Посев на Aspergillus spp. без определения чувствительности к антимикотическим препаратам (мазки различных локализаций)

Исследование, в ходе которого с помощью специальной питательной среды выявляют возбудителя аспергиллеза Aspergillus spp.

Это бактериоскопическое исследование того или иного биоматериала – это могут быть мазки различных локализаций, – выделение и идентификация до вида этиологически значимого возбудителя; определение антибиотикочувствительности при этом не проводится.

Синонимы русские

• Бакпосев, бактериологический (культуральный) метод выявления Aspergillus spp. без определения устойчивости к противогрибковым препаратам
• Диагностика аспергиллёза

Синонимы английские

Aspergillus spp., Culture.

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), мазок с конъюнктивы, мазок биоматериала на микроскопию, мазок из носа, мазок из носоглотки, мазок из носовых пазух, мазок урогенитальный, мазок из уретры, мазок с внутренней поверхности шейки матки (из цервикального канала), мокроту,* отделяемое абсцесса полости рта, отделяемое раны, отделяемое уха.

* Данный биоматериал принимается на исследование только в Санкт-Петербурге, Москве, Новосибирске.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
• Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
• Мужчинам – не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.
• Не проводить туалет полости рта в день взятия биоматериала на исследование.

Общая информация об исследовании

Aspergillus spp. – это повсеместно встречающиеся плесневые грибы, которые в некоторых случаях приводят к развитию серьезных заболеваний человека. Чаще всего встречается легочный аспергиллез, однако также могут поражаться и другие органы (головной мозг, синусы, клапаны сердца). Как правило, предпосылкой для возникновения аспергиллеза является значимое нарушение иммунного ответа, которое может наблюдаться при злокачественных заболеваниях крови (лейкозы), после пересадки органов и тканей и при СПИДе. Диагностика аспергиллеза представляет собой трудную задачу и в большинстве случаев носит комплексный характер, при этом лабораторный методы играют ведущую роль. В настоящее время "золотым стандартом" диагностики аспергиллеза является посев на питательную среду (бактериологический, культуральный метод).

Самым распространенным возбудителем аспергиллеза является гриб Aspergillus fumigatus, хотя другие виды аспергилл также являются патогенами человека (A. flavus, A. niger, A. terreus). С практической точки зрения целесообразно проводить дифференциальную диагностику аспергилл не между собой, а с другими плесневыми грибами, грибами рода Scedosporium spp. и Fusarium spp.

В ходе бактериологического исследования анализируемый биоматериал вносят в специальную питательную среду. Aspergillus spp. неприхотливы и могут быть выделены в большинстве бактериологических сред как для выделения грибов, так и в универсальных бактериологических средах. Колонии гриба растут достаточно быстро, и результат бакпосева обычно можно получить уже через несколько суток. В качестве биоматериала для исследования могут быть использованы мокрота, различные мазки и фрагменты ткани, полученные при трансторакальной тонкоугольной биопсии. При этом даже в случае диссеминированной инфекции выделить культуру Aspergillus spp. из крови удается крайне редко, поэтому кровь, как правило, для посева не используется.

Следует отметить, что чувствительность посева на Aspergillus spp. не стопроцентная. Возможной причиной ложноотрицательного результата является использование антимикотических препаратов до взятия биоматериала на исследование и биопсия участка органа, не пораженного грибами (неадекватная биопсия). По этой причине отрицательный результат исследования не позволяет исключить аспергиллез. Учитывая это, наряду с бакпосевом целесообразно применять дополнительные методы лабораторной диагностики аспергиллеза, в том числе серологические тесты и полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Другим недостатком метода является его невысокая специфичность. Это имеет особое значение при интерпретации положительного результата бакпосева из нестерильных сред, например дыхательных путей. Так как аспергиллы могут выступать в роли условно-патогенной флоры, положительный результат исследования нестерильных сред не говорит о наличии аспергиллеза, а может отражать "здоровое носительство", то есть колонизацию дыхательных путей грибами Aspergillus spp. При интерпретации результата исследования учитывают дополнительные факторы. Так, положительный результат бакпосева на Aspergillus spp. у пациента с факторами риска и клиническими признаками аспергиллеза, а также характерными данными КТ-исследования следует рассматривать как критерий аспергиллеза. С другой стороны, положительный результат бакпосева на Aspergillus spp. у пациента без факторов риска, клинических и других признаков этого заболевания следует рассматривать как критерий колонизации.

В настоящий момент отмечается рост устойчивости аспергилл к азоловым антимикотикам (вориконазол, позаконазол). На практике необходимость определения чувствительности Aspergillus spp. к антимикотическим препаратам возникает редко. Данный анализ не предполагает определения чувствительности Aspergillus spp. к антимикотическим препаратам. Определение чувствительности, однако, может потребоваться, если эмпирическая терапия антимикотиками неэффективна.

Aspergillus spp. – частые, но не единственные представители грибов, которые могут вызывать заболевания у человека. Другие микозы, в том числе инвазивный кандидоз и мукормикоз, могут протекать со схожей клинической картиной. По этой причине посев на Aspergillus spp. целесообразно дополнять посевами на другие патогенные грибы.

Для диагностики аллергического бронхолегочного аспергиллеза метод бактериологического посева не используется.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики инвазивного аспергиллеза.

Когда назначается исследование?

• При наличии у пациента факторов риска инвазивной грибковой инфекции: онкогематологических заболеваний, лекарственной иммуносупресии, ВИЧ-инфекции;
• при наличии клинических или рентгенологических признаков аспергиллеза и других инвазивных грибковых инфекций.

Что означают результаты?

Референсные значения

Aspergillus spp.: не обнаружены.

Положительный результат:

• стерильный биоматериал (например, образец ткани легкого): аспергиллез;
• нестерильный биоматериал (мокрота, смывы с бронхов): аспергиллез или "здоровое носительство".

Отрицательный результат:

• норма;
• ложноотрицательный результат.

Что может влиять на результат?

• Применение антимикотических препаратов до взятия биоматериала на исследование может приводить к ложноотрицательному результату.

Важные замечания

• Результат исследования следует интерпретировать с учетом факторов риска и клинических признаков аспергиллеза, а также данных КТ-исследования.
• Отрицательный результат исследования не позволяет исключить аспергиллез.

Также рекомендуется

[09-080] Aspergillus fumigatus, ДНК [ПЦР]

[07-011] Aspergillus fumigatus, IgG

[10-004] Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов

Кто назначает исследование?

Пульмонолог, инфекционист, аллерголог, врач общей практики.

Литература

• Sales Mda P. Chapter 5--Aspergillosis: from diagnosis to treatment.J Bras Pneumol. 2009 Dec;35(12):1238-44.
• Silva RF. Chapter 8: Fungal infections in immunocompromised patients. J Bras Pneumol. 2010 Jan-Feb;36(1):142-7.
• Barton RC. Laboratory diagnosis of invasive aspergillosis: from diagnosis to prediction of outcome. Scientifica (Cairo). 2013;2013:459405. doi: 10.1155/2013/459405. Epub 2013 Jan 14. Review.