Определение риска возникновения и неблагоприятного течения заболевания уротелиального рака мочевого пузыря, определение p16ink4a в осадке мочи

Рак мочевого пузыря может успешно лечиться в случае диагностирования на начальной стадии развития – до появления метастазов и распространения злокачественных клеток по крови и лимфатической системе. Белок p16ink4a является биологическим маркером начала канцерогенеза в переходном эпителии мочевого пузыря и почечной лоханки и используется для дифференциальной диагностики ВПЧ-ассоциированного рака мочевого пузыря (выявляется при переходе ВПЧ из эписомальной формы в интегрированную). Исследование маркера p16ink4a позволяет оценить прогноз заболевания и выбрать тактику лечения. Определение уровня экспрессии позволяет выявить степень нарушения пролиферации, сопутствующей опухолевому росту, способность опухоли к инвазии и метастазированию.

Синонимы русские

Белок p16INK4a в осадке мочи; иммуноцитохимическое исследование.

Синонимы английские

Оncoprotein p16INK4ain urine sediment; immunocytochemical study.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Среднюю порцию утренней мочи.

Метод исследования

Иммуноцитохимический метод.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Женщинам сбор мочи рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.

Общая информация об исследовании

Рак мочевого пузыря (РМП) – это опухоль мочевого пузыря. Чаще всего рак мочевого пузыря поверхностный и не выходит за пределы слизистой оболочки. Он может распространиться на стенку мочевого пузыря и метастазировать в печень, легкие или костную ткань. Это наиболее часто встречаемая злокачественная опухоль мочевыводящих путей, по распространённости занимает 7-е место в структуре онкопатологии у мужчин и 17-е место у женщин. Риск развития РМП у курящих в 2-3 раза выше, чем у некурящих. Имеется прямая связь между риском развития заболевания, количеством выкуриваемых сигарет, длительностью курения, видом табачной продукции. При большом количестве выкуриваемых сигарет риск развития заболевания может увеличиваться в 6-10 раз, по сравнению с некурящими.

Как правило РМП успешно лечится лишь в случае выявления на начальной стадии заболевания. Одним из его биологических маркеров является белок p16ink4a, который характеризует начало канцерогенеза в переходном эпителии мочевого пузыря и почечной лоханки и используется для дифференциальной диагностики ВПЧ-ассоциированного рака мочевого пузыря (выявляется при переходе ВПЧ из эписомальной формы в интегрированную). В основании иммунноцитохимического исследования на онкомаркер p16ink4a лежит знание того, что нормальный клеточный цикл состоит из G1, S, G2 и M фаз. Киназа, которая обеспечивает прохождение клетки из G1 в S фазу клеточного цикла - это E2F. В норме она неактивна, находится в связанном состоянии с белком супрессором Rb (продукт гена ретинобластомы). Белок р16(INK4a) осуществляет контроль разобщения комплекса E2F-Rb, не допуская безудержной пролиферации клетки. Однако синтез р16(INK4a) в норме по механизму обратной связи сдерживается, таким образом, концентрация данного белка в нормальной клетке чрезвычайно мала, что проявляется негативной иммуноцитохимической реакцией. Белок Е7 вируса папилломы человека ВПЧ высокого онкогенного риска при своем взаимодействии с продуктом гена ретинобластомы приводит к разобщению комплекса E2F-Rb. E2F остается постоянно в активном состоянии, стимулируя безудержную пролиферации клетки. Р16(INK4a) пытается сдержать пролиферацию клетки, что приводит к бесконтрольному его синтезу. Однако р16 лишен своей мишени, что в условиях отсутствия обратной связи значительно повышает его концентрацию в клетке. Иммуноцитохимически это проявляется позитивной реакцией, что является биомаркером инициации канцерогенеза.

