Лабораторная диагностика инфекционного мононуклеоза

Инфекционный мононуклеоз – это вирусное заболевание, которое чаще всего вызывается вирусом Эпштейна – Барр. Его особенность заключается в многообразии симптомов, именно поэтому лабораторная диагностика очень важна для постановки верного диагноза и подбора корректной терапии.

Синонимы русские

• Анализы крови на вирус Эпштейна – Барр
• Серологические тесты и ПЦР при инфекционном мононуклеозе

Синонимы английские

• Laboratory diagnostics of infectious mononucleosis
• EBV, Serology tests, Real-time polymerase chain reaction RT-PCR, Complete blood count CBC

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

В целом никаких строгих правил перед проведением исследования соблюдать не требуется, но рекомендуется учесть несколько простых моментов.

• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус Эпштейна – Барр, EBV (другое название – герпес-вирус человека 4 типа, HHV-4) – вездесущий ДНК-содержащий вирус. Подсчитано, что около 90 % взрослого населения имеют признаки перенесенной EBV-инфекции. У большинства иммунокомпетентных людей EBV-инфекция протекает бессимптомно, однако в 30-50 % случаев возникает инфекционный мононуклеоз, характеризующийся лихорадкой, выраженной слабостью, фарингитом, лимфаденопатией и гепатоспленомегалией. Эти признаки объединены в "мононуклеозоподобный синдром" и могут наблюдаться не только при острой EBV-инфекции, но и при некоторых других инфекционных заболеваниях (ВИЧ, токсоплазмоз). Ведущее значение в диагностике инфекционного мононуклеоза и дифференциальной диагностике заболеваний, протекающих с мононуклеозоподобным синдромом, принадлежит лабораторным исследованиям. Как правило, требуются сразу несколько лабораторных тестов. Для врача и пациента наиболее удобным решением является комплексное лабораторное исследование, включающее все необходимые анализы.

Для понимания принципов лабораторной диагностики инфекционного мононуклеоза необходимо учитывать некоторые особенности жизненного цикла вируса EBV. Как и все герпес-вирусы, EBV характеризуется литическим циклом и латентной фазой. Во время литического цикла происходит синтез регуляторных белков, в том числе так называемых ранних антигенов (early antigens, EA). Ранние антигены EA необходимы для синтеза ДНК вируса, капсидного белка (viral-capsidantigen, VCA) и других структурных белков. Литический цикл завершается разрушением инфицированных лимфоцитов и выходом сформированных вирусных частиц. Некоторые вирусы EBV, однако, не имеют завершенного литического цикла: вместо этого они устанавливают в лимфоцитах хроническую, персистирующую, латентную инфекцию. Во время латентной фазы происходит синтез ядерных антигенов (Ebstein-Barr nuclear antigens, EBNA) и некоторых структурных белков. В ответ на синтез в инфицированных лимфоцитах указанных белков EBV в организме вырабатываются специфические к ним антитела. Исследуя эти антитела, можно дифференцировать острую, перенесенную и хроническую инфекцию EBV.

Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG. Иммуноглобулины IgG к ранним антигенам могут быть определены в течение первых 3-4 недель после инфицирования и, как правило, не определяются через 3-4 месяца. EA IgG поэтому считаются маркерами острой инфекции. Следует отметить, что EA IgG иногда могут выявляться и при хронической EBV-инфекции.

Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM. Иммуноглобулины IgM к капсидному белку начинают определяться с появлением симптомов болезни и, как правило, исчезают через несколько недель. Выявление VCA-IgM поэтому свидетельствует об острой инфекции. Следует отметить, что у некоторых пациентов VCA-IgM могут сохраняться в течение нескольких месяцев. В других случаях первичной инфекции VCA-IgM не определяются вовсе.

Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA), IgG (количественно). Ядерный антиген, в действительности представляет собой группу из 6 антигенов (EBNA 1–6). Соответственно, иммуноглобулины к ядерному антигену – это также группа из 6 различных видов иммуноглобулинов. EBNA-1 IgG, как правило, не выявляется в первые 3-4 недели болезни и поэтому считается маркером перенесенной или хронической инфекции. В ходе анализа определяется титр антител. В отличие от перенесенной инфекции, хроническая инфекция EBV характеризуется высоким титром EBNA IgG.

Результаты серологических тестов, однако, не всегда согласуются. Более того, интерпретация результатов серологических тестов может быть затруднена у пациентов с иммунодефицитом и у пациентов, получивших переливание компонентов крови или иммуноглобулинов. Для получения более точной диагностической информации в дополнение к серологическим тестам проводят анализ ПЦР на ДНК вируса.

Epstein Barr Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) и одна из ее разновидностей –  ПЦР в реальном времени – это метод молекулярной диагностики, в ходе которого в биологическом материале (например, в крови) определяется генетический материал (в данном случае ДНК) возбудителя инфекции. Присутствие в крови ДНК вируса Эпштейна – Барр считается признаком первичной инфекции или реактивации латентной инфекции. Метод ПЦР является более чувствительным, чем серологические тесты, анализом для диагностики EBV-инфекции на раннем ее этапе.

