Главная / Helixbook / Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki-67 /
12-070

Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki-67

Определение экспрессии онкобелка р16 и Ki67 на поверхности эпителиальных клеток для скрининга рака шейки матки с помощью иммуноцитохимического исследования.

Требует предварительного проведения жидкостной цитологии.

Выполняется вместе с исследованием [12-051] "Жидкостная цитология. Исследование соскоба шейки матки и цервикального канала (окрашивание по Папаниколау)" либо при предъявлении стекол с окраской по Папаниколау.

В рамках данного исследования PAP-тест не выполняется.

Синонимы русские

Белок р16, p16INK4a, онкопротеин, иммуноцитохимическое исследование.

Синонимы английские

P16 protein, p16INK4a, oncoprotein, immunocytochemical study

Метод исследования

Иммуноцитохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок смешанный из цервикального канала и поверхности шейки матки.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Исключить (по согласованию с врачом) использование влагалищных контрацептивов, лекарственных средств, тампонов, спринцевание в течение 48 часов до проведения исследования.
  • Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка) рекомендуется проводить с 10-го по 20-й день менструального цикла.
  • Исключить половые контакты в течение 2 суток до проведения исследования.
  • Исследование не рекомендуется проводить при наличии воспалительных гинекологических заболеваний.
  • Нельзя производить взятие урогенитального мазка после обработки шейки матки раствором уксусной кислоты или Люголя.

Общая информация об исследовании

Рак шейки матки занимает третье место среди всех злокачественных заболеваний у женщин в мире и первое место в структуре онкологической заболеваемости женщин 15-40 лет в Российской Федерации. К факторам риска развития рака шейки матки относится инфицирование вирусом папилломы человека (ВПЧ, или HPV) онкогенных серотипов HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35 и др., а также хронические воспалительные гинекологические заболевания, инфекции, семейный онкологический анамнез, случаи рака шейки матки у родственников, иммунодефициты, курение.

В настоящее время основной метод скрининга рака шейки матки и предраковых состояний – цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала по Папаниколау (мазок по Папаниколау, Рар-тест). Несмотря на общедоступность, надежность и широкое применение, данный метод имеет ряд недостатков: отсутствие стандартных методов взятия биоматериала для исследования, что может привести к ложноотрицательным результатам в 20-30 % случаев, вероятность ложноположительных результатов в 5-70 % случаев, проблемы, связанные с повторным взятием материала. Усовершенствованный метод получения мазков с помощью метода жидкостной цитологии позволяет частично преодолеть недостатки традиционного метода. Кроме того, жидкостная цитология дает возможность выполнять молекулярные виды исследования, одним из которых является иммуноцитохимическое исследование.

Иммуноцитохимический метод – это метод молекулярной иммунологической диагностики, позволяющий идентифицировать клеточные и тканевые молекулы-антигены в результате их связывания с антителами и формирования комплекса «антиген – антитело». Он позволяет проводить иммунологический анализ цитологического материала в условиях сохранения морфологии клеток.

В современной диагностике рака шейки матки иммуноцитохимическое исследование позволяет выявлять белок р16 (p16INK4a), а точнее его экспрессию на поверхности эпителиальных клеток. Исследованию могут быть подвергнуты отдельные мазки из шеечного канала (эндоцервикса) или с наружной поверхности шейки матки (экзоцервикса) или смешанный мазок, полученный при нанесении на одно предметное стекло биоматериала из эндоцервикса и экзоцервикса.

Белок р16 – это клеточный протеин, участвующий в регуляции клеточного цикла и являющийся ингибитором активности циклинзависимой киназы CDK4/6. В норме киназа неактивна и клеточная пролиферация инактивирована за счет прочной связи фактора транскрипции E2F с белком-супрессором рRb. Белок р16 контролирует разобщения комплекса E2F-Rb, не допуская пролиферации клетки. В нормально функционирующих клетках синтез р16 сдерживается по механизму обратной связи и, следовательно, концентрация данного белка чрезвычайно мала, что проявляется негативной иммуноцитохимической реакцией. Онкобелок Е7 ВПЧ с высоким онкогенным риском посредством внутриклеточных механизмов приводит к разобщению комплекса E2F-рRb, активации CDK4/6-киназы, а впоследствии стимулирует чрезмерную клеточную пролиферацию. При этом повышается экспрессия белка р16, что проявляется положительной иммуноцитохимической реакцией мазков клеток.

Иммуноцитохимическое исследование онкобелка р16 позволяет достоверно дифференцировать опухолевую и неопухолевую дисплазии, а также обладает высокой диагностической чувствительностью. Известно, что экспрессия данного белка связана со слабовыраженной (CINI), умеренной (CINII) и резковыраженной дисплазией (CINIII) и внутриэпителиальным раком шейки матки. Он практически не обнаруживается в клетках плоского эпителия без признаков дисплазии (0-2 % случаев).

