Генетическое установление родства по мужской линии, тестирование Y-хромосомы (2 участника)

2 участника: предполагаемые родственники по мужской линии, лица мужского пола: дедушка по линии отца – внук, дядя – племянник, родные/сводные по отцу братья.

Метод исследования

ПДАФ-анализ STR-локусов ДНК.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Щечный эпителий, венозную кровь, волосы с волосяной луковицей, женская гигиеническая прокладка/тампон, жевательная резинка, зубная щетка, ногти, салфетка/ноcовой платок, окурки, сухое пятно крови, соска-пустышка, сперма, ушная сера.

Общая информация об исследовании

В основе молекулярно-генетического метода исследования лежит идентификация аллелей ряда полиморфных локусов, уникально наследуемых ребенком от биологических родителей. Исследованию подвергается дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК), выделенная из биологического материала, полученного от обследуемых лиц. У каждого человека клетки биологического материала (кровь, слюна, кости, кожа, мышцы, зубы, сперма, луковицы волос и др.) содержат абсолютно одинаковую ДНК. Она остается постоянной на протяжении всей жизни, не подвергаясь изменениям. Поэтому результаты молекулярно-генетического исследования не зависят от того, какой именно биологический материал исследуется в конкретном случае. При проведении полимеразной цепной реакции (ПЦР) происходит высокоспецифичная амплификация (увеличение количества копий в миллионы раз) определенных фрагментов ДНК, содержащих аллели исследуемых локусов. Это позволяет провести электрофоретическое разделение амплифицированных фрагментов и идентифицировать аллели полиморфных локусов, соответствующие этим фрагментам ДНК. Выявленные аллели исследованных локусов обозначаются в соответствии со стандартной международной номенклатурой, что позволяет при необходимости проводить межлабораторные сравнения полученных результатов.

Этот тест позволяет определить, насколько близко двое мужчин состоят в родстве по одной отцовской линии (т.е. дедушка, родные братья дедушки – отец, родные братья отца – сын, сыновья братьев отца). Заключение даётся на основании анализа Y-хромосомы, которая передаётся исключительно по мужской линии от отца к сыну. При помощи этого теста можно подтвердить или опровергнуть, являются ли двое мужчин членами одной семьи (при условии того, что у них один предполагаемый мужской прародитель). Также этот анализ можно использовать для установления отцовства мальчиков при отсутствии ДНК отца, когда есть возможность исследовать образцы дедушки по отцовской линии или родного брата отца. Для анализа необходимы образцы ДНК двух мужчин, которые предположительно могут принадлежать одной и той же мужской линии.

ДНК-тест на отцовство позволяет установить, может ли мужчина являться биологическим отцом конкретного ребенка или нет. Возможны два варианта интерпретации результата исследования: (1) исключение отцовства и (2) неисключение отцовства. Вероятность при неисключении отцовства в среднем 99,9999% (точность 100% при неисключении отцовства теоретически недостижима). Существует два типа исследования на отцовство – дуэт и трио. При дуэте анализируются биологические образцы ребёнка и предполагаемого отца. При трио – биологические образцы ребёнка, предполагаемого отца и биологической матери.

Для чего используется исследование?

• Чтобы установить, исключается или не исключается биологическое отцовство биологического сына в отношении предполагаемого отца. Если отцовство биологического сына в отношении предполагаемого отца не исключается, то установить, какова вероятность того, что полученный результат не является следствием случайного совпадения индивидуализирующих признаков неродственных лиц (при условии что другие варианты патрилинейного родства не рассматриваются).

Что означают результаты?

Результаты исследования интерпретируются в соответствии с тем фактом, что в момент зачатия ребенка происходит слияние яйцеклетки матери и сперматозоида биологического отца, содержащих гаплоидные наборы хромосом (по 23 хромосомы). После оплодотворения эти два гаплоидных набора хромосом формируют диплоидный набор хромосом ребенка (23 пары хромосом). Таким образом, половину генетического материала ребенок получает от матери и другую половину от биологического отца. Отсюда следует, что в геноме ребенка могут присутствовать только такие аллели полиморфных локусов, которые обнаруживаются у матери и биологического отца. Сравнение генотипов ребенка и матери позволяет установить, какие именно аллели унаследованы ребенком от биологического отца (определить "отцовский набор аллелей" у ребенка). Вывод об исключении отцовства делается, если в генотипах ребенка и предполагаемого отца отсутствуют совпадающие аллели даже по отдельным локусам. При наличии совпадающих аллелей по всем исследованным локусам у ребенка и предполагаемого отца делается вывод о возможности получения ребенком наследственного материала от обследуемого: "неисключение" отцовства. Иными словами, в исследовании выносится на разрешение следующий вопрос: присутствует ли в геноме предполагаемого отца генетический материал, который был передан ребенку биологическим отцом.

Результаты исследования логически неопровержимы лишь в случаях исключения отцовства. В случаях же "неисключения", поскольку генотипы по исследованным локусам не являются уникальными для каждого человека (например, у однояйцевых близнецов генотипы по всем локусам идентичны), информативность проведенного исследования оценивается средствами теории вероятности и математической статистики на основании данных о встречаемости аллелей в популяции. Любой случай "неисключения" отцовства, независимо от количества исследованных локусов, не является логически неопровержимым: формально всегда существует вероятность случайного совпадения аллелей в сравниваемых образцах ДНК.

Важные замечания

• Исследование в формате "дуэт" может проводиться исключительно при невозможности взять биологический материал у биологической матери ребенка. Уровень доказательности экспертного исследования в случае неисключения отцовства должен составлять следующие значения:

- для полного трио (мать – ребенок – предполагаемый отец) при условии, что истинность другого родителя считается бесспорной – не ниже 1000 (рассчитываемый как индекс отцовства PI);

- для дуэта (ребенок – предполагаемый отец) при отсутствии другого родителя – не ниже 400 (рассчитываемый как индекс отцовства PI) (приказ Минздравсоцразвития Российской Федерации от 12.05.2010 года № 346н).