Дифференцированное выявление ДНК Bordetella species: Bordetella pertussis (возбудитель коклюша), Bordetella parapertussis (возбудитель паракоклюша) и Bordetella bronchiseptica (возбудитель бронхосептикоза)

Дифференцированное выявление возбудителей коклюша (Bordetella pertussis), паракоклюша (Bordetella parapertussis) и бронхосептикоза (Bordetella bronchiseptica), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции определяется генетический материал (ДНК) микроорганизмов в биоматериале. (Выявление и дифференциация специфических фрагментов генома возбудителей данных инфекций.)

Синонимы русские

Диагностика коклюша, паракоклюша и бронхосептикоза (бордетеллеза).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки) и носа.

Как правильно подготовиться к исследованию?

За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.

Общая информация об исследовании

Несмотря на то что многие отечественные педиатры, в том числе и инфекционисты, ввиду развития вакцинопрофилактики рассматривают коклюш как проблему прошлого, тем не менее в настоящее время проблема выявления и профилактики коклюша и коклюшеподобных заболеваний все еще очень актуальна для практического здравоохранения во всех странах мира. Лабораторная диагностика коклюша и коклюшеподобных инфекций имеет особое значение из-за трудностей клинического различения.

Bordetella pertussis (B. pertussis) – это грамотрицательная аэробная коккобацилла, являющаяся возбудителем коклюша. Коклюш представляет собой острую антропонозную бактериальную инфекцию. Инфекция передается воздушно-капельным путём. Источником инфекции является больной человек с любой формой инфекционного процесса. Инфекция передается воздушно-капельным путем. В течении заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный период (длительностью от нескольких дней до двух недель), катаральный (от 5–8 до 11–14 дней), пароксизмальный, или спазматический (2–8 недель), разрешения (2–4 недели) и реконвалесценции (2-6 месяцев). Наиболее характерными для коклюша являются проявления, характеризующие пароксизмальный период заболевания. К ним относятся сухой спастический кашель, цианоз носогубного треугольника, акроцианоз, возможна рвота, лихорадка, слабость, в гемограмме – лейкоцитоз, лимфоцитоз. Следует отметить, что наиболее тяжело заболевание протекает у детей раннего возраста, возможно развитие осложнений со стороны бронхолегочной и нервной систем. У взрослых и лиц после вакцинации коклюш чаще протекает в легкой, атипичной форме, как правило, без осложнений. Риск заболеть наиболее высок у не вакцинированных АКДС детей и беременных женщин. После перенесения инфекции формируется стойкий пожизненный иммунитет, однако антитела, полученные трансплацентарно ребенком от матери, не обеспечивают достаточной иммунной защиты. В пожилом возрасте иногда отмечаются случаи повторного заболевания коклюшем. Следует отметить, что прививка АКДС не обеспечивает стопроцентную защиту от заражения, так как иммунный ответ постепенно угасает в течение 1–3 лет после вакцинации. В этой связи подростки и взрослые, вакцинированные более чем 3 года назад и находившиеся в тесном контакте с больным коклюшом или носителем B. pertussis, также подвергаются риску заражения.

Ближайший "родственник" этого микроорганизма, бактерия Bordetella parapertussis, также способна вызывать схожее по клинической картине, но более мягкое по течению заболевание респираторного тракта, называемое паракоклюшем. Паракоклюш – это острая бактериальная инфекция респираторного тракта, поражающая детей и взрослых. Клинические проявления данного заболевания схожи с картиной коклюша, характерна более стертая смена периодов, легкое течение, редкое развитие осложнений, преимущественно у детей. Более всего заболеванию подвержены дети с 3–7 лет, посещающие организованные детские учреждения. Дети первого года жизни болеют редко. Длительность специфического иммунитета после перенесенного паракоклюша не установлена. Между обеими инфекциями наблюдается частичный перекрестный иммунитет.

Bordetella bronchiseptica (бордетелла бронхосептическая) представляет собой короткую грамотрицательную палочку, или коккобациллу, аэробную, подвижную и не образующую спор. Это инфекция верхних дыхательных путей ряда видов животных (приматы, домашние животные). Ее также называют бордетеллезом домашних животных. Может вызывать пневмонии и заболевания верхних дыхательных путей. Как правило, эти случаи происходят в связи с потенциально ослабленной защитой легких (стресс, вирус, возраст и т. д.). Инфекция поражает главным образом домашних животных, а также людей, заражающихся при контакте с инфицированными животными. Бронхосептикоз у людей протекает в виде ОРЗ с приступами сухого кашля, учащающегося перед сном.

Лабораторная диагностика коклюша и коколюшеподобных инфекций имеет особое значение из-за трудностей клинического различения. Только на основании выделения возбудителя можно дифференцировать подобные инфекции. Метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) обладает высокой чувствительностью, которая превышает чувствительность бактериологического исследования. Кроме того, он дает возможность быстро выявить и дифференцировать ДНК возбудителей инфекции (коклюша/паракоклюша) уже в начале катарального периода заболевания и до 18-го дня от появления кашля, что в перспективе дает возможность своевременного применения специфической терапии.

Когда назначается исследование?

Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих со сходными симптомами: коклюша/паркоклюша/бронхосептикоза.

Когда назначается исследование?

При подозрении на коклюш/паркоклюш/бронхосептикоз.

Лабораторные исследования проводят с диагностической целью (детям, кашляющим в течение 7 дней и более или с подозрением на коклюш по клиническим данным, а также взрослым с подозрением на коклюш и коклюшеподобные заболевания, работающим в родильных домах, детских больницах, санаториях, детских образовательных учреждениях и школах) и по эпидемическим показаниям (лицам, бывшим в контакте с больным).

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат "не обнаружено":

• отсутствие коклюша/паркоклюша/бронхосептикоза.

Результат "обнаружено":

• выявление коклюша/паркоклюша/бронхосептикоза;
• транзиторное носительство.

Что может влиять на результат?

Стадия заболевания – наиболее точный результат будет получен при сдаче анализа в первые 2-3 недели после начала вероятного заболевания.

Важные замечания

• Во избежание недостоверного результата анализ необходимо сдавать строго до начала противомикробной терапии (антибактериальные, противовирусные, противопаразитарные препараты) и не ранее чем через 10-14 дней после окончания курса лечения.

• Вакцинация АКДС не влияет на результат исследования.
• Анализ не предназначен для оценки эффективности лечения.
• Результат исследования следует оценивать с помощью дополнительных эпидемиологических, клинических и лабораторных данных.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, пульмонолог, врач общей практики.

Литература

• Прадед М.Н., Селезнева Т.С., Яцышина С.Б. ПЦР-диагностика инфекций, вызванных B. pertussis, B. parapertussis и B. bronchiseptica. Клиническая лабораторная диагностика. 2013.
• Тюкавкина С.Ю., Харсеева Г.Г. Коклюш: эпидемиология, биологические свойства Bordetella pertussis, принципы лабораторной диагностики и специфической профилактики. 2014.
• Hewlett E.L. Bordetella species. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.