Прегненолон в слюне, ВЭЖХ

Исследование, направленное на определение в слюне концентрации прегненолона, который является одним из предшественников стероидных гормонов. Анализ используется в составе комплексной диагностики адреногенитального синдрома.

Синонимы английские

Pregnenolone, P5.

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией.

Единицы измерения

Нг/мл (нанограмм на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Слюну.

Как правильно подготовиться к исследованию

• За сутки и в течение всего периода сбора слюны исключить употребление кофеина, алкоголя, физические нагрузки.
• Не курить в течение 1 часа до сбора слюны.
• За 10 минут до сбора слюны прополоскать рот водой.
• За 30 минут до сбора слюны воздержаться от приема пищи, чистки зубов, использования зубной нити, ополаскивателей полости рта и жевательной резинки.

Общая информация об исследовании

Прегненолон является гормоном, синтез которого в организме осуществляется на основе холестерина в надпочечниках. Он играет роль промежуточного звена в реакциях биосинтеза стероидных гормонов: кортизола, альдостерона, половых гормонов (эстрогенов, прогестерона, тестостерона и др.). Кроме того, гормон синтезируется в определенных локализациях мозга, где проявляет самостоятельную биологическую активность в качестве нейростероида. Это позволяет принимать участие в процессах развития нейронов, миелинизации, оказывать нейропротективное действие.

Лабораторное выявление прегненолона в образце биологического материала наиболее часто применяется при диагностике адреногенитального синдрома, который представляет собой гиперплазию коры надпочечников врожденной этиологии, основой которой служит дефект одного из ферментов в каскаде синтеза стероидных гормонов. Это ведет к снижению их количества, что влечет за собой по принципу отрицательной обратной связи усиленное образование гормонов гипофиза с последующим увеличением размеров надпочечников и синтеза ими промежуточных звеньев реакций образования стероидных гормонов. Одним из таких промежуточных субстратов и является гормон прегненолон. Адреногенитальный синдром имеет несколько типов, классифицируется по различным параметрам, каждый из которых имеет особенности клинических проявлений, возраст, в котором они возникли, течение и прогноз. Наиболее часто встречаются следующие виды ферментопатий при данном синдроме: дефицит 21–гидроксилазы (самая частая форма, встречается в 90 % случаев); дефицит 11–бета-гидроксилазы (5-8 % случаев); дефицит 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы (редкая форма, 3-5 % случаев) и другие более редкие формы. Дифференциальная диагностика каждого типа патологии основывается на лабораторном исследовании стероидных гормонов и их предшественников. Например, для верификации дефицита 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы наиболее показателен анализ на определение уровня прегненолона. Помимо привычного исследования крови на содержание гормона, один из современных методов диагностики - оценка концентрации гормона в слюне. Это объясняется тем, что в слюне можно выявить только биологически активную часть гормона, которая является биодоступной для органов-мишеней. В крови же гормон находится в виде двух форм -свободной и связанной с белками; при фильтрации через слюнные железы связанная часть гормона не проходит через мембраны, поэтому в слюне оказывается только свободная его часть. Анализ данной биологической жидкости показывает концентрацию свободного (биологически активного) гормона, к которому восприимчивы рецепторы, что позволяет точнее определять наличие дефицита или избытка гормона.

Исследование слюны на прегненолон проводится методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ВЭЖХ). Этот современный метод позволяет выделить из образца соответствующий гормон на основе его физико-химических свойств, а затем подсчитать уровень его концентрации количественно. Анализ сочетает в себе простоту сбора материала с высокой точностью полученных результатов.

Таким образом, повышение уровня прегненолона – характерный признак дефицита фермента 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы. Однако следует отметить, что это не единственный критерий постановки диагноза. В подавляющем большинстве случаев тест выполняют в составе комплексной лабораторной диагностики, которая включает в себя определение концентрации стероидных гормонов и их метаболитов. Кроме того, интерпретация результата осуществляется только врачом с учетом данных анамнеза, клинической картины, результатов лабораторных и инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики адреногенитального синдрома (в частности, дефицита 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы).
• Для определения биологически активной части гормона, т.е. доступной для восприятия рецепторами.
• Для подбора наиболее оптимальных доз гормональной терапии и мониторинга ее эффективности.

Когда назначается исследование?

• При обследовании пациентки с признаками гиперандрогении: гирсутизм (рост волос на коже над верхней губой, подбородка, белой линии живота), акне, андрогенная алопеция, нарушение менструального цикла.
• При обследовании младенца с признаками нарушения дифференцировки пола (наружные половые органы, обладающие чертами как женского, так и мужского пола).
• При необходимости оценить не только общий уровень гормона, но и его активную часть.
• При необходимости контроля эффективности гормональной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: 0.573 – 0.665 нг/мл.

Причины повышения:

• дефицит фермента 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы.

Что может влиять на результат?

• Применение некоторых лекарственных препаратов.

Важные замечания

• Для получения точного результата необходимо выполнять рекомендации по подготовке к исследованию.
• Результат анализа необходимо оценивать с учетом всех значимых клинических, лабораторных и инструментальных исследований.

Также рекомендуется

[08-030] Кортизол

[08-031] Кортизол в моче

[08-003] 17-гидроксипрогестерон (17-ОПГ)

[08-110] Дегидроэпиандростеронсульфат (ДЭА-SO4)

[08-050] Тестостерон свободный

[08-120] Эстрадиол

Кто назначает исследование

Эндокринолог, гинеколог, дерматовенеролог, педиатр, генетик, врач общей практики.

Литература

• Miyashita T, Okubo M, Shinomiya T, Nakagawa K, Kawaguchi M. Pregnenolone biosynthesis in the rat salivary gland and its inhibitory effect on secretion. J Pharmacol Sci. 2011;115(1):56-62.
• Dušková M, Šimůnková K, Vítků J, Sosvorová L, Jandíková H, Pospíšilová H, Šrámková M, Kosák M, Kršek M, Hána V, Žánová M, Springer D, Stárka L. A Comparison of Salivary Steroid Levels during Diagnostic Tests for Adrenal Insufficiency. Prague Med Rep. 2016;117(1):18-33.
• Shimizu Y. [Pregnenolone, pregnenolone sulfate]. Nihon Rinsho. 2005 Aug;63 Suppl 8:336-9.
• Katsumata N. Genetic defects in pregnenolone synthesis. Pediatr Endocrinol Rev. 2012 Oct;10 Suppl 1:98-109.