Cytomegalovirus, ДНК, количественно [реал-тайм ПЦР]

Исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) возбудителя цитомегаловирусной инфекции, Cytomegalovirus, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Синонимы русские

Цитомегаловирус; ЦМВ; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.

Синонимы английские

Cytomegalovirus; CMV; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Амниотическая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, биоптат (биоптат легких, печени, ЖКТ), венозная кровь, ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюна, первая порция утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus, и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.

По данным различных исследований, носительство цитомегаловирусной инфекции выявляется у 60-90 % взрослого населения. ЦМВИ также входит в группу TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских токсоплазмы – Toxoplasma, краснухи – Rubella, цитомегаловируса – Cytomegalovirus, герпеса – Herpes), – являющихся потенциально опасными для развития плода и вызывающими тяжелые поражения органов у новорождённых детей. Цитомегаловирус является ведущей причиной врождённых инфекций во всем мире и обнаруживается у 0,2-2,2 % новорождённых. У 10 % таких детей развиваются клинические признаки заболевания с рождения, у части в течение первых десяти лет жизни.

Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме. Также следует отметить, что для ЦМВИ характерна длительная персистенция возбудителя в организме человека. Это приводит к тому, что множество людей является носителями этого вида инфекции на протяжении долгих лет и, возможно, всей жизни. При ослаблении иммунной системы может отмечаться тяжелое течение заболевания.

Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгии, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита.

У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита.

Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Последнее очень опасно в связи с тем, что предполагает отсутствие у женщины предварительного иммунитета к цитомегаловирусу и, следовательно, незащищенность здоровья ребенка. При этом развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели ребенка на стадии "эмбриона". При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, головной мозг. Отмечается энцефаломаляция, церебральная кальцификация, увеличение селезёнки, печени, гепатит. Возможно также заражение ребенка во время родов при прохождении родовых путей. При хронической врождённой ЦМВИ возникает фиброз внутренних органов и пороки развития: гидроцефалия, микроцефалия, увеит, слепота, пороки сердца, нейросенсорная потеря слуха и другие неврологические нарушения. Отмечается отставание и в неврологическом и психическом развитии.

В связи с тем что клиническая диагностика ЦМВИ в большинстве случаев затруднена, лабораторная диагностика очень важна. Современным методом диагностики ЦМВИ является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени. Это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) цитомегаловируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Он позволяет определять ДНК цитомегаловируса в случае подозрения на острую, текущую ЦМВИ у детей и взрослых, у людей с патологией иммунной системы, у беременных женщин. Преимуществом метода является возможность его использования для диагностики заболевания на ранних стадиях, при латентной и персистирующих формах инфекции. Возможно проведение исследования в биоматериале, взятом у новорождённых детей в случае подозрения на врождённую форму ЦМВИ или при инфицировании матери. Используется для дифференциальной диагностики инфекции, вызванной цитомегаловирусом, и других вирусных инфекций. Рекомендуется также для оценки эффективности проводимой терапии.

Для чего используется исследование?

• Для подтверждения ЦМВИ.
• Для диагностики острой или текущей ЦМВИ.
• Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы ЦМВИ в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
• Для диагностики латентной формы ЦМВИ.
• Для диагностики персистентной формы ЦМВИ.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на ЦМВИ и ее клинических проявлениях.
• При подозрении на латентную и персистентную формы ЦМВИ.
• При клинических проявлениях ЦМВИ у лиц с иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях.
• При поражении легких, желудочно-кишечного тракта, нервной системы, почек, печени предположительно цитомегаловирусной этиологии.
• При атипичном течении заболеваний бронхо-легочной системы у детей, при пневмонии.
• Во время беременности (при симптомах заболевания, при подозрении на нарушения развития плода, для скрининга ЦМВИ).
• Женщинам при патологии беременности: невынашивание беременности, замершая беременность, самопроизвольные аборты, гибель ребенка на стадии "эмбриона".
• Обследование плода при инфицировании беременной женщины во время беременности, признаках внутриутробной инфекции.
• Новорождённым детям: если его мать перенесла первичную цитомегаловирусную инфекцию во время беременности; если у ребенка есть симптомы врождённой инфекции: анемия, геморрагия, гепатит, микроцефалия, увеличение селезенки и/или печени, нарушение слуха, зрения, пороки сердца, неврологические нарушения (задержка умственного развития, конвульсии).
• При оценке контроля проведенного лечения против ЦМВИ.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

Результат "не обнаружено":

• отсутствие инфицирования цитомегаловирусом.

Результат "обнаружено":

• инфицирование цитомегаловирусом;
• острая, текущая, персистентная, латентная формы ЦМВИ.

Важные замечания

• Диагностика ЦМВИ является комплексной и основана на сочетании анамнестических, клинических данных и результатах лабораторных исследований.
• Метод ПЦР в режиме реального времени позволяет выявлять части и молекулу ДНК цитомегаловируса при любых формах ЦМВИ. Преимуществом метода является возможность его использования для диагностики заболевания на ранних стадиях, при латентной и персистирующих формах инфекции. Важно отметить, что с помощью данного метода невозможно проводить дифференциальную диагностику форм ЦМВИ, так как генетический материал вируса может быть обнаружен и при латентной форме инфекции.

Также рекомендуется

[07-016] Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG

[07-017] Cytomegalovirus, IgG

[07-018] Cytomegalovirus, IgM

[09-003] Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]

[40-129] Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, инфекционист, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, хирург.

Литература

1. Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
2. Liu Z, Zhang P, Tang S, He X, Zhang R, Wang X, Yuan Z, Tan J, Peng B, Liu E, Fu Z, Zou L. Urine real-time polymerase chain reaction detection for children virus pneumonia with acute human cytomegalovirus infection / BMC Infect Dis. 2014 May 8;14:245.
3. Ross SA, Ahmed A, Palmer AL, Michaels MG, Sánchez PJ, Bernstein DI, Tolan RW Jr, Novak Z, Chowdhury N, Fowler KB, Boppana SB; National Institute on Deafness and Other Communication Disorders CHIMES Study. Detection of congenital cytomegalovirus infection by real-time polymerase chain reaction analysis of saliva or urine specimens / J Infect Dis. 2014 Nov 1;210(9):1415-8.
4. Gaytant M A, Steegers E A P, Semmekrot B A, Merkus H M M W, Galama J M D. Congenital cytomegalovirus infection: Review of the epidemiology and outcome. Obstet Gynecol Surv 2002; 57: 245-256.