Диагностика пузырных дерматозов

Комплексное исследование для дифференциальной диагностики пузырных дерматозов (пузырчатки и буллезного пемфигоида).

Синонимы русские

Диагностика пузырчатки и буллезного пемфигоида.

Синонимы английские

Autoimmune Bullous Disease Panel, Laboratory Diagnostics of Pemphigus and Bullous Pemphigoid (BP).

Метод исследования

Непрямая реакция иммунофлюоресценции.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Пузырные дерматозы – гетерогенная группа заболеваний кожи и слизистых, при которых обнаруживаются аутоантитела, направленные к белкам десмосом, полудесмосом, тканевым трансглутаминазам и некоторым другим компонентам. Несмотря на то что клиническая картина указанных заболеваний имеет характерные особенности, провести дифференциальную диагностику на основании только клинических признаков невозможно. Основой диагностики пузырных дерматозов являются лабораторные исследования.

Лабораторная диагностика пузырных дерматозов осуществляется в несколько этапов:

• 1 этап: скрининг проводится с помощью непрямой реакции иммунофлюоресценции (РНИФ).

Этот метод позволяет определять в сыворотке пациента аутоантитела, направленные против структур кожи или слизистой оболочек.

Как правило, обследование при подозрении на пузырный дерматоз включает в себя сразу несколько исследований. Учитывая, что самыми распространенными заболеваниями из этой группы являются пузырчатка и буллезный пемфигоид, антитела, характерные для этих заболеваний, исследуются в первую очередь:

• При пузырчатке определяются антитела к кадгеринам десмосом: Dsg1 и Dsg3 (от англ. desmoglein – "десмоглеин"). Dsg3 обнаруживается преимущественно в нижних слоях эпителия слизистых оболочек, в то время как Dsg1 – в поверхностных слоях как эпидермиса, так и слизистых оболочек. У пациентов с вульгарной (обыкновенной) пузырчаткой всегда присутствуют антитела к Dsg3, в то время как у пациентов с листовидной пузырчаткой обнаруживаются только антитела к Dsg1.
• При буллезном пемфигоиде определяются аутоантитела к белкам полудесмосом: плакину BP230 и трансмембранному гликопротеину BP180. Эти антитела принадлежат к классам IgG1, IgG4 и IgE.

Для врача и пациента особенно удобным является комплексное исследование, объединяющее эти два анализа.

Для выявления с помощью РНИФ аутоантител, характерных для пузырчатки, в качестве субстрата используют фрагмент пищевода обезьяны или свиньи, а для выявления аутоантител, характерных для буллезного пемфигоида (и других субэпидермальных дерматозов), – фрагмент расщепленного солевым раствором нормального эпителия кожи человека.

О положительном результате свидетельствует флуоресцентное свечение, определяемое с помощью специального (флуоресцентного) микроскопа. При этом учитывается тип свечения, полученный в реакции. Так, отложение иммуноглобулина IgG в межклеточных пространствах шиповатого слоя кожи – характерный признак вульгарной пузырчатки, зернистого слоя – листовидной пузырчатки. Выявление IgG или IgA вдоль эпидермодермального соединения характерно для буллезного пемфигоида и других субэпидермальных дерматозов.

При получении положительного результата РНИФ необходим подтверждающий тест на наличие антител в сыворотке – иммуноферментный анализ (ИФА) или вестерн-блотинг (хотя интенсивность свечения в РНИФ отражает уровень аутоантител в сыворотке, этот метод не является количественным и не рекомендуется для оценки динамики титра антител на фоне лечения).

• 2 этап: подтверждающий тест на наличие антител в коже или слизистых оболочках проводится с помощью прямой реакции иммунофлюоресценции (РПИФ).

В отличие от РНИФ, этот метод позволяет выявить аутоантитела и/или компонент комплемента C3, связанные со структурами кожи или слизистых оболочек. В настоящий момент РПИФ – это "золотой стандарт" диагностики пузырных дерматозов.

Следует помнить о так называемых атипичных вариантах пузырчатки и буллезного пемфигоида, которые имеют не только клинические, но и лабораторные особенности. Например, у некоторых пациентов с приобретенным буллезным эпидермолизом выявляются IgG-аутоантитела к коллагену VII. Атипичные аутоантитела не включены в этот комплексный анализ. Более того, образование пузырей на коже и слизистых также может быть признаком системных заболеваний, в том числе красной волчанки, и требует, таким образом, более широкого обследования.

Для чего используется исследование?

• Для дифференциальной диагностики пузырных дерматозов (пузырчатки и буллезного пемфигоида).

Когда назначается исследование?

• При наличии симптомов пузырных дерматозов: одного или нескольких напряженных или вялых пузырей, располагающихся на коже и/или слизистых, сопровождающихся чувством жжения, боли или зуда; повышения температуры тела.

Что означают результаты?

Референсные значения

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• [13-036] Антитела к десмосомам кожи
• [13-037] Антитела к эпидермальной базальной мембране

	Антитела к десмосомам кожи	Антитела к эпидермальной базальной мембране
Положительный результат	Истинная пузырчатка (пемфигус); ожоги; системная красная волчанка; лекарственная аллергия.	Буллезный пемфигоид; зуд кожи (у пожилых людей); пруриго (у пожилых людей).
Отрицательный результат	Норма; контроль заболевания на фоне лечения.	Норма; контроль заболевания на фоне лечения.

Что может влиять на результат?

• Присутствие в крови антинуклеарных антител препятствует проведению анализа.

Важные замечания

• Интерпретацию результата исследования следует проводить с учетом дополнительных клинических и лабораторных исследований;
• взятие крови на исследование должно быть произведено до начала терапии.

Также рекомендуется

[12-009] Гистологическое исследование биопсийного диагностического материала (эндоскопического материала, тканей женской половой системы, кожи, мягких тканей)

[13-017] Антитела к глиадину, IgA

[13-018] Антитела к глиадину, IgG

[13-034] Антитела к тканевой трансглутаминазе, IgA

[13-033] Антитела к тканевой трансглутаминазе, IgG

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, врач общей практики.

Литература

1. Bickle K, Roark TR, Hsu S. Autoimmune bullous dermatoses: a review. Am Fam Physician. 2002 May 1;65(9):1861–70.
2. Mihályi L, Kiss M, Dobozy A, Kemény L, Husz S.Clinical relevance of autoantibodies in patients with autoimmune bullous dermatosis. Clin Dev Immunol. 2012;2012:369546. doi: 10.1155/2012/369546. Epub 2012 Dec 24.