Определение ДНК дерматофитов (Trichophyton, Epidermophyton, Microsporum)

Дерматомикозы (дерматофитии) – это поверхностные грибковые инфекции, при которых поражается только кожа и ее придатки (волосы, ногти). Это наиболее распространенная группа грибковых инфекций. Группу грибов – возбудителей дерматомикозов – называют дерматофитами. К дерматофитам относятся три биологических рода: Trichophyton, Epidermophyton и Microsporum. Источники инфекции: больной человек (заражение через предметы обихода – это самый частый путь инфицирования), животные (обычно щенки и котята), почва и растительные остатки.

Синонимы русские

Возбудители дерматофитии, диагностика дерматомикозов.

Синонимы английские

Fungus identification (dermatophutoses).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Соскоб кожи, волосы, ногти.

Общая информация об исследовании

Дерматомикозы (дерматофитии) – это поверхностные грибковые инфекции, при которых поражается только кожа и ее придатки (волосы, ногти). Это наиболее распространенная группа грибковых инфекций. Группу грибов – возбудителей дерматомикозов – называют дерматофитами. К дерматофитам относятся три биологических рода: Trichophyton, Epidermophyton и Microsporum. Источники инфекции: больной человек (заражение через предметы обихода – это самый частый путь инфицирования), животные (обычно щенки и котята), почва и растительные остатки. 

Клинические проявления зависят от вида возбудителя, локализации поражения и состояния иммунной системы человека. Грибковая инфекция, вызванная дерматофитами, может локализоваться в области волосистой части головы, бороды и усов, ногтей, туловища, кистей и стоп, промежности. Стоит отметить, что дерматофиты могут размножаться только в ороговевших слоях эпидермиса.

• Виды рода Trichophyton поражают кожу, волосы и ногти.

• Виды рода Microsporum поражают волосы, кожу и очень редко ногти.

• Виды Epidermophyton поражают кожу и ногти, но не волосы.

Дерматофитии имеют различные варианты клинической картины, которые зависят от вида дерматофита, локализации поражения и иммунного ответа пациента. Без установленной этиологии, по результатам данных только клинической картины и анамнеза возможно поставить исключительно предварительный диагноз "поверхностный микоз". По данным последних мета-анализов, различные виды дерматофитов имеют различную чувствительность к антимикотическим средствам. Некоторые виды резистентны к определённым препаратам. Для оценки рисков, связанных с назначением системной терапии, необходимо уточнение вида дерматофита. При подозрении на дерматофитную инфекцию назначение корректного лечения необходимо как можно раньше, так как заболевание имеет тенденцию к распространению и не разрешается самостоятельно. Кроме того, в связи с контагиозностью необходимо вовремя начать противоэпидемические мероприятия. При подозрении на дерматофитию при наличии стёртой клинической картины или в сложных случаях, например после использования глюкокортикостероидов, антимикотических средств или комбинированной терапии, определение этиологии помогает поставить окончательный диагноз. Коморбидные пациенты, относящиеся к группе риска, чаще имеют вторичную бактериальную и микотическую инфекцию на фоне неинфекционных дерматозов. При появлении признаков инфекции определение её этиологии помогает принять верное решение в назначении корректной этиопатогенетической терапии. Особенности классических методов диагностики часто не позволяют доверять их результатам при постановке окончательного диагноза.

Классическими методами диагностики дерматофитии являются КОН-микроскопия и микологический посев. Недостатки микроскопии с предварительной обработкой гидроксидом калия отражаются в низкой специфичности, то есть высокой вероятности получить ложноположительный результат. Существенным недостатком также является отсутствие видовой идентификации, не позволяющей сказать о наличии в образце именно дерматофита, а значит, установить этиологический агент развития поражения. Подобный недостаток должен быть компенсирован при более длительном методе диагностики – посеве биологического образца на скошенный агар Сабуро. Однако дерматофиты медленно растут на питательных средах, а внешние факторы, такие как проведённая ранее антимикотическая терапия, чувствительность к быстрорастущим грибам-контаминантам и бактериальная ко-инфекция повышают вероятность ложноотрицательного результата. Недостатки посева выраженно влияют на чувствительность метода. На текущий момент происходит активное внедрение в лабораторную практику ПЦР-РВ для диагностики дерматофитов, что обусловлено их преимуществами.Высокая чувствительность метода ПЦР-РВ по сравнению с классическими методами диагностики согласуется с результатами многочисленных зарубежных исследований.
(Гущин А.Е., 2023).

ПЦР-РВ (полимеразная цепная реакция в "реальном времени") – одна из наиболее распространённых модификаций метода ПЦР, позволяющая увеличить специфичность классической ПЦР, сократить сроки проведения. В основе лежит использование флуоресцентных меток, позволяющие получать сигнал при каждом цикле увеличения копий генетического материала. Метод ПЦР-РВ "АмплиПрайм® Дерматофиты" позволяет выявлять основные группы дерматофитов в образцах кожи и её придатков (ногтевых пластин и волос).

Преимущества ПЦР-исследования

• Наиболее точный результат.
• Короткие сроки получения результата.
• Видовое определение дерматофита.
• Возможность дифференциальной диагностики.
• Возможность выявления вторичной инфекции.

Для чего используется исследование?

• Для идентификации возбудителя грибкового поражения кожи, волос или ногтей.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на дерматомикоз, наличии характерной клинической картины, особенно у пациентов, длительно принимавших антибактериальные препараты или стероидные гормоны.

Что означают результаты?

Референсные значения

Важные замечания

• Результаты ПЦР-исследования учитываются в комплексной диагностике заболевания. ПЦР-исследование является одним из методов всестороннего обследования пациента, на основании которых лечащий врач устанавливает диагноз и выбирает мероприятия по лечению
  пациента. Результаты ПЦР-исследования следует рассматривать и интерпретировать в сочетании с данными других клинических и лабораторных исследований.
• Наиболее информативными являются исследования материала, полученного непосредственно из потенциального очага инфекционного процесса. Поскольку инфекционный процесс может захватывать несколько очагов, для получения наиболее исчерпывающей информации пробы материала необходимо брать из всех очагов, где имеются признаки воспаления или находятся клетки-"мишени" для инфекционных агентов. Решение о выборе места взятия исследуемого материала принимает лечащий врач в зависимости от диагностической задачи.

Также рекомендуется

• Исследование кожи, волос и ногтевых пластинок на поверхностные микозы
• Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, инфекционист, терапевт, педиатр, врач общей практики.

Литература

1. Дерматовенерология. Национальное руководство / под ред. Ю. К. Скрипкина, Ю. С. Бутова, О. Л. Иванова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. С. 234-262.
2. Сербин А.Г., Леонтьев Д.В., Россихин В.В. Основы медицинской микологии. Учебное пособие для студентов фармацевтических ВУЗов. – Харьков: 2010. С. 29-44.
3. АмплиПрайм. Дерматофиты. https://dermatophytes.ru/metodinfo.
4. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e  by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 1204-1208, 1220 – 1222.
5. A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 9th Edition, by Frances Fischbach, Marshall B. Dunning III. Wolters Kluwer Health, 2015. Pages 488-492.