Общий анализ крови и лейкоцитарная формула. Этот анализ необходим скорее для исключения других причин заболевания, чем для диагностики инфекционного мононуклеоза. Лейкоцитоз, лимфоцитоз и атипичные мононуклеары могут наблюдаться и при других инфекционных заболеваниях и поэтому не являются специфическим для мононуклеоза признаком. С другой стороны, отсутствие лейкоцитоза свидетельствует против диагноза "инфекционный мононуклеоз". Также анемия и тромбоцитопения нехарактерны для этого заболевания.

Как правило, данных этого комплексного исследования достаточно для диагностики инфекционного мононуклеоза. В некоторых случаях, однако, могут потребоваться дополнительные лабораторные тесты. Результат исследования оценивают с учетом всех значимых данных клинических, лабораторных и инструментальных исследований.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики инфекционного мононуклеоза.
• Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих с мононуклеозоподобным синдромом.

Когда назначается исследование?

Необходимо провести диагностику при наличии симптомов, характерных для этого заболевания: 

• высокая температура до 40 °С;

• увеличение лимфатических узлов;

• болезненные ощущения в области горла, которые усиливаются при глотании;

• общая слабость, упадок сил, отсутствие аппетита;

• в крайне редких случаях увеличение печени, сыпь на теле и сильная головная боль.

Что означают результаты?

	EA IgG	VCA IgM	EBNA IgG	ПЦР	Анализ крови
Первичная инфекция (инфекционный мононуклеоз)	+	+	_	+	Лейкоцитоз Лимфоцитоз Реактивные лимфоциты
Перенесенная в анамнезе EBV-инфекция	-	+/-	+	-	Нет изменений
Латентная EBV-инфекция	-/+	-	+++	-/+	Нет изменений

Положительные значения

Обнаружение антител к вирусу Эпштейна – Барр и атипичных лимфоцитов может указывать на наличие инфекционного мононуклеоза. Однако важно учитывать клиническую картину и другие симптомы для постановки окончательного диагноза и подбора правильной терапии.

Отрицательные значения

Опасность этого заболевания в том, что даже отрицательный результат не исключает его наличия. На начальных стадиях инфекции уровень антител может быть недостаточно высоким для ее выявления. Поэтому при подозрении на мононуклеоз рекомендуется повторная сдача анализов через несколько дней, чтобы уточнить ситуацию.

Что может влиять на результат?

• Состояние иммунной системы;
• время, прошедшее с момента первичного инфицирования.

Важные замечания

• Результаты комплексного анализа следует интерпретировать с учетом дополнительных клинических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

• [40-502] Определение авидности иммуноглобулинов класса IgG к вирусу Эпштейна – Барр
• [07-046] Toxoplasma gondii, IgM
• [07-042] Определение антител к вирусу краснухи, IgM
• [07-096] Mumps Virus, IgM
• [07-032] HIV 1,2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)
• [09-015] Human Herpes Virus 6, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• [40-015] Лабораторное обследование печени

Кто назначает исследование?

Инфекционист, терапевт, педиатр, врач общей практики.

Литература

• Авдеева Ж. И. Клинико-лабораторная характеристика инфекционного мононуклеоза у детей / Ж. И. Авдеева, Н. В. Скрипченко, Е. И. Коваленко // Детские инфекции. – 2018. – Т. 17, № 1. – С. 21–27.

• Белова Е. В. Инфекционный мононуклеоз: современные аспекты диагностики и лечения / Е. В. Белова, О. В. Голубева // Лечащий врач. – 2020. – № 5. – С. 42–48.

• Борисова Т. С. Герпес-вирусные инфекции: руководство для врачей / Т. С. Борисова, В. В. Малиновская, Д. К. Ершов. – М.: Медицинское информационное агентство, 2016. – 304 с.

• Воробьева Н. Н. Инфекционный мононуклеоз у детей: особенности клинического течения и лабораторной диагностики / Н. Н. Воробьева, С. В. Зайцева, И. А. Дятлов // Педиатрия. – 2019. – Т. 98, № 6. – С. 77–83.

• Григорьев К. И. Инфекционный мононуклеоз: современные подходы к диагностике и терапии / К. И. Григорьев, А. А. Плоскирева // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. – 2017. – № 4 (21). – С. 82–89.

• Дроздова М. В. Оптимизация лабораторной диагностики инфекционного мононуклеоза / М. В. Дроздова, А. В. Караулов // Иммунология. – 2015. – Т. 36, № 6. – С. 379–383.

• Зверев В. В. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Том 2. Вирусология / В. В. Зверев, М. Н. Бойченко. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2016. – 480 с.

• Исаева Е. И. Инфекционный мононуклеоз: вопросы диагностики и дифференциальной диагностики / Е. И. Исаева, А. В. Демидова // Медицинский совет. – 2018. – № 11. – С. 66–71.