Стероидный профиль в слюне, ВЭЖХ

Комплексное исследование, направленное на количественную оценку содержания основных стероидных гормонов в слюне, что необходимо для определения их баланса в организме и выявления каких-либо его нарушений. В состав комплекса входит анализ следующих гормонов: кортизон, кортизол, андростендион, дегидроэпиандростерон, тестостерон свободный, эстрадиол свободный, прогестерон свободный, 17-ОН-прогестерон.

Синонимы русские

Комплексное исследование - кортикостероидные гормоны (кортизол, кортизон); половые гормоны; андрогены (андростендион, дегидроэпиандростерон, тестостерон); эстрогены (эстрадиол); прогестагены (прогестерон); 17-ОН-прогестерон.

Синонимы английские

Complex analysis - corticosteroid hormones (cortisol, cortisone); gonadocorticoids, androgens (androstenedione, dehydroepiandrosterone, testosterone); estrogens (estradiol – 17-beta-estradiol, E2); progestagens (progesterone); 17-OH-progesterone.

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией.

Единицы измерения

Нг/мл (нанограмм на миллилитр), пг/мл (пикограмм на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Слюну.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• За сутки и в течение всего периода сбора слюны исключить употребление кофеина, алкоголя, физические нагрузки.
• Прием седативных препаратов, кортизона ацетата, эстрогенов, пероральных контрацептивов, глюкокортикоидных препаратов (в т. ч. мазей) может вызвать повышение уровня кортизола. Отмена лекарственных препаратов осуществляется строго по рекомендации лечащего врача.
• Не курить в течение 1 часа до сбора слюны.
• За 10 минут до сбора слюны прополоскать рот водой.
• За 30 минут до сбора слюны воздержаться от приема пищи, чистки зубов, использования зубной нити, ополаскивателей полости рта и жевательной резинки.

Общая информация об исследовании

Группу стероидных гормонов составляют преимущественно кортикостероиды и гонадостероиды (половые гормоны), они синтезируются различными эндокринными железами, но объединены под общим названием по нескольким причинам. Так, источником их синтеза является одно вещество – холестерин, сами гормоны являются липидами и могут проникать через клеточные мембраны (т.к. жирорастворимы), имеют схожий механизм действия на клетки-"мишени", играют очень важную роль в поддержании жизнедеятельности организма, обеспечивая контроль всех необходимых процессов на клеточном уровне.

Как правило, для диагностики гормональной патологии редко используется анализ только одного гормона, т.к. большинство из них (в пределах одного профиля) находится в очень тесном взаимодействии друг с другом. Поэтому чаще всего необходимо оценивать единовременно несколько показателей (в каждой конкретной ситуации необходимый спектр определяется врачом). Комплексное исследование стероидных гормонов в слюне включает в себя определение концентраций всех основных представителей этой группы и направлено на определение их баланса в организме – это анализ кортикостероидных гормонов (кортизол, кортизон); андрогенов (андростендион, дегидроэпиандростерон, тестостерон); эстрогенов (эстрадиол); прогестагенов (прогестерон); 17-ОН-прогестерона.

Кортизол и кортизон относятся к группе глюкокортикостероидов, синтезируются корковым слоем надпочечников под воздействием адренокортикотропного гормона (АКТГ), вырабатываемого гипофизом. Кортизол считается одним из важнейших гормонов стресса, он формирует защитные реакции в организме путем перераспределения метаболических процессов в органах и тканях, в частности глюкозы, осуществляет контроль сосудистого тонуса, мышечной работы и т.д. То есть гормон способствует мобилизации всех процессов в организме и направлению их работы на борьбу с критической ситуацией. Также кортизол участвует во всех видах обменных реакций (углеводных, жировых, белковых, водно-электролитных). Кортизон – второй по значимости (после кортизола) глюкокортикостероидный гормон, секретируется в небольшом количестве и выполняет функции, схожие с кортизолом.

