Исследование аутоиммунного характера эндометрита: DP-DQ&DR

Аутоиммунный эндометрит  – это заболевание инфекционно-воспалительного характера, при котором происходит поражение матки и нарушение местного иммунитета. В патогенезе хронического эндометрита определяющую роль играет постинфекционный аутоиммунный синдром, для которого характерна инфильтрация эндометрия NK-клетками, B-лимфоцитами и группой антигенов гистосовместимости HLA-DP, DQ, DR, а также нарушение экспрессии рецепторов стромальных и эпителиальных клеток к половым стероидам в эндометрии. Развитие аутоиммунных реакций вызывает дополнительное повреждение ткани. Воспаление нередко развивается локально, вызывая нарушение функции конкретного органа, и сопровождается изменениями параметров системного и локального иммунитета. В данном исследовании для диагностики хронического эндометрита рассматриваются лимфоциты, экспрессирующие маркер активации HLA-DR+ II класса, участвующие в распознавании антигена. Их обнаружение в определенном количестве позволяет подтвердить характер аутоиммунного воспалительного процесса в эндометрии.

Синонимы русские

Диагностика хронического аутоиммунного эндометрита.

Синонимы английские

Morphological examination of the endometrium and IСC (immunocytochemistry) with HLA-DP, DQ, DR antigen typing, immunocytochemical analysis of HLA class II (DR) antigens in endometrium.

Метод исследования

Жидкостная цитология + иммуноцитохимическое исследование.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Аспират из полости матки.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить (по согласованию с врачом) использование влагалищных контрацептивов, лекарственных средств, тампонов, спринцевание в течение 48 часов до исследования.
• Женщинам исследование рекомендуется проводить с 10-й по 20-й день менструального цикла.
• Исключить половые контакты в течение 2 суток до исследования.
• Исследование не рекомендуется проводить при воспалительных гинекологических заболеваниях.
• Нельзя производить взятие мазка после обработки шейки матки раствором уксусной кислоты или Люголя.

Общая информация об исследовании

Стандартное морфологическое исследование эндометрия включает определение клеточного состава, соотношения клеток, фазы менструального цикла, патологических изменений – признаков атипии, инфильтрации воспалительными клетками при световой микроскопии. Материалом для исследования является эндометрий, полученный методом аспирационной биопсии эндометрия или при гистероскопии с биопсией эндометрия, после выскабливания (кюретаж полости матки).

Иммуноцитотохимия – метод исследования клеток, основанный на обнаружении специфических антигенов с помощью присоединения к ним антител, меченных флюорохромом или ферментом. Антигены – молекулы белков или углеводов, имеющие уникальную трёхмерную структуру, способные индуцировать образование антител. Антитела – иммуноглобулины, распознающие антигены и присоединяющиеся к ним во время реакции "антиген-антитело". Антигены и антитела – это молекулы, неразличимые при исследовании методом световой и электронной микроскопии. Для обнаружения специфических антигенов к образцу клеток добавляют реагент, содержащий меченные флюорохромом или ферментом антитела, в результате чего образуется иммунный комплекс "антиген-антитело". Комплексы формируют специфическое окрашивание клеток и их внутренних структур, обеспечивая детекцию патологических изменений на молекулярном уровне. Иммуноцитохимическое исследование позволяет верифицировать онкологические заболевания, метастатические поражения, определить их гистологическую принадлежность, оценить экспрессию маркеров, влияющих на прогноз заболевания и подбор схемы эффективной химиотерапии.

Эндометрий – это слизистая оболочка, выстилающая полость матки изнутри, необходимая для имплантации оплодотворенной яйцеклетки и развития плаценты во время беременности. Эндометрий подвергается динамическим структурным и функциональным изменениям во время менструального цикла под действием женских половых гормонов. Ряд патологических состояний нарушает нормальное циклическое функционирование эндометрия у женщин репродуктивного возраста. Наиболее распространенными причинами считаются хронический эндометрит, полипы эндометрия, ановуляция и миома матки.