Исследование маркера p16ink4a позволяет оценить прогноз заболевания и выбрать тактику лечения. Определение уровня экспрессии позволяет выявить степень нарушения пролиферации, сопутствующую опухолевому росту, способность опухоли к инвазии и метастазированию, используется для подтверждения или исключения ВПЧ-ассоциированного уротелиального рака; повышает точность выявления интраэпителиальной неоплазии вместе с исследованием осадка мочи на атипические клетки; позволяет выбирать более консервативную или более агрессивную тактику лечения пациентов со злокачественными новообразованиями мочевого пузыря; снижает уровень ложноположительных результатов у пациентов с доброкачественным  папилломатозом мочевого пузыря; может быть использовано в качестве скрининга при профилактике рака мочевого пузыря, для ранней диагностики заболевания, а также для прогнозирования течения заболевания, контроля излеченности, выявления рецидивов.

Для чего используется исследование?

• Скрининговое обследование при отсутствии симптомов патологии мочевого пузыря;
• диагностика патологии мочеполовой системы;
• подтверждение или исключение ВПЧ-ассоциированного уротелиального рака;
• контроль эффективности лечения патологии мочеполовой системы.

Когда назначается исследование?

• При наличии клинико-анамнестических признаков патологии мочевыделительной системы, позволяющих заподозрить онкологический процесс;
• при наблюдении за пациентами, прошедшими органосохраняющее лечение по поводу "тяжелой дисплазии" или "рака in situ" -  в целях повышения чувствительности цитологического исследования;
• при обнаружении в клиническом анализе мочи клеток переходного эпителия (мочевого пузыря и мочеточника) и клеток почечных канальцев – малые круглые клетки (SRC) выше нормы.

Что означают результаты?

Негативный сигнал на p16ink4a в клетках. Не выявляется в случае отсутствия инициации канцерогенеза в эпителии мочевого пузыря.

Позитивный сигнал на  p16ink4a является биомаркером инициации канцерогенеза в эпителии мочевого пузыря.

При обнаружении в клиническом анализе мочи клеток переходного эпителия (мочевого пузыря и мочеточника) и клеток почечных канальцев – малые круглые клетки (SRC) выше нормы, целесообразно дальнейшее иммуноцитохимическое исследование биоматериала на наличие клеточного белка  p16ink4a.

При исследовании образцов переходноклеточного рака мочевого пузыря ДНК ВПЧ высокого канцерогенного риска 18-го типа была выявлена у 81% пациентов. Этот тип вируса является вторым по частоте встречаемости после ВПЧ 16-го типа этиологическим агентом, вызывающим рак шейки матки.

Пациентам, у которых по результатам клинического анализа мочи обнаружены малые круглые клетки выше референсных значений и выявлена экспрессия белка p16ink4a в осадке мочи, в сочетании с макро- или микрогематурией рекомендуется проводить дальнейшую целенаправленную диагностику рака мочевого пузыря.

Важные замечания

• При положительном результате исследования в сочетании с макро- или микрогематурией рекомендуется проводить дальнейшую целенаправленную диагностику рака мочевого пузыря.

Кто назначает исследование?

Уролог, гинеколог, онколог, терапевт, врач общей практики.

Также рекомендуется

• Определение цитокератина CK20 в осадке мочи
• Гистологическое исследование биопсийного материала при цистоскопии

Литература

• Воробьев А.В. Классификация и диагностика рака мочевого пузыря, вопросы дифференциальной диагностики // Практическая онкология. 2003. Т. 4. № 4. С. 200 – 201.
• Урология: иллюстрированное руководство. От симптомов к диагнозу и лечению / под ред. П.В. Глыбочко, Ю.Г. Аляева, Н.А. Григорьева. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2014.
• Campbells Urology / Eds. Patrick C. Walsh et al. 8th ed. Philadelphia, 2002. Vol. 1–4.
• Г.М. Волгарева, Г.А. Франк, Д.А. Головина с соавт. Вирус папилломы человека как фактор риска. Онкоурология. № 4, 2010.