Адрогены – группа стероидных гормонов, объединяющая мужские половые гормоны (которые присутствуют и у женщин), синтезируемые в половых железах - семенниках – у мужчин, в небольшом количестве в яичниках у женщин и корой надпочечников у обоих полов. Тестостерон – один из основных представителей этой группы, отвечает за формирование половых органов и развитие вторичных половых признаков у мальчиков (оволосение по мужскому типу, тембр голоса, развитие мускулатуры и т.д.). Под контролем гормона находится половая функция (либидо, эректильная функция) и репродуктивное здоровье. У женщин тестостерон участвует в поддержании гормонального баланса половых гормонов и так же, как у мужчин, участвует в формировании половой и репродуктивной функции. Анростендион является андрогеном, но вырабатывается по большей части яичниками у женщин, а также яичками у мужчин и надпочечниками. Роль гормона состоит в том, что он является предшественником эстрогенов и андрогенов, формируя дополнительный путь их синтеза, помимо прямого. Имеет достаточно низкую самостоятельную биологическую активность. Дегидроэпиандростерон (ДГЭА) также является достаточно слабым андрогеном, синтезируется преимущественно корой надпочечников (до 95 %), меньшая часть (до 5 %) – половыми железами.  Как и андростендион, играет роль предшественника эстрогенов и андрогенов и является показателем их нормального синтеза в организме. Функции этих двух гормонов, по сути, те же, что и основных половых гормонов, только выполняются не прямо, а опосредованно через процессы синтеза.

Эстрогены – общее название группы женских стероидных гормонов, которые вырабатываются в женских половых железах - яичниках, – а также в небольшом количестве у мужчин в семенниках и надпочечниках у обоих полов. Наиболее высокой биологической активностью обладает эстрадиол. Гормон отвечает за формирование вторичных половых признаков у девочек (женский тип фигуры, голос, оволосение, менархе и т.д.), регуляцию менструального цикла, нормальное развитие половой функции (либидо, способность к зачатию), наступление и вынашивание беременности, подготовку к родам, своевременное наступление менопаузы. Уровень гормона колеблется в зависимости от возраста, фазы менструального цикла, наличия беременности. Прогестерон считается главным гормоном беременности, хотя оказывает влияние на репродуктивную систему женщины и вне ее, все же свою ключевую роль играет именно в период подготовки и вынашивания плода. Вырабатывается преимущественно желтым телом, которое образуется в яичнике после выхода зрелого фолликула, и плацентой при наступлении беременности. Гормон отвечает за подготовку матки к имплантации яйцеклетки, ее мышц и связочного аппарата к вынашиванию беременности, молочных желез к лактации, участвует в формировании некоторых тканей и структур плода. Норма прогестерона также сильно варьируется в зависимости от фазы цикла и в период беременности.

17-ОН-прогестерон (или 17-гидроксипрогестерон) – еще один показатель комплекса, представляет собой промежуточный продукт в сложных гормональных превращениях, образуется из прогестерона и 17-гидропрегненолона в надпочечниках, гонадах, плаценте. Является субстратом для синтеза кортизола и андростендиона, который затем метаболизируется в эстрогены и андрогены.

Таким образом, стероидные гормоны образуют достаточно сложную систему, тесно взаимосвязанную между собой. Так как все они играют важнейшую роль в процессах жизнедеятельности и репродуктивной функции, существуют не только прямые способы их синтеза в эндокринных железах, но и обходные – путем многочисленных превращений из других гормонов. Это способствует обеспечению оптимальных концентраций – при нарушении в одном пути синтеза его может "подстраховать" другой, т.е. организм пытается поддерживать необходимый баланс. При возникновении какой-либо патологии концентрация гормонов может нарушаться, что необходимо своевременно диагностировать.

Лабораторная диагностика концентраций стероидных гормонов в слюне осуществляется современным методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ВЭЖХ). Это исследование позволяет разделить все компоненты в полученном образце слюны, то есть выделить отдельно каждый интересующий гормон, а затем подсчитать его концентрацию. Анализ сочетает простоту сбора материала с высокой точностью полученных результатов.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики патологии коры надпочечников и половых желез (новообразований, воспалительные процессов, врождённых аномалий развития и т.д.);
• для оценки функции системы гипоталамус - гипофиз – надпочечники (половые железы);
• для диагностики причин нарушений полового созревания (преждевременного или задержки) у девочек и мальчиков;
• у женщин – для диагностики причин нарушения менструального цикла, репродуктивной функции, патологии беременности, подозрении на бесплодие;
• у мужчин – при гинекомастии, эректильной дисфункции, бесплодии;
• для контроля терапии при лечении препаратами стероидных гормонов;
• для оценки гормонального статуса при применении вспомогательных репродуктивных технологий (при планировании ЭКО);
• для дифференциальной диагностики нарушений обмена веществ, водно-солевого баланса (при подозрении на гормональную этиологию данных нарушений).

