Исследование клеща на выявление РНК/ДНК возбудителей инфекций: клещевого энцефалита, боррелиоза (болезнь Лайма), анаплазмоза, эрлихиоза, риккетсиоза

Исследование, направленное на выявление инфицированности клещей возбудителями клещевого энцефалита, системного клещевого боррелиоза (болезни Лайма), моноцитарного эрлихиоза, гранулоцитарного анаплазмоза и риккетсиоза.

* Удаление клеща в Центре не производится. Клещ доставляется в Центр в пластиковом аптечном контейнере.

Синонимы русские

Иксодовый клещ, исследование клеща на инфекции.

Синонимы английские

Ixodes tick; tick-borne encephalitis.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Клеща.

Общая информация об исследовании

Клещевой энцефалит – это вирусное природно-очаговое трансмиссивное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением центральной нервной системы. Возбудителем заболевания служит РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Flavivirus семейства Togaviridae, группы Arboviruses. Инфекция носит сезонный (весенне-летний) характер и передается преимущественно с укусом клещей, при раздавливании внедрившегося насекомого, также возможен алиментарный путь передачи через инфицированное сырое молоко коров и коз. Основным резервуаром и переносчиком вируса являются клещи Ixodes persulcatus, Ixodes ricinus. Дополнительные "резервуары" вируса - грызуны, дикие животные и птицы. Заражение клеща происходит при укусе инфицированных животных. При этом вирус проникает в органы и ткани клеща, преимущественно в слюнной аппарат, кишечник, половой аппарат, и сохраняется в течение всего периода жизни насекомых. Возбудитель клещевого энцефалита подразделяется на три подвида: дальневосточный, центральноевропейский и сибирский. Инкубационный период заболевания длится от 3 до 21 дней, в среднем 10-14 дней. Клинические проявления носят разнообразный характер. Начальная фаза заболевания характеризуется лихорадкой, головной болью, миалгиями, возможно присоединение тошноты, рвоты, светобоязни. Далее развивается фаза неврологических расстройств, при которой происходит поражение центральной и периферической нервных систем. В зависимости от выраженности неврологических расстройств выделяют следующие формы заболевания: лихорадочную, менингеальную, менингоэнцефалитическую, менингоэнцефалополиомиелитическую и полирадикулоневритическую, двухволновый менингоэнцефалит. По степени тяжести инфекция может протекать в легкой, средней или тяжелой форме, что влияет на длительность заболевания, выраженность клинической симптоматики и варианты исхода болезни. В завершающую фазу заболевания может отмечаться выздоровление с угасанием неврологической симптоматики, хронизация патологического процесса или гибель больных. Возможно длительное вирусоносительство в виде латентной, персистентной или хронической форм инфекции.

Системный клещевой боррелиоз, или болезнь Лайма, – природно-очаговое трансмиссивное заболевание, возбудителем которого является грамотрицательная подвижная бактерия Borrelia burgdorferi семейства Spirochaetaceae. Заражение человека может происходить после укусов иксодовых клещей, проникновении боррелий со слюной клеща, при раздавливании внедрившегося насекомого, возможна трансплацентарная передача возбудителя от матери к плоду. Основным "резервуаром" и переносчиком вируса являются клещи Ixodespersulcatus, Ixodesricinus, Ixodes scapularis. Чаще всего заражение происходит в весенне-летний период активности клещей. Инкубационный период заболевания может длиться от 3 до 32 дней, по данным некоторых авторов до 60 дней. Клещевой боррелиоз имеет разнообразные клинические проявления. В первую фазу заболевания, фазу локальной инфекции, отмечаются лихорадка, интоксикация, головные боли, распространенная "мигрирующая" эритема на месте контакта клеща с кожей больного, регионарный лимфаденит. В фазу гематогенного и лимфогенного диссеминирования боррелий отмечается поражение органов и систем с развитием разнообразной клинической картины заболевания. Отмечается поражение опорно-двигательной, нервной, сердечно-сосудистой систем, глаз, печени, почек, кожи. При этом развивается клиническая картина невритов, радикулитов, энцефалитов, артритов, конъюнктивитов, миокардитов, появляется сыпь вне места укуса клеща. При прогрессировании заболевания, его осложнении и несвоевременном лечении могут развиться неврологические нарушения в виде менингита, менингоэнцефалита, энцефалита и энцефаломиелита, тяжелые поражения сердца, рецидивирующие и/или хронические артриты. Возможно развитие непрерывного или рецидивирующего течения болезни, хронических форм поражения нервной системы.

