Toxoplasma gondii, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Молекулярно-генетическое исследование, направленное на выявление активной токсоплазменной инфекции.

Синонимы русские

Токсоплазма гондии, возбудитель токсоплазмоза.

Синонимы английские

Toxoplasmosis, DNA, Toxoplasma gondii  Molecular Detection by PCR, T. gondii quantitative real-time PCR.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Амниотическую жидкость, биоптат, венозную кровь, капиллярную кровь, ликвор.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Токсоплазма гондии –  это одноклеточный паразитарный микроорганизм, который обнаруживается в земле и в организме некоторых животных и способен вызывать инфекционное заболевание токсоплазмоз.

Токсоплазма очень распространена во всем мире. Инфицированность населения в некоторых странах составляет 95 %. Данный паразит способен поражать млекопитающих, грызунов и птиц. Это одна из так называемых TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий токсоплазмы, краснухи, цитомегаловируса, герпеса), являющихся опасными для плода.

Путь инфицирования токсоплазмами обычно пероральный. Микроорганизм попадает в организм человека с водой и едой, зараженной паразитами, особенно с сырым или недостаточно термически обработанным мясом. Так как частым переносчиком инфекции являются кошки, заражение возможно при уборке кошачьего туалета инфицированного животного и несоблюдении личной гигиены. Вероятен трансплацентарный путь передачи инфекции –  от матери к ребенку. Человек также может заразиться при переливании крови и пересадке донорских органов.

Жизненный цикл микроорганизма проходит со сменой хозяев. Домашний кот, как окончательный хозяин, заражается при поедании грызунов и птиц. В кишечнике котов токсоплазма делится и формирует ооцисты. При активной инфекции миллионы микроскопических ооцист в течение нескольких недель выделяются с кошачьими экскрементами. Ооцисты становятся заразными через 2-3 дня и сохраняют жизнеспособность несколько месяцев. В организме других хозяев, в том числе и людей, токсоплазмы проходят ограниченный период жизненного цикла и формируют неактивные цисты в мышцах, головном мозге и глазах. Иммунная система хозяина способна сохранять цисты в покоящемся состоянии и защищать организм от развития инфекции. Стадия покоя может длиться всю жизнь, пока не возникнет иммунодефицит. У большинства здоровых людей попадание токсоплазмы в их организм может пройти бессимптомно или под видом легкой простуды. Токсоплазменная инфекция играет роль в развитии таких психических заболеваний, как шизофрения, психозы. При токсоплазменном поражении органов зрения возникает хориоретинит.

Впервые возникшая или реактивированная токсоплазменная инфекция может протекать тяжело и вызывать осложнения у пациентов с ослабленной иммунной системой: пациентов с ВИЧ, первичными иммунодефицитами, больных, получающих химиотерапию или иммуносупрессивную терапию после трансплантации органов.

Признаки токсоплазмоза: длительная лихорадка, головная боль, увеличение лимфатических узлов, боль в мышцах, увеличение печени, гепатиты. Внутриутробное инфицирование приводит к слепоте, энцефаломиелиту, задержке роста и даже к гибели новорождённых. У пациентов с иммунодефицитами инфекция вызывает менингит и  энцефалит (воспаление головного мозга с нарушением сознания, головной болью, лихорадкой). Ранняя диагностика играет решающую роль в эффективности лечения. Избавиться от паразита при хронической инфекции очень трудно.

При инфицировании во время беременности риск передачи токсоплазмы плоду составляет 30-40 %. Заражение в ранние сроки приводит к выкидышу, мертворождению или серьезным неврологическим нарушениям у новорождённого. У большинства детей, инфицированных в поздние сроки беременности,  симптомы токсоплазмоза проявляются только через несколько лет после рождения: потеря слуха, серьезные проблемы с глазами и неврологический дефицит.

Существует несколько способов выявления токсоплазмоза. Выбор методики и материала зависит от клинической картины заболевания. Чтобы обнаружить первичную или вторичную токсоплазменную инфекцию и определить ее активность, измеряют уровень антител IgМ и IgG в сыворотке (серологический метод) и распознают ДНК микроорганизма (ПЦР). Молекулярно-генетический метод обладает высокой чувствительностью и видоспецифичностью –  при активной инфекции ДНК токсоплазм можно определить с большой точностью.

Присутствие ДНК т. гондии в крови и моче свидетельствует об активном инфекционном процессе.

Для чего используется исследование?

• Чтобы определить активность токсоплазменной инфекции у беременных и у пациентов с иммунодефицитами.
• Чтобы оценить риск заражения плода при беременности.
• Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих с лихорадкой, энцефалитом и поражением органов зрения.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на токсоплазмозменную инфекцию (симптомы: лихорадка, головная боль, неврологические нарушения, тяжелые инфекционные поражения органов зрения) или ее носительство и при наличии факторов риска заразиться токсоплазмозом.
• При подозрении на токсоплазмоз у беременных и пациентов с патологией иммунной системы.
• При планировании беременности в целях профилактики заражения плода.
• При положительных результатах теста на антитела к токсоплазме.
• При обследовании детей, родившихся от матерей с токсоплазмозом.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата

• Активная форма токсоплазмоза –  острая инфекция.

Причины отрицательного результата

• Отсутствие токсоплазм в организме.
• Латентная (неактивная) токсоплазменная инфекция –  покоящиеся цисты в тканях.
• Недостаточное количество ДНК микроорганизма в биоматериале.

Важные замечания

Для выявления первичного заражения или хронизации инфекционного процесса необходимо комплексное обследование с учетом уровня специфических IgG и IgM. Результаты ПЦР-диагностики являются основным критерием активности токсоплазменной инфекции, но не могут подтвердить отсутствие токсоплазм в организме.

Также рекомендуется

• Toxoplasma gondii, IgG (количественно)
• Toxoplasma gondii, IgM
• Определение антител к вирусу краснухи, IgG (количественно)
• HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, инфекционист, невропатолог, офтальмолог.

Литература

1. Fuentes I, Rodriguez M, Domingo CJ, del Castillo F, Juncosa T, Alvar J. Urine sample used for congenital toxoplasmosis diagnosis by PCR. J Clin Microbiol. 1996 Oct; 34(10):2368-71. PMID: 8880481.
2. Gilles R. G. Monif.  Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology. 5^th edition. The Pantenon Publishing Group. NY, USA, 2003: 1044 pp.
3. Harrison's Principles of Internal Medicine. 16^th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 2607.
4. Manal S E Mahmoud. Detection of Toxoplasma gondii antigens in urine by reverse latex agglutination test during human toxoplasmosis. Journal of the Egyptian Society of Parasitology (2002). Volume: 32, Issue: 2, Pages: 429-446. PubMed: 12214921.