Когда назначается исследование?

• Женщинам при тазовых болях, нарушениях менструального цикла, маточных кровотечениях, нарушениях зачатия, патологии беременности, бесплодии;
• мужчинам при нарушении половой и репродуктивной функции, симптомах феминизации, из которых наиболее часто встречается гинекомастия;
• при преждевременном или запоздалом развитии вторичных половых признаков и половой системы;
• при использовании вспомогательных репродуктивных технологий;
• при наступлении менопаузы, сопровождающейся приливами, психоэмоциональной лабильностью, бессонницей, аномальными кровотечениями;
• при нарушении обменных процессов с подозрением на гормональную причину.

Что означают результаты?

Референсные значения

Компонент	Пол	Возраст	Фаза цикла (для женщин)	Референсные значения
17-OH-прогестерон	мужской	Старше 18 лет		0,03–0,18 нг/мл
Андростендион	женский	Старше 18 лет		0,018–0,1 нг/мл
	мужской	Старше 18 лет		0,025–0,12 нг/мл
Дегидроэпиандростерон	женский	Старше 18 лет		0,03–0,15 нг/мл
	мужской	Старше 18 лет		0,04–0,17 нг/мл
Кортизол	женский	21–31 год		1,12–7,43 нг/мл
	мужской	21–31 год		2,72–13,5 нг/мл
	женский	31–51 год		1,22–15,5 нг/мл
	мужской	31–51 год		0,94–15,1 нг/мл
	женский	Старше 51 года		1,12–8,12 нг/мл
	мужской	Старше 51 года		1,49–7,39 нг/мл
	женский	18–21 год		0,94–15,5 нг/мл
	мужской	18–21 год		0,94–15,5 нг/мл
Кортизон	женский	Старше 18 лет		2,6–27,65 нг/мл
	мужской	Старше 18 лет		2,82–26,35 нг/мл
Прогестерон свободный	женский	Старше 18 лет	Фолликулиновая (пролиферативная) (3-14-й день)	0,005–0,02 нг/мл
			Лютеиновая (15-й день – до начала менстр.)	0,08–0,2 нг/мл
			Овуляторная (13-15-й день)	0,009–0,058 нг/мл
			Постменопауза	0,005–0,034 нг/мл
			Менструация	0,005–0,02 нг/мл
	мужской	Старше 18 лет		0,01–0,1 нг/мл
Тестостерон свободный	женский	Старше 18 лет		0,006–0,03 нг/мл
	мужской	Старше 18 лет		0,035–0,2 нг/мл
Эстрадиол свободный	женский	Старше 18 лет		1–30 пг/мл
	мужской	Старше 18 лет		1–20 пг/мл

Причины повышения уровня кортизола/кортизона:

• болезнь Кушинга (при новообразованиях гипофиза);
• синдром Кушинга (новообразования коры надпочечников);
• стресс, чрезмерные физические нагрузки;
• опухоли других локализаций, способные к секреции АКТГ;
• ожирение.

Причины снижения уровня кортизола/кортизона:

• болезнь Аддисона (недостаточность коры надпочечников);
• гипопитуитаризм (снижение концентрации гормонов гипофиза);
• патология коры надпочечников вследствие воспалительных процессов или новообразований;
• длительный прием лекарственных препаратов глюкокортикостероидов;
• беременность и др.

Причины повышения уровня тестостерона свободного:

У мужчин:

• опухоли яичек и надпочечников;
• раннее половое созревание у мальчиков;
• синдром Иценко – Кушинга.

У женщин:

• синдром поликистозных яичников;
• опухоль яичников и надпочечников;
• адреногенитальный синдром (врождённая гиперплазия коры надпочечников);
• синдром Иценко – Кушинга.

Причины понижения уровня тестостерона свободного:

У мужчин:

• генетические нарушения полового развития, патология яичек;
• патология гипоталамо-гипофизарной системы;
• прием гормональный препаратов;
• пожилой возраст.

У женщин снижение свободного тестостерона не несет доказанного клинического значения.

Причины повышения уровня андростендиона:

• гиперпродукция яичниками (например, при синдроме поликистозных яичников, новообразованиях яичников);
• гиперпродукция надпочечниками (врождённая гиперплазия коры надпочечников, синдром Кушинга);
• АКТГ-секретирующие опухоли иных локализаций.