Таким образом, выявление экспрессии белка р16INK4a иммуноцитохимическим методом в дополнение к рутинному методу жидкостной цитологии и окраски мазков по Папаниколау позволяет повысить чувствительность теста, выявлять персистирующую папиллома-вирусную инфекцию до появления морфологических изменений, с наибольшей точностью определить риск развития рака шейки матки, своевременно поставить диагноз и назначить лечение.

Ki-67 – антиген раковой опухоли, который можно обнаружить в клетке, когда она делится, но в фазе покоя клеточного цикла он не определяется. Эта особенность Ki-67-маркера служит полезным индикатором прогноза поведения злокачественной опухоли. Тест проводится на образце ткани, полученном из опухоли в результате биопсии или оперативным путем. Тест на Ki-67 не является специфичным для рака молочной железы, он применяется и при других злокачественных заболеваниях, но большая доля исследований по определению его значения как маркера опухоли приходится на этот вид рака. Высокие уровни Ki-67 указывают на агрессивность опухоли и неблагоприятный прогноз.

Ki-67 – отличный индикатор нахождения клетки в фазе подготовки к делению и самого деления (стадии пролиферации). Индекс Ki-67 – соотношение Ki-67-позитивных клеток, то есть находящихся в стадии пролиферации, ко всем клеткам опухоли. Этот показатель коррелирует с клиническим течением рака. Наиболее исследована эта взаимосвязь при карциноме простаты, головного мозга и груди. Для этих опухолей неоднократно было доказано его прогностическое значение в ходе крупных клинических исследований. Так, 5-летняя выживаемость при раке молочной железы при индексе Ki-67 ниже 10 % составляет 95 %, при более высоком уровне падает до 80 %. Другая польза индекса Ki-67 при раке молочной железы – возможность предугадать ответ опухоли на запланированное лечение.

Опухоли груди с высоким процентным содержанием делящихся клеток, соответственно, с высоким уровнем индекса Ki-67, хорошо реагируют на химиотерапевтическое лечение, так как препараты, которые используют при этом виде терапии, убивают клетки только в фазе их деления, поэтому чем выше индекс, тем выше вероятность их эффективности. Зная индекс Ki-67, врач может определить, какое лечение будет адекватно работать в каждой конкретной ситуации.

Для чего используется исследование?

  • Для скрининговой диагностики рака шейки матки и предраковых состояний у женщин.
  • Для наблюдения за состоянием женщин после лечения рака шейки матки, предраковых состояний, цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Когда назначается исследование?

  • При профилактическом обследовании женщин в возрасте 21-65 лет с интервалом 3 года и в возрасте 30-65 лет с интервалом 5 лет.
  • При обследовании женщин с высоким риском онкологических заболеваний, наличием рака шейки матки у родственников, с хроническими воспалительными и инфекционными гинекологическими заболеваниями.
  • При обнаружении положительных результатов на инфицирование ВПЧ онкогенных серотипов.
  • Каждые 6 месяцев первые два года после лечения рака шейки матки или цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Важные замечания

  • Для получения информативного мазка и точного результата последующего исследования необходимо следовать рекомендациям по подготовке к тесту.
  • Результат исследования интерпретируют с учетом всех значимых клинических, дополнительных лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

  • [12-001] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
  • [09-018] Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • [08-004] CA 125
  • [12-048] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала - окрашивание по Папаниколау (Рар-тест) (смешанный мазок)
  • [12-050] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала - окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, врач общей практики, онколог, уролог, инфекционист, терапевт.

Литература

  • Carozzi F, Gillio-Tos A, Confortini M, et al, NTCC working group.Risk of high-grade cervical intraepithelial neoplasia during follow-up in HPV-positive women according to baseline p16-INK4A results: a prospective analysis of a nested substudy of the NTCC randomised controlled trial / Lancet Oncol. 2013 Feb;14(2):168-76.
  • Roelens J, Reuschenbach M, von Knebel Doeberitz M, et al. p16INK4a immunocytochemistry versus human papillomavirus testing for triage of women with minor cytologic abnormalities: a systematic review and meta-analysis / Cancer Cytopathol. 2012 Oct 25;120(5):294-307.
  • Tsoumpou I, Arbyn M, Kyrgiou M, et al. p16(INK4a) immunostaining in cytological and histological specimens from the uterine cervix: a systematic review and meta-analysis / Cancer Treat Rev. 2009 May;35(3):210-20.
Cтоимость:
12170 ₽
Взятие биоматериала:
350 ₽
Санкт-Петербург