ПЦР-анализ мутаций в гене cKIT

Мутация гена cKit приводит к аномальной сигнализации и пролиферации клеток, несущих мутантный белок. Связана с рядом злокачественных новообразований, в том числе острой миелоидной лейкемией (ОМЛ), желудочно-кишечными стромальными опухолями и карциномой яичек.

Синонимы русские

Мутации при меланоме, мутации при гастроинтестинальной стромальной опухоли (ГИСО), мутации при остром миелолейкозе.

Синонимы английские

PCR analysis of mutations in the gene cKIT.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Специальной подготовки не требуется.

Название гена

cKIT.

OMIM

* 164920.

Локализация гена на хромосоме

4q12.

Общая информация об исследовании

Данное молекулярно-генетическое исследование позволяет выявить мутации в гене KIT методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Ген KIT (cKit, CD117) находится на длинном плече хромосомы 4. Он представляет собой трансмембранный гликопротеид, относящийся к III классу рецепторных тирозинкиназ (РТК). Подобно другим РТК, он включает в себя внеклеточный иммуноглобулиноподобный домен, трансмембранный, подмембранный и внутриклеточный домены. Рецептор локализован в клеточной мембране и в физиологических условиях активируется связыванием с лигандом. Активный белок KIT способен присоединять фосфатные группы к другим внутриклеточным белкам, обеспечивая их активацию. Сигнальные пути, которые может стимулировать активный рецептор KIT, контролируют рост, пролиферацию, продолжительность жизни и распространение клеток. Стволовые клетки костного мозга, интерстициальные клетки Кахаля, тучные клетки, меланоциты и ряд других клеток экспрессируют CD117 (KIT). Независимая от присоединения лиганда активация KIT объясняется его мутацией.

Аномалии KIT ассоциированы с некоторыми злокачественные новообразованиями, в том числе острой миелоидной лейкемией, стромальными опухолями желудочно-кишечного тракта, меланомой и карциномой яичек. Патология в гене KIT неоднократно описана у больных с острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) с характерными изменениями хромосом, а именно с t(8;21)(q22;q22) и inv(16)/t(16;16)(q13;q22). Эти изменения объединяются в одну группу, т. к. при них повреждаются гены, кодирующие субъединицы фактора CBF (Сore Binding Factor).

Мутации KIT при ОМЛ, как правило, обнаруживаются либо в 17-м экзоне гена, который кодирует активационную часть киназного домена, либо в 8-м экзоне, где находится кодирующая область внеклеточного домена рецептора. Данные аномалии встречаются в 20-25 % случаев ОМЛ с t(8;21) и у 30 % больных ОМЛ с inv(16). В последние годы клиническое и прогностическое значение мутаций KIT при CBF-ассоциированном ОМЛ активно изучается.

Результаты ряда исследований показали, что обнаружение мутации KIT ухудшает прогноз заболевания как у пациентов с inv(16), так и с t(8;21). У больных с мутациями отмечается более высокая частота рецидивов. Прогноз заболевания в данном случае зависит от типа мутации, а также от варианта хромосомной патологии и возраста пациента. В противоположность такому мнению во многих исследованиях показано, что присутствие мутации KIT свидетельствует о плохом прогнозе заболевания у больных с t(8;21), но не с inv(16)/t(16;16). Вследствие таких неоднозначных наблюдений нет и четких рекомендаций относительно определения группы риска для данной категории пациентов. National Comprehensive Cancer Network (NCCN) включает больных с t(8;21), inv(16) и мутациями KIT в группу больных ОМЛ промежуточного риска, а в рекомендациях ELN пока нет стратификации риска данной группы больных. Но результаты изучения мутации KIT показали статистически значимое ухудшение прогностических показателей у детей с CBF-ассоциированным ОМЛ при наличии аномалий в данном гене.

К болезням, в развитии которых может быть задействована мутация cKit, относится 23 % всех случаев меланом, 70-90 % случаев системного мастоцитоза, 75-85 % случаев ГИСО (гастроинтестинальная стромальная опухоль). Диагностировать аномалии cKit при данных патологиях очень важно, чтобы составить схему лечения с препаратами, специально на них воздействующими, также от результатов исследования зависит прогноз течения заболевания. Например, при ГИСО чаще всего мутации располагаются в 9-м или 11–м экзонах, и это влияет на подбор дозы иматиниба и его эффективность. Так, если аномалия находится в 11–м экзоне, разницы в эффективности разных доз препарата нет, тогда как при наличии ее в экзоне 9 назначение повышенной дозы иматиниба увеличивает эффективность лечения.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики генных аномалий при остром миелолейкозе с нормальным кариотипом, меланоме, мастоцитозе, карциноме яичек, ГИСО;
• для подбора рациональной схемы терапии;
• для прогноза течения и исхода заболевания.

Когда назначается исследование?

• На этапе генодиагностики при заболеваниях, в развитии которых может участвовать мутировавший cKit;
• перед началом химиотерапии и при дальнейшем мониторинге терапии;
• при рецидиве заболевания, ассоциированного с мутацией cKit.

Что означают результаты?

Референсные значения: мутация не обнаружена.

Кто назначает исследование?

Онколог, гематолог.