Посев отделяемого раны с определением чувствительности к антибиотикам и подбором минимальной подавляющей концентрации препарата

Микробиологическое исследование, позволяющее выявить в биоматериале дрожжеподобные грибы рода Candida (С. spp.), определить их количество и чувствительность к противогрибковым (антимикотическим) препаратам.

* Набор антибиотиков зависит от выделенного микроорганизма и коммерческой тест-системы, которая в данный момент предоставляется производителем согласно современным рекомендациям "Клинические рекомендации по определению чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам 2021–01" и доступна для закупки в данном регионе.

Синонимы русские

Бак. посев на грибковые инфекции (Candida spp.), посев на грибы рода кандида (Candida, кандидоз).

Синонимы английские

Fungal culture (Candida spp.).

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал, мазок из десневого кармана, мазок из зева (ротоглотки), мазок с конъюнктивы, мазок из носа, мазок из носоглотки, мазок урогенитальный, мокроту, ногти, соскоб, среднюю порцию утренней мочи, эякулят.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Рекомендуется употребить большой объем жидкости (чистой негазированной воды) за 8–12 часов до сбора мокроты.
• За 3–4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3–4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
• Не принимать пищу в течение 1–2 часов до исследования.
• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антимикотических препаратов.
• Сбор биоматериала на микробиологические исследования производится не ранее чем через 10–14 дней после окончания приема антибиотиков или до начала их приема.
• Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2–3 дня после её окончания.
• Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка или сбора мочи.
• Сбор биоматериала рекомендуется проводить утром. Для исследования необходимо собирать свободно отделяемую мокроту, полученную в процессе глубокого откашливания. В контейнер не должны попадать слюна и отделяемое носоглотки! Это может привести к искажению результатов.

Общая информация об исследовании

Грибковые инфекции (микозы) – обширная группа инфекционных заболеваний человека, вызываемых дрожжевыми, плесневыми или диморфными грибами. Микозы можно разделить на поверхностные, при которых поражение ограничивается кожей и слизистыми оболочками (например, кандидозный стоматит), и глубокие (инвазивные), при которых могут поражаться практически любые внутренние органы, например легкие, головной мозг, клапаны сердца, почки, суставы. Наибольшую трудность представляет диагностика инвазивных микозов.

Candida spp. попадет в организм половым, контактным путем, а также во время беременности и родов. В 30-40 % случаев кандидоз развивается вследствие половых контактов, однако чаще заболевание обусловлено эндогенной инфекцией, когда при воздействии неблагоприятных факторов, приводящих к нарушению баланса естественной микрофлоры, происходит бурное размножение этих грибов.

Candida обычно поражает слизистые оболочки или кожу. Чаще всего встречается кандидоз слизистой мочеполового тракта, который характеризуется жжением и зудом в половых органах, творожистыми белыми выделениями (налетом), болями при мочеиспускании и иногда появлением мелких пузырьков, эрозий и трещин. Вульвовагинальный кандидоз составляет 75 % всех случаев кандидоинфекции, как правило, это бессимптомное кандидоносительство. Возможно развитие кандидозного эндоцервицита, уретрита или цистита. При кандидозе ротовой полости (псевдомембранозном мукозите, молочнице) появляется белый налет на слизистой оболочке щек, задней стенке глотки и языке. Чаще всего он встречается у новорождённых. У взрослых кандидоз ротовой полости нередко бывает ранним признаком СПИДа. Кандидоз желудочно-кишечного тракта развивается, как правило, после приема антибиотиков широкого спектра действия и характеризуется клиническими признаками колита и/или дисбактериоза кишечника. При кандидозе кожи возникает много мелких пузырьков, на месте которых образуются эрозии с четкими границами. Могут наблюдаться "отсевы" на здоровой коже в виде мелких язв и розовые пятна, шелушащиеся в центре, паронихии, поражение межпальцевых складок кистей и стоп, паховых и подмышечных областей, области заднего прохода. В некоторых случаях происходит генерализация инфекции с инфицированием различных органов (чаще почек, печени, головного мозга, сердца, легких и глаз), формированием вторичных метастатических очагов и появлением симптомов лихорадки, поражения центральной нервной системы, дисфункции органов желудочно-кишечного тракта. Может развиться сепсис, эндокардит, эндофтальмит, инфекция мочевыводящих путей и т.д.

Золотым стандартом в выявлении Candida spp. является микробиологический метод – культивирование на питательных средах. Определение чувствительности выделенных микроорганизмов к противогрибковым (антимикотическим) препаратам используется главным образом при недостаточной эффективности лечения или при переходе от парентеральных противогрибковых препаратов одного класса на пероральные препараты другого класса (например, флуконазол) при необходимости длительного лечения кандидозной инфекции (например, при кандидозном менингите, эндокардите или остеомиелите).

