностику антител к Treponema pallidum класса IgМ методом иммуноблотинга в целях диагностики или подтверждения сифилиса.

Синонимы русские

Антитела класса IgM к возбудителю сифилиса; иммуноглобулины класса M к антигенам Тreponema pallidum.

Синонимы английские

Syphilis IgM; anti-Treponema pallidum, IgM; anti-TP IgM; antibodies to Т. pallidum, IgM; immunoblotting.

Метод исследования

Иммуноблотинг.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Сифилис является одним из наиболее распространенных инфекционных заболеваний, передающимся преимущественно половым путем при непосредственном контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром). Возможен и вертикальный путь передачи от инфицированной матери к плоду, а также через кровь и реже при контакте с контаминированными предметами. Источником инфекции является больной человек, возбудитель инфекции – Treponema pallidum (T. pallidum), семейство Spirochaetaceae, род Treponema.

Соответственно клиническому течению заболевания, классифицируют несколько стадий сифилиса: первичную, вторичную, латентную и третичную. Первичный сифилис возникает на 14-21-й день заражения и проявляется возникновением твердого шанкра в месте контакта и проникновения возбудителя. Твердый шанкр представляет собой одну или несколько безболезненных язв, исчезающих в течение 2-6 недель без лечения. Возможно также увеличение регионарных лимфатических узлов. Вторичный сифилис диагностируется на 4-8-й неделе от момента появления твердого шанкра или на 2-3-й месяц после заражения. Для него характерны следующие клинические проявления: розеолезно-папулезная сыпь преимущественно на ладонях и стопах, энантема на слизистых оболочках, слабость, лихорадка, головная боль, генерализованная лимфоаденопатия, тонзиллит, фарингит. Далее симптомы исчезают и инфекция переходит в латентную форму, возможно с возникновением рецидивов. При нелеченном заболевании развивается третичный сифилис, проявляющийся поражением нервной системы, сердечно-сосудистой системы, костно-суставного аппарата.

Клиническая лабораторная диагностика играет важную роль в диагностике сифилиса в сочетании с эпидемиологической и клинической картинами заболевания. Чаще всего используются серологические методы лабораторной диагностики, основанные на выявлении антител.

Различают нетрепонемные и трепонемные тесты. Нетрепонемные тесты направлены на выявление антител к кардиолипину, фосфолипиду, компоненту клеточной и митохондриальной мембран бактерий. Трепонемные тесты выявляют антитела, направленные конкретно против антигенов, компонентов бактерий T. pallidum. К ним относятся реакция пассивной гемагглютинации, реакция иммунофлуоресценции, метод иммуноферментного анализа и метод иммуноблотинга.

Метод иммуноблотинга используется в качестве теста второй линии для подтверждения скрининговых методов исследования или в качестве дополнительной диагностики сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований. Он основан на определении антител классов IgM и IgG к молекулам-антигенам, разделенным с помощью метода электрофореза в соответствии с их молекулярной массой. Диагностическая чувствительность метода составляет 99 %, диагностическая специфичность – 100 %.

Известно несколько липопротеинов-антигенов наружной клеточной мембраны мембраны T. рallidum, которые обладают наибольшей иммуногенностью и играют важную роль в серологической диагностике сифилиса методом иммуноблотинга. К ним относятся следующие специфичные мембранные белки: Tp15 (15 кДа), Tp17 (17 кДа), Tp45 (45 кДа), Tp47 (47 кДа). При первичном контакте с инфекцией в крови больного начинают вырабатываться антитела класса IgM. Они выявляются в конце второй недели заболевания и присутствуют у большей части пациентов с первичным и вторичным сифилисом. По некоторым данным, антитела класса IgM к Tp45-антигену обнаруживаются на ранних стадиях первичного сифилиса, антитела к Tp15-антигену – на более поздних стадиях, при третичном сифилисе. Анти-Tp47-IgMхарактерны для активных форм заболевания и могут быть выявлены у пациентов с врождённым сифилисом.