Хронический эндометрит – это воспалительное заболевание эндометрия, чаще поражающее женщин репродуктивного возраста, но встречающееся и в постменопаузе. Наиболее распространенный симптом – маточные кровотечения, не связанные с менструацией. Кроме того, хронический эндометрит может быть причиной бесплодия и самопроизвольного прерывания беременности. Факторами риска являются воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность, инфекционно-воспалительные осложнения послеродового периода, попытки экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов. Возбудителями заболевания чаще всего являются Escherichia coli, Enterococcus faecalis, различные виды стрептококка, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и вирусы (ВПЧ, вирусы герпеса,   энтеровирус).

Инфекционные агенты запускают защитную воспалительную реакцию, происходит инфильтрация эндометрия макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками, пролиферация фибробластов. Активированные макрофаги выделяют медиаторные цитокины, которые усиливают экспрессию группы антигенов гистосовместимости HLA-DP, DQ, DR на поверхности лимфоцитов, что свидетельствует об активации T- и B-лимфоцитов. Основная функция молекул HLA-DP, DQ и DR заключается в представлении антигенных пептидов, в основном экзогенной природы, CD4+ Т-клеткам. Молекулы HLA-DP, DQ и DR конститутивно экспрессируются на В-лимфоцитах, моноцитах и дендритных клетках, но также могут быть обнаружены на цитотоксических/супрессорных Т-лимфоцитах и активированных гранулоцитах.

Даже после полной элиминации инфекционного возбудителя воспаление может длительно поддерживаться за счет аутоиммунных процессов – за счет первоначальной поликлональной активации лимфоцитов с последующей выработкой аутоиммунных антител. Воспаление вызывает изменения нормальной циклической дифференцировки и функционирования эндометрия, приводящие к нарушениям менструального цикла или снижению способности к имплантации оплодотворенной яйцеклетки.

Стандартом диагностики хронического эндометрита является гистологическое исследование биоптата эндометрия. Главным маркером является инфильтрация стромы эндометрия плазматическими клетками. Также часто обнаруживаются и другие воспалительные элементы: нейтрофилы (обычно в поверхностном эпителии и железах), субэпителиальные лимфоцитарные инфильтраты, гистиоциты с гемосидерином и редкие эозинофилы.

О присоединении аутоиммунных механизмов к хроническому воспалению в эндометрии свидетельствует повышение количества антигенов HLA-DP, DQ, DR, которое определяется методом иммуноцитохимии.

Для чего используется исследование?

• Для идентификации клеток, экспрессирующих антигены HLA-DP, DQ, DR.

Когда назначается исследование?

• При подтверждении или исключении аутоиммунной природы эндометрита;
• при утолщении эндометрия по результатам УЗИ;
• при нарушении менструальной функции, болевом синдроме в виде тянущих болей внизу живота;
• при нарушении репродуктивной функции (бесплодие, невынашивание, ранняя привычная потеря беременности);
• при верификации диагноза при гиперплазии эндометрия, миоме матки, эндометриозе, хронических воспалительных заболеваниях;
• в качестве дополнительного исследования для оценки потенциальной эффективности гормональной терапии.

Также рекомендуется

[12-133] Диагностика хронического эндометрита: CD20+, CD56+, CD138+, DP-DQ&DR

[12-135] Исследование рецептивности эндометрия: рецепторы к эстрогенам, рецепторы к прогестеронам (в строме и железах эндометрия), Ki-67 (индекс пролиферативной активности), (кроме PTEN)

[12-071] Гистологическое исследование биопсийного материала

Кто назначает исследование?

Гинеколог, эмбриолог, эндокринолог, цитолог.

Литература

• Будчанов Ю.И. Главный комплекс гистосовместимости. Учебно-методическое пособие по общей иммунологии. Тверь, 2008. ГОУ ВПО Тверская ГМА Минздрава России. Кафедра клинической иммунологии с аллергологией.
• Techniques of immunohistochemistry: principles, pitfalls, and standardization. Richard W. Cartun, Clive R. Taylor and David J. Dabbs. Diagnostic Immunohistochemistry, Chapter 1, 1–46.
• Benign Endometrium. David W Kindelberger  and Marisa R Nucci. Gynecologic Pathology: A Volume in the Series: Foundations in Diagnostic Pathology, Chapter 6, 197-232.
• The Female Genital Tract. Lora Hedrick Ellenson and Edyta C. Pirog Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease, Chapter 22, 991–1042.