В ходе бактериологического исследования анализируемый биоматериал вносят в специальную питательную среду. Следует отметить, что чувствительность бактериологического метода зависит от характера биоматериала, используемого для исследования. Так, например, выделить культуру гриба из крови, даже в случае диссеминированной инфекции, удается нечасто. Другой фактор, влияющий на точность результата теста, – это использование антимикотических препаратов до взятия биоматериала. Применение азолов, амфотерицина и эхинокандинов до взятия биоматериала на исследование может приводить к ложноотрицательному результату. Учитывая эти особенности, важно подчеркнуть, что отрицательный результат посева не всегда позволяет полностью исключить инвазивный микоз.

Для чего используется исследование?

• Для выявления кандидоза.
• Для дифференциальной диагностики (наряду с другими исследованиями) при заболеваниях, протекающих со сходными симптомами (бактериальном вагинозе, трихомониазе, генитальном герпесе, неспецифическом вагините и др.).
• Чтобы выбрать рациональную противогрибковую терапию и оценить ее эффективность.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на грибковую инфекцию, в том числе после антибактериальной терапии и при клинических признаках дисбактериоза кишечника (вздутии и боли в животе, жидком стуле).
• При выделениях из влагалища, сопровождающихся зудом.
• При противогрибковой терапии (для оценки эффективности лечения).

Что означают результаты?

Выявление Сandida spp. в биоматериале из стерильных в норме органов и тканей свидетельствует об этиологической роли этих грибов в развитии заболевания. Выделение Сandida spp. из нестерильных тканей (кожа, слизистые ротовой полости и половых путей) в количестве, не превышающем 10⁴ КОЕ/мл, при отсутствии клинической картины кандидоинфекции расценивают как бессимптомное носительство. Число микроорганизмов, превышающее 10⁴ КОЕ/мл, свидетельствует о кандидозе. Так, о наличии кандидоза кишечника можно утверждать при выделении C. spp. в кале > 10³ КОЕ/мл в сочетании с симптомами кишечной диспепсии и лабораторно подтвержденным дисбиозом кишечника.

При отрицательном результате (отсутствии роста) кандидоз маловероятен.

Причины положительного результата

• Кандидоз.
• Сочетание вагинального кандидоза с бактериальным вагинозом – если одновременно обнаруживается большое количество облигатно анаэробных бактерий и гарднерелл (> 10⁹ КОЕ/мл) при резком снижении концентрации или отсутствии лактобацилл.

Причина отрицательного результата – отсутствие кандидоза.

Что влияет на результат?

• Предшествующая противогрибковая терапия может приводить к ложноотрицательному результату.
• Характер биоматериала также следует учитывать при интерпретации положительного результата. Нестерильные среды (мокрота, моча) могут в норме содержать грибы, поэтому положительный результат исследования нестерильных сред не позволяет говорить о наличии инвазивного микоза. Так, Candida spp. являются условно-патогенной флорой дыхательных путей и могут быть выделены в культуре при посеве мокроты здоровых людей. С другой стороны, обнаружение грибов в стерильных средах (кровь, образец ткани), особенно у пациента с иммуносупрессией, – это всегда патологический признак, который указывает на наличие инвазивного микоза.

Важные замечания

• Бактериологический метод целесообразно дополнить другими лабораторными исследованиями, в первую очередь гистологическим исследованием.

Также рекомендуется

• Candida albicans, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Дисбактериоз кишечника
• Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов мужчин (микрофлора)
• Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора), 3 локализации
• Trichomonas vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Herpes Simplex Virus 1/2, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Гинеколог, уролог, врач общей практики, педиатр, гастроэнтеролог, инфекционист.

Литература

1. Edwards J.E. Candida Species. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
2. Genital candidiasis. In: Oxford handbook of genitourinary medicine, HIV, and Aids / R. Pattman [et al.] (Eds) ; 1st edition. – USA : Oxford University Press, 2005 – 580 p.
3. Прилепская В.Н. Клиника, диагностика и лечение вульвовагинального кандидоза (клиническая лекция) / В.Н. Прилепская // Гинекология. – 2002. –  Т. 3, № 6. – С. 201 – 205. 
4. Тихомиров А.Л. Кандидозный вульвовагинит: взгляд на проблему / А.Л. Тихомиров, Ч.Г. Олейник // Гинекология. – 2005. – Т. 7, № 1. – С. 29 – 34.
5. Яблучанский Н.И. Кандидоз / Н.И. Яблучанский // Medicus Amicus. Элетрон. журн. –  2004. – № 4.
6. Шевяков М.А. Грибы рода Candida в кишечнике: клинические аспекты (обзор) / М.А. Шевяков, Е.Б. Авалуева, Н.В. Барышникова // Проблемы медицинской микологии. – 2007. – Т. 9, № 4. – С. 4 – 11.
7. Guidelines for treatment of candidiasis / P.G. Pappas [et al.] // Clinical Infection Diseases. – 2004. – Vol. 38, N 2. – P. 161 – 189.