Типирование парапротеина в сыворотке крови (с помощью иммунофиксации с панелью антисывороток IgG, IgA, IgM, IgD, IgE, kappa, lambda)

Типирование парапротеина в сыворотке крови (с помощью иммунофиксации с панелью антисывороток IgG, IgA, IgM, kappa, lambda) – определение вида патологического белка, обнаруженного в сыворотке крови, проводимое с использованием специфических антител.

Синонимы русские

Иммунофиксация белков сыворотки, иммунофиксация парапротеина, М-градиент.

Синонимы английские

Immunofixation blood test, serum immunofixation, immunofixation electrophoresis, IFE, immunoelectrophoresis, IEP.

Метод исследования

Иммунофиксация.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Все белки в сыворотке крови различаются по размерам и заряду молекул, что определяет их разную подвижность в электрическом поле. На этом свойстве белков основано их разделение методом электрофореза на пять видов – фракций (альбумины, две фракции альфа-глобулинов, бета-глобулины и гамма-глобулины). Во фракцию гамма входят иммуноглобулины – специфические защитные белки иммунной системы человека, которые вырабатываются плазматическими клетками (подвид В-лимфоцитов). Молекула иммуноглобулина состоит из двух тяжелых и двух легких цепей. Существует три варианта тяжелых цепей – IgA, IgG или IgM – и два типа легких – каппа (kappa) и лямбда (lambda).

При некоторых опухолевых заболеваниях кроветворной системы патологически измененные плазматические клетки начинают бесконтрольно и в больших количествах вырабатывать одинаковые тяжелые или легкие цепи. В этих ситуациях при электрофорезе белков определяют так называемый моноклональный компонент в зоне гамма-фракции. Он представлен абсолютно одинаковым патологическим белком (парапротеином), который синтезируется одним клоном (то есть опухолевой популяцией) плазматических клеток.

Для того чтобы определить, чем именно представлен парапротеин, применяется метод иммунофиксации. Он основан на взаимодействии специфических антител с конкретными антигенами. В роли антигенов при этом выступают тяжелые и легкие цепи иммуноглобулинов, которыми представлен парапротеин, а антитела к ним содержатся в специальных диагностических сыворотках. На первом этапе проводится электрофорез белков сыворотки в специальном геле. При этом делается шесть электрофоретических разделений на одной пластинке геля – одно для контроля, а на остальные пять наносят антисыворотки определенной специфичности (всего используется пять сывороток – к трем тяжелым и к двум легким цепям). Примерно через час в зоне моноклонального парапротеина, прореагировавшего с родственной ему сывороткой, образуется преципитат (видимый осадок). Таким образом, зная, какая сыворотка вызвала преципитацию в зоне парапротеина, можно определить его тип.

Для чего используется исследование?

Для определения типа парапротеина сыворотки, что имеет значение в диагностике заболеваний, объединенных термином "моноклональные гаммапатии". К ним относятся множественная миелома, плазмоцитома, макроглобулинемия Вандельстрема, болезнь тяжелых цепей, болезнь легких цепей, амилоидоз, моноклональная гаммапатия неясного значения.

Когда назначается исследование?

При выявлении моноклонального компонента в сыворотке крови методом электрофореза, а также при наличии клинико-лабораторных данных (особенно высокая протеинурия в сочетании с ускоренной скоростью оседания эритроцитов), которые позволяют заподозрить заболевание, относящееся к группе моноклональных гаммапатий, даже если при стандартном электрофорезе парапротеин не определяется.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

В норме моноклональный компонент при иммунофиксации не выявляется. При его наличии в отчете иммунофиксации белков сыворотки указывается тип парапротеина. Он может быть представлен целыми иммуноглобулинами, тогда в заключении пишется тип тяжелой и легкой цепей, например IgG lambda. В некоторых случаях моноклональный компонент представлен исключительно легкими цепями, соответственно, в заключении указывается только тип выявленной легкой цепи.

Что может влиять на результат?

При неправильном разведении исследуемого образца сыворотки преципитат может раствориться, приводя к ложноотрицательному результату.

Важные замечания

• При парапротеинемии, обусловленной исключительно накоплением легких цепей иммуноглобулинов, моноклональный компонент может не выявляться при стандартном электрофорезе. Это обусловлено тем, что, имея низкую молекулярную массу, легкие цепи мигрируют в зоны альфа- и бета-фракций и укрываются на электрофореграмме под белками этих фракций (так называемый скрытый моноклональный компонент).
• Также важно отметить, что легкие цепи хорошо фильтруются и выводятся почками, поэтому параллельно с иммунофиксацией белков сыворотки в случаях выявления протеинурии следует проводить и иммунофиксацию белков мочи.

Также рекомендуется

• Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой
• Скорость оседания эритроцитов
• Общий белок в сыворотке крови
• Электрофорез белков сыворотки (белковые фракции)
• Общий анализ мочи
• Анализ мочи на суточную протеинурию
• Иммунофиксация белков мочи

Кто назначает исследование?

Гематолог, онколог, терапевт.

Литература

1. Immunofixation electrophoresis for identification of proteins and specific antibodies, Gyorgy Csako, Methods in Molecular Biology, 869 (2012). Pages 147-171.
2. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e  by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Chapter 44.
3. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. I / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 194-195.