Yersinia enterocolitica, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя иерсиниоза (Yersinia enterocolitica), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма в образце биоматериала.

Синонимы русские

Иерсиния, возбудитель иерсиниоза [полимеразная цепная реакция].

Синонимы английские

Y. enterocolitica, DNA [polymerase chain reaction, PCR].

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить (по согласованию с врачом) прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.), и препаратов, влияющих на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.

Общая информация об исследовании

Иерсиния – это грамотрицательная коккобактерия ,являющаяся возбудителем иерсиниоза. Иерсиниоз часто протекает по типу гастроэнтерита, однако наблюдаются и другие формы этого заболевания, например мезентериальный лимфаденит, который можно легко принять за острый аппендицит, или сепсис. Инфицирование происходит при употреблении зараженных продуктов питания или воды. Естественными переносчиками этого патогена являются свиньи, овцы, крупный рогатый скот, а также собаки и кошки. Благодаря способности иерсинии расти в условиях пониженных температур, этот микроорганизм сохраняет жизнеспособность и патогенность в охлажденных до +4°С продуктах питания. 

Клиническая картина иерсиниоза хотя и имеет некоторые характерные черты, очень похожа на другие желудочно-кишечные инфекции, а основным способом диагностики этого заболевания является лабораторное исследование. "Золотым стандартом" диагностики иерсиниоза считается посев на питательную среду (бактериологический метод). Однако выращивание иерсинии на питательной среде – это достаточно трудная задача, и для этого требуется специальная обогащенная и охлажденная среда. Даже при использовании подходящей среды для выращивания колоний иерсинии требуется нужно 2 недели. Эти трудности объясняют необходимость использования других методов диагностики иерсиниоза. Молекулярные методы диагностики – относительно новая группа методов, основанная на определении генетического материала микроорганизма в образце биологического материала. В зависимости от клинической формы иерсиниоза могут быть использованы кровь, моча, спинномозговая жидкость, однако чаще всего используется кал.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из современных молекулярных методов. ПЦР обладает несколькими преимуществами по сравнению с другими методами диагностики иерсиниоза:

• Быстрота получения результата.
• Высокая чувствительность исследования. Теоретически для осуществления этой реакции достаточно всего 1 молекулы ДНК. На практике, однако, требуется около 10-1000 молекул. Так как для осуществления реакции достаточно фрагментов ДНК, а не наличия живого микроорганизма, исследование идеально подходит при работе с биологическим материалом, забранным на фоне начатой терапии антибиотиками.
• Высокая специфичность. Так как в реакции используются специфические именно к Y. enterocolitica праймеры, метод позволяет четко дифференцировать этот патоген от других, схожих в микробиологическом, культуральном и антигенном плане бактерий.

Следует отметить некоторые ограничения метода ПЦР:

• Исследование не может быть использовано для контроля лечения: результат анализа будет оставаться положительным (ложноположительным) еще в течение некоторого времени после начала лечения, даже если лечение эффективно.
• Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем культурологического метода, подвержена влиянию антибактериальных препаратов. Однако максимально точный результат теста будет получен при анализе биоматериала, полученного до начала лечения.

Результат исследования ПЦР оценивается с учетом анамнестических, клинических и других лабораторных данных.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики иерсиниоза.

Когда назначается исследование?

• При наличии симптомов иерсиниоза: лихорадки, тошноты, боли в животе (боль может локализоваться в правой паховой области), диареи, а также узловатой эритемы или экссудативного фарингита;
• в некоторых случаях при подозрении на острый аппендицит.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат:

• иерсиниоз.

Отрицательный результат:

• норма.

Что может влиять на результат?

• Применение антибактериальных препаратов (аминогликозиды, котримоксазол, цефалоспорины, тетрациклины, фторхинолоны).

Важные замечания

• Исследование не предназначено для контроля лечения заболевания;
• результат исследования оценивают с учетом анамнестических, клинических и дополнительных лабораторных данных.

Также рекомендуется

[02-009] Копрограмма

[09-101] Yersinia pseudotuberculosis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

[40-179] Диагностика иерсиниоза и псевдотуберкулеза

[02-001] Анализ кала на скрытую кровь

[02-012] Анализ кала на цисты простейших

[02-010] Анализ кала на яйца гельминтов

[40-169] Лабораторная диагностика гельминтозов и паразитозов

[40-156] Целиакия. Скрининг при селективном дефиците IgA

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, врач общей практики.

Литература

1. Nakajima H, Inoue M, Mori T, Itoh K, Arakawa E, Watanabe H. Detection and identification of Yersinia pseudotuberculosis and pathogenic Yersinia enterocolitica by an improved polymerase chain reaction method.J Clin Microbiol. 1992 Sep;30(9):2484-6.
2. McPhee S.J., Papadakis M. CURRENT Medical Diagnosis and Treatment / S. J. McPhee, M. Papadakis; 49 ed. – McGraw-Hill Medical, 2009.