Уровень антитрепонемных антител класса IgM значительно снижен или они полностью отсутствуют в сыворотке крови больных после специфической терапии. Следует отметить, что по отсутствию антител данного класса нельзя судить об эффективности проведенного лечения. Для подтверждения недавнего инфицирования T. pallidum необходимо определение антител класса IgG через один-два месяца в свежем образце крови.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики сифилиса;
• для подтверждения скрининговых методов исследования;
• для дополнительной диагностики сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований;
• для дифференциальной диагностики свежеприобретенного и давнего инфицирования T. рallidum;
• для диагностики активных форм сифилиса;
• для диагностики первичного и вторичного сифилиса;
• для диагностики врождённого сифилиса у новорождённых;
• для профилактического обследования беременных женщин.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на сифилис и при симптомах данного заболевания: наличие твердого шанкра, генитальных язв, лимфоаденопатии, слабости, лихорадки, розеолезно-папулезной сыпи преимущественно на ладонях и стопах, энантемы на слизистых оболочках;
• при подтверждении скрининговых методов исследования и при дополнительной диагностике сифилиса, при подозрении на наличие данного заболевания, но отрицательных результатах других исследований;
• при наличии полового партнера, больного сифилисом;
• при подозрении на врождённый сифилис у ребенка, рождённого от инфицированной матери;
• при ведении беременности в целях профилактического обследования беременных женщин желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет в женской консультации;
• при лечении  другого заболевания, передающегося половым путем;
• при определении точной причины заболевания, при наличии неспецифических симптомов, схожих с признаками сифилиса;
• если пациент был инфицирован, он должен повторить анализы на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Что означают результаты?

Отрицательный результат:

• отсутствие сифилиса;
• проведение диагностики на раннем сроке, когда не сформировался иммунный ответ и отсутствуют антитела к антигенам T. pallidum класса IgM;
• отсутствие антител класса IgM у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает наличия врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут еще не сформироваться.

Положительный результат:

• сифилис – свежеприобретенное инфицирование;
• первичный, вторичный сифилис;
• активные формы сифилиса;
• врождённый сифилис у новорождённых.

Что может влиять на результат?

Возможно получение ложноположительного результата при наличии ВИЧ-инфекции, болезни Лайма, малярии, аутоиммунных заболеваний, в частности системной красной волчанки, при атипичной пневмонии, у людей, употребляющих наркотики внутривенно, у пожилых.

Важные замечания

• Результаты данного исследования должны интерпретироваться только комплексно, с учетом анамнеза, клинических данных, результатов лабораторного обследования.
• Для подтверждения недавнего инфицирования T. pallidum необходимо определение антител класса IgG через один-два месяца на свежем образце крови.
• Отрицательный результат иммуноблотинга не исключает наличие сифилиса.

Также рекомендуется

[07-047] Treponema pallidum, IgG, титр

[07-048] Treponema pallidum, IgM, титр

[07-049] Treponema pallidum, антитела

[07-056] Сифилис RPR (антикардиолипиновый тест / микрореакция преципитации), титр

[07-070] Treponema pallidum, IgG в ликворе

[07-117] Сифилис РПГА (реакция пассивной гемагглютинации), титр

[07-156] anti-Treponema pallidum, IgG (иммуноблот)

Кто назначает исследование?

Дерматолог, дерматовенеролог, гинеколог, уролог, инфекционист, терапевт, врач общей практики, педиатр.

Литература

• Sun R, Lai DH, Ren RX, Lian S, Zhang HP Treponema pallidum-specific antibody expression for the diagnosis of different stages of syphilis / Chin Med J (Engl). 2013 Jan;126(2):206-10.
• Miranda AP, Sato NS Profile of anti-Tp47 antibodies in patients with positive serology for syphilis analized by Western Blot / Braz J Infect Dis. 2008 Apr;12(2):139-43.
• Wang LN, Li JM Evaluation of immunoglobulin M and G Western blot and ELISA for screening antibodies to Treponema pallidumin blood donors / Sex Transm Dis. 2009 Jul;36(7):413-6.
• Sato NS, Hirata MH, Hirata RD, Zerbini LC, Silveira EP, de Melo CS, Ueda M.Analysis of Treponema pallidum recombinant antigens for diagnosis of syphilis by western blotting technique / Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 1999 Mar-Apr;41(2):115-8.