Антитела к Epstein-Barr virus, IgM (иммуноблот)

Вирус Эпштейна – Барр (Epstein-Barr virus, EBV) относится к герпес-вирусам и является одним из наиболее распространенных среди взрослого населения. Основная цель диагностики – дифференциация между острой и прошедшей инфекцией. Иммунный ответ при EBV-инфекции характеризуется образованием антител к капсидному (EBV-CA), ядерному (EBNA) и раннему (EBV-EA) антигенам EBV. На ранней стадии заболевания обнаруживаются антитела IgM и IgG к вирусному капсидному антигену. Выявление антител класса IgM к капсидному антигену (EBV-CA) считается достоверным индикатором наличия острой EBV-инфекции. Исследование предназначено для выявления антител IgM в сыворотке крови для диагностики заболеваний, возбудителем которых является EBV (инфекционный мононуклеоз, лимфома Беркитта, назофарингеальная карцинома).

Синонимы русские

Антитела класса IgM к вирусу Эпштейна – Барр, анти-VCA класса IgM, антитела к инфекционному мононуклеозу.

Синонимы английские

EBV-VCA Antibodies, IgM, Antibodies to Epstein-Barr Virus Viral Capsid Antigen, IgM, Infectious Mononucleosis (Epstein-Barr Virus Antibody to Viral Capsid Antigen) IgM, EBV VCA-IgM Ab.

Метод исследования

Иммуноблотинг.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус Эпштейна – Барр – это широко распространённый вирус семейства Herpesviridae, который размножается преимущественно в B-лимфоцитах, но также может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки. Путь передачи – воздушно-капельный. Пик заболеваемости – 15-25 лет. Первый контакт с вирусом Эпштейна – Барр происходит, как правило, в детском возрасте (до 10 лет), что приводит к развитию латентной бессимптомной или малосимптомной инфекции.

Инфицирование у взрослых людей приводит к развитию инфекционного мононуклеоза, который у большинства заболевших сопровождается лихорадкой, интоксикацией, а также поражением лимфоузлов (лимфоаденопатией), нёбных и глоточных миндалин. Нередко увеличивается печень, селезёнка, появляются петехии на слизистой верхнего нёба. В ряде случаев инфекционный мононуклеоз осложняется гепатитом, пневмонией, гемолитической анемией, тромбоцитопенией, апластической анемией, разрывом селезёнки, а также кардиологическими (миокардит) и неврологическими нарушениями (синдром Гийена – Барре, энцефалит, менингит). В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна – Барр, а также имеются гистологические признаки поражения внутренних органов (пневмонит, гепатит, гипоплазия костного мозга, увеит) и выявляются антигены или ДНК вируса в тканях. Кроме того, при этом состоянии часто выявляются очень высокие титры вирус-специфических антител. И, напротив, при синдроме хронической усталости титр антител к вирусу Эпштейна – Барр или другим вирусам лишь немного повышен.

Вирус Эпштейна – Барр инфицирует свыше 90 % здоровой популяции и сохраняется в небольших количествах в В-клетках памяти. Соответственно, около 90 % взрослых людей являются вирусоносителями. Вирус сохраняется в В-лимфоцитах и клетках эпителия на протяжении всей жизни и при снижении иммунитета (например, при ВИЧ-инфекции или иммуносупрессивной терапии) может способствовать развитию лимфопролиферативных заболеваний, назофарингеальной карциномы или – наиболее часто – инфекционного мононуклеоза.

Определение антител IgM и IgG к отдельным белкам позволяет более точно определять фазу течения инфекции, учитывая высокую частоту персистенции вируса. Иммуноблотинг для определения антител класса IgM и IgG к отдельным белкам дает дополнительную информацию о фазе течения инфекции. Выявление белка VСА 125 указывает на раннюю фазу течения инфекции. В период разгара течения инфекции и на этапе завершения острого процесса появляются VСА 19. О поздней фазе течения инфекции свидетельствует обнаружение высокоспецифичного маркера VСА 22, который выявляется одиночно или совместно с EBNA-1 (р79). Последний белок длительно присутствует у лиц, переболевших инфекцией, и убедительно свидетельствует о перенесенной инфекции. Отмечается частое присутствие IgM-р45 и IgM-p79 при активном процессе, IgM-p43 и IgG-p27 коррелирует с тяжестью течения инфекции, а выявление IgM-p65, IgM-p33 – с наличием гепато- и спленомегалии.

