Plasmodium spp., Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, ДНК [реал‑тайм ПЦР]

Качественное определение ДНК всех видов малярийных плазмодиев (Plasmodium spp.) и дифференциация ДНК возбудителей тропической (P. falciparum) и трехдневной (P. vivax) малярии в биологическом материале методом ПЦР.

Синонимы русские

Малярия, возбудители малярии, малярийные плазмодии.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Малярия – это инфекционное заболевание, которое вызывает повторяющиеся приступы озноба и лихорадки. Возбудителем являются паразиты – малярийные плазмодии (Plasmodium spp), передающиеся с укусами комаров – носителей инфекции. Plasmodium vivax - возбудитель 3-дневной малярии, Plasmodium falciparum - возбудитель тропической малярии. Реже малярия распространяется через переливание крови или от матери к плоду. Чаще всего она встречается в странах с тропическим и субтропическим климатом.

Жизненный цикл малярийного паразита начинается, когда самка комара вида анофелес, питаясь кровью больного малярией, проглатывает паразитов. В процессе полового развития в организме комара из них развиваются спорозоиты (одна из жизненных форм паразита), располагающиеся в слюнных железах насекомого. При укусе комар вводит слюну со спорозоитами в организм человека, где они размножаются бесполым путем в клетках печени. После периода созревания, длящегося от нескольких суток до нескольких месяцев, паразиты высвобождаются из клеток печени и проникают в эритроциты (красные кровяные тельца), что является началом активной фазы болезни. В эритроцитах происходит дальнейшее бесполое размножение паразитов; при разрыве оболочки эритроцита (каждые 48-72 часа) плазмодии оказываются в плазме крови, что обуславливает возникновение лихорадки и озноба. Затем они проникают в непораженные эритроциты и цикл повторяется. Промежуточные формы плазмодий способны сохраняться в организме (в печени) до нескольких лет, вызывая повторное развитие заболевания даже после курса лечения.

Для малярии характерно периодическое повторение приступов (каждые 48-72 часа, в зависимости от вида возбудителя). Приступ длится примерно 1–2 часа и сопровождается следующими симптомами:

• озноб   – от умеренного до тяжелого,
• высокая температура тела (до 39-41 °С),
• кашель,
• обильное потоотделение (появляется в конце приступа и сопровождается снижением температуры до нормальной или ниже нормы).

Кроме того, могут появляться другие симптомы:

• головная боль,
• тошнота, рвота, понос,
• усталость, быстрая утомляемость,
• потеря аппетита,
• боль в мышцах,
• желтуха.

Как правило, малярия проявляется в течение нескольких недель после укуса зараженного комара. Однако некоторые паразиты могут находиться в организме несколько месяцев или лет, не вызывая никаких симптомов. Вероятен вторичный, латентный период после прекращения приступов: температура нормализуется, но у части больных сохраняется субфебрильная температура при отсутствии плазмодиев в крови за счет вегетативных расстройств или присоединения вторичной инфекции.

Plasmodium vivax вызывает трехдневную малярию (vivax-малярию) - относительно легкую форму с длительным течением. При этом приступы лихорадки наступают каждые двое суток, нередко в одно и то же время. P. Vivax распространен в Таджикистане, Афганистане, Пакистане и Непале, а также в Центральной Америке и северной части Южной Америки.

Plasmodium falciparum вызывает тропическую малярию - наиболее опасную разновидность болезни; на нее приходится более 90% от всех заражений. Приступы лихорадки случаются нерегулярно; при этом заболевание поражает сосуды, что может приводить сначала к гипоксии и затем к отказу органов. Этот вид преобладает во всей Африке, а в Индии, Вьетнаме и Таиланде встречается примерно так же часто, как трехдневная малярия.

Чаще всего малярией болеют люди, живущие или бывающие в странах с тропическим и субтропическим климатом (африканские государства к югу от пустыни Сахары, индийский субконтинент, Соломоновы острова, Папуа-Новая Гвинея и Гаити). Более тяжелому течению малярии подвержены дети до 5 лет, туристы из регионов, где не распространено данное заболевание, посетившие субтропические или тропические страны, беременные и их еще не рождённые дети.

Заподозрить заболевание позволяют периодические приступы лихорадки, особенно если пациент находился в очагах малярии за последние два года. Определение генетического материала малярийного плазмодия методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет выявить даже незначительное число возбудителей заболевания в крови.

Для чего используется исследование?

Диагностика малярии.

Когда назначается исследование?

При подозрении на заболевания, вызванные группой малярийных плазмодиев, вне зависимости от формы и наличия манифестации заболевания – неспецифические клинические проявления малярии, преимущественно в первые дни болезни, при наличии ряда объективных показателей эпидемиологического характера (географический анамнез – пребывание на территории стран с тропическим и субтропическим климатом) и клинического характера (лихорадочное состояние неясной этиологии, анемия, увеличение селезенки).

Вероятные факторы риска:

• пребывание/укусы комаров в эндемичных по малярии странах в течение последних нескольких лет;
• переливание крови;
• пересадка органов (в эндемичных странах);
• доноры крови, посетившие в течение последних нескольких лет эндемичные по малярии страны;
• использование медицинских инструментов многоразового пользования при нарушении правил асептики и антисептики (группа риска – потребители инъекционных наркотиков);
• заражение плода во время родов вертикальным путем от больной матери;
• "аэропортная" или "багажная" малярия (прибытие зараженных людей из эндемичных регионов, в том числе "транзитных" пассажиров через крупные транспортные узлы);
• работники международных аэропортов и морских портов;
• паразитоносители (иностранные граждане, прибывшие из эндемичных по малярии стран).

Что означают результаты?

Референсные значения

Важные замечания

ПЦР – высокоспецифичный и чувствительный метод - позволяет при крайне низкой, субмикроскопической паразитемии (количество возбудителя в крови) провести выявление ДНК плазмодиев и определение внутривидовых различий.

Кто назначает исследование?

Терапевт, педиатр.