Причины понижения уровня андростендиона:

• недостаточность коры надпочечников или яичников.

Причины повышения уровня дегидроэпиандростерона (ДГЭА):

• патология надпочечников (гиперплазия, новообразования, синдром Иценко – Кушинга);
• болезнь Иценко – Кушинга (при аденоме гипофиза – приводит к усиленной работе надпочечников);
• опухоли, вызывающие секрецию АКГТ;
• новообразования половых желез.

Причины понижения уровня дегидроэпиандростерона (ДГЭА):

• болезнь Аддисона (снижение уровня гормонов надпочечников);
• гипоплазия надпочечников;
• новообразования гипоталамо-гипофизарной системы;
• пангипопитуитаризм (сниженная концентрация гормонов гипофиза);
• синдром поликистозных яичников;
• применение некоторых препаратов, в том числе гормональных, злоупотребление алкоголем;
• длительный психоэмоциональный стресс.

Причины снижения уровня эстрадиола:

• патология яичников;
• гипогонадизм – недоразвитие половых желез и снижение их функции;
• экстремальные диеты и чрезмерные физические нагрузки (нарушения пищевого поведения, анорексия);
• постменопауза;
• гипопитуитаризм – нарушение в работе гипофиза со снижением продуцируемых им гормонов.

Причины повышения уровня эстрадиола:

• преждевременное половое созревание;
• новообразования яичников, яичек или надпочечников;
• патология щитовидной железы с развитием гипертиреоза;
• патология печени (цирроз);
• ожирение;
• гинекомастия у мужчин – увеличение грудной железы.

Причины повышения уровня прогестерона:

• киста яичников, опухоли яичников;
• врождённая гиперплазия надпочечников;
• некоторые виды дисфункциональных маточных кровотечений;
• патологическая беременность, а также пузырный занос или хорионкарцинома.

Причины понижения уровня прогестерона:

• хроническое воспаление половых органов;
• аменорея;
• внематочная беременность;
• угроза выкидыша, плацентарная недостаточность;
• нарушения внутриутробного развития плода;
• прием некоторых препаратов.

Причины повышения уровня 17-ОН-прогестерона:

• врождённая гиперплазия надпочечников с дефицитом ферментов 11–бета-гидроксилазы и 21–гидроксилазы;
• некоторые новообразования коры надпочечников и половых желез.

Причины понижения уровня 17-ОН-прогестерона:

• болезнь Аддисона;
• при установленном диагнозе "гиперплазия надпочечников" снижение показателя является положительным эффектом лечения.

Что может влиять на результат?

Необходимо отметить, что норма концентрации стероидных гормонов зависит от времени суток, в которые был взят материал, возраста и пола, у женщин – от фазы менструального цикла, наличия беременности. Кроме того, на результат может повлиять наличие сопутствующих заболеваний и прием некоторых лекарственных препаратов (особенно, гормональных). Перед исследованием необходимо проконсультироваться с врачом, а также принимать во внимание все вышеперечисленные факторы, влияющие на результат исследования.

Также рекомендуется

[40-148] Мужской гормональный статус – базовые лабораторные показатели

[40-149] Женский гормональный статус – базовые лабораторные показатели

Кто назначает исследование?

Гинеколог, уролог, эндокринолог, репродуктолог, терапевт, онколог.

Литература

• Koal T, Schmiederer D, Pham-Tuan H, Röhring C, Rauh M. Standardized LC-MS/MS based steroid. J Steroid Biochem Mol Biol. 2012 Apr; 129(3-5):129-38.
• Soldin SJ, Soldin OP. Steroid hormone analysis by tandem mass spectrometry. Clin Chem. 2009 Jun; 55(6):1061–6.
• Vieira JG, Nakamura OH, Carvalho VM. Determination of cortisol and cortisone in human saliva by a liquid chromatography-tandem mass spectrometry method. Arq Bras Endocrinol Metabol. 2014 Nov; 58(8):844-50. Epub 2014 Nov 1.
• Zhang K, Fent K. Determination of two progestin metabolites (17α-hydroxypregnanolone and pregnanediol) and different classes of steroids (androgens, estrogens, corticosteroids, progestins) in rivers and wastewaters by - performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Sci Total Environ. 2018 Jan 1;610-611:1164-1172.