Данное исследование обладает высокой специфичностью (98 %) и чувствительностью (95%) метода, позволяет провести определение антител к отдельным антигенам вируса, полного спектра выявляемых клинически значимых антигенов, подтвердить результаты скрининга, провести дифференциальную диагностику между острой и прошедшей инфекцией.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики инфекционного мононуклеоза и оценки стадии инфекции.
• Для дифференциальной диагностики герпетических инфекций.
• Для дифференциальной диагностики при ангинах и тонзиллитах.
• Для выявления реактивации вируса Эпштейна – Барр при трансплантации органов и тканей.

Когда назначается исследование?

• При клинических (гепатоспленомегалия, тонзиллофарингит, припухлость околочелюстных и шейных лимфатических узлов) и лабораторных (атипичные лимфоциты в периферической крови) признаках инфекционного мононуклеоза.
• При сомнительных результатах ИФА-теста, а также в дополнение и для подтверждения результатов.
• При ВИЧ-инфекции.
• При проведении иммуносупрессивной терапии после трансплантации органов или костного мозга.

Что означают результаты?

Референсные значения

Компонент	Референсные значения
Антиген VCA p125	Не обнаружено
Антиген VCA p19	Не обнаружено
Антиген EBNA-1	Не обнаружено
Антиген p22	Не обнаружено
Антиген EA-D	Не обнаружено

Острая (первичная) инфекция:

• обнаружены антитела класса IgG и IgM к антигенам VCA;
• наличие IgM-антител к EBNA-1 также может указывать на первичную инфекцию.

Поздняя фаза инфекции:

• обнаружены антитела класса IgG к антигенам VCA (в особенности к антигену VCA р22, который является маркером поздней фазы EBV-инфекции);
• обнаружены антитела к EBNA-1.

Поздняя инфекция с отсутствием антител к EBNA-1:

• антитела к EBNA-1 отсутствуют, но присутствуют антитела к р22 в тестах на IgG-антитела;
• как правило, отсутствуют антитела к VCA в тестах на IgM-антитела;
• могут присутствовать антитела класса IgG к антигену EA-D.

Реактивация:

• обнаружены IgG-антитела к антигену ЕА.

Реактивацию отличают от свежей фазы инфекции по четко низкой распространенности IgM-антител к VCA и по присутствию антител класса IgG к EBNA-1 и/или к VCA p22.

Характеристика антигенов EBV:

VCA (капсидный вирусный антиген)	EA (ранний антиген)	EBNA (ядерный антиген ЕВ)
p125, p65, p42, p41, p40, p33, p22	EA-R p93, EA-D p45, EA-D p43	EBNA-1 p79

Интерпретация результатов по статусу инфекции:

Статус инфекции	Anti-VCA (IgG)	Anti-VCA (IgM)	Anti-EBNA-1 (IgG)	Anti-p22 (IgG)	Anti-EA-D (IgG)
Отсутствие	-	-	-	-	-
Острая инфекция	+	+	-	-	+/-
Поздняя фаза	+	-	+	+	-
Реактивация	+	+/-	+	+	+

 

Важные замечания

• Отрицательный результат теста не исключает острую инфекцию. При подозрении и клинических симптомах исследование рекомендовано повторить через 8 дней.
• Для выяснения статуса EBV-инфекции в случае иммуносупрессии у пациентов или у лиц с ослабленной иммунной системой рекомендуется определение вирусной нагрузки, так как серологические тесты часто несопоставимы с результатами прямых тестов.

Также рекомендуется

• Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
• Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
• Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA), IgG (количественно)
• Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
• Аспартатаминотрансфераза (АСТ)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, ЛОР, гематолог, терапевт, врач общей практики.

Литература

• Cohen J.I. Epstein-Barr virus infection / J.I. Cohen // N. Engl. J. Med. – 2000. – Vol. 343, N 7. – P. 481–492.
• Hess R.D. Routine Epstein-Barr virus diagnostics from the laboratory perspective: still challenging after 35 years / R.D.Hess // J. Clin. Microbiol.  – 2004. – Vol. 42, N 8. – P. 3381–3387.
• Johannsen E.C., Schooley R.T., Kaye K.M. Epstein-Barr Virus (Infectious Mononucleosis). In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.