Ehrlichia chaffeensis – грамотрицательная бактерия, являющаяся возбудителем моноцитарного эрлихиоза человека. Заболевание получило свое название благодаря особенностям жизненного цикла микроорганизма: E. chaffeensis обладает антифагоцитарной активностью и способна персистировать внутри мононуклеарных фагоцитов. Моноцитарный эрлихиоз – это системное заболевание, при котором поражаются различные органы и ткани, но в первую очередь относящиеся к ретикулоэндотелиальной системе (костный мозг, печень, селезенка, тимус и лимфатические узлы). Основным "резервуаром" инфекции в нашей стране служат лисы, козы, а также домашние собаки и некоторые птицы. В качестве переносчика инфекции выступают клещи рода Ixodes и Dermacentor. Активность клещей возрастает весной и летом, и наиболее распространены они в Приволжском федеральном округе. Клиническая картина моноцитарного эрлихиоза не имеет каких-либо специфических признаков, поэтому ведущее значение в диагностике этого заболевания принадлежит методам лабораторной диагностики.

Anaplasma phagocytophilum – грамотрицательная бактерия из рода Anaplasma, семейство Ehrlichiaceae, ряд риккетсий. Она передается клещами рода Ixodes (I. persulcatus, I. ricinus, I. scapularis, I. pacificus) и проникает в кровь человека через кожу со слюной инфицированного клеща. Через кровь бактерии распространяются по всему организму, проникают внутрь гранулоцитарных клеток (нейтрофилов), в которых размножаются, и вызывают гранулоцитарный анаплазмоз. Естественным резервуаром данного микроорганизма являются грызуны в эндемичных районах. Была отмечена зараженность грызунов и клещей бактерией Anaplasma phagocytophilum на территории Сибири, Дальнего Востока, Горного Алтая, а эндемичные зоны соответствовали лесным и лесостепным зонам с ареалами обитания иксодовых клещей. Среди всех заболеваний клещевыми инфекциями гранулоцитарный анаплазмоз составляет 23 %. Он распространяется насекомыми, которые являются также переносчиками возбудителей вирусного клещевого энцефалита, лайм-боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза, поэтому в эндемичных районах в 69 % случаев выявляется сочетание анаплазмоза и других заболеваний, передающихся иксодовыми клещами. Для гранулоцитарного анаплазмоза характерна весенне-летняя сезонность, связанная с периодами активности и повышенной численности таежных клещей. Заражение происходит во время пребывания в лесу, на дачных участках. Инкубационный период составляет от 3 до 23 дней (в среднем 14 дней). Продолжительность заболевания – 10-14 дней. Гранулоцитарный анаплазмоз может протекать как в бессимптомных, так и в тяжелых формах. Симптомы заболевания неспецифичны: повышение температуры до 38-39 °С, озноб, головная боль, тошнота, боль в мышцах и суставах. Иногда наблюдаются боли в животе, диарея, кашель. Кожные высыпания для анаплазмоза нехарактерны и регистрируются в случаях коинфицирования лайм-боррелиозом. Anaplasma phagocytophilum склонна поражать нейтрофилы, в связи с этим угнетаются защитные механизмы организма, что способствует присоединению и развитию грибковых, бактериальных и вирусных инфекций. Наиболее тяжело заболевание переносят пожилые пациенты и лица с иммунодефицитами. Длительное персистирование бактерии в организме человека не зарегистрировано. Ранняя антибиотикотерапия позволяет быстро остановить развитие заболевания и предотвратить его осложнения, поэтому так важна ранняя диагностика заболевания.

Rickettsia spp. - облигатные внутриклеточные бактерии, относящиеся к семейству Rickettsiaceae. Некоторые риккетсиозные заболевания, такие как эпидемический сыпной тиф, вызываемый Rickettsia prowazekii, относятся к древнейшим инфекционным заболеваниям. Другие, такие как японская пятнистая лихорадка, пятнистая лихорадка острова Флиндерс и африканская клещевая лихорадка, вызываемые соответственно R. japonica, R. honei и R. africae, были идентифицированы только в последние полвека. Риккетсии передаются человеку в основном членистоногими, включая клещей, блох, клещей и вшей. Клещевой риккетсиоз (клещевой сыпной тиф) – острое инфекционное природно-очаговое облигатно-трансмиссивное заболевание, сопровождающееся лихорадочным состоянием, специфическим поражением кожи в месте внедрения возбудителя, увеличением регионарных лимфатических узлов, розеолезно-папулезной сыпью. Возбудитель клещевого риккетсиоза – Rickettsia sibirica относится к семейству Rickettsiaceae, роду Rickettsia. Внутри рода Rickettsia он входит в биологическую группу клещевой пятнистой лихорадки, представители которой способны размножаться не только в цитоплазме, но и в ядрах поражаемых клеток. Инкубационный период - от 2 до 7 дней. В месте присасывания клеща развивается болезненность, гиперемия и небольшой инфильтрат с некротической корочкой в центре, увеличиваются регионарные лимфатические узлы. Могут отмечаться слабость, озноб, боль в суставах, снижение аппетита. Начало заболевания острое, у некоторых больных наблюдается продромальный период, которому сопутствуют общая слабость, боль, ломота в мышцах, суставах, небольшое повышение температуры, катаральные изменения в глотке и верхних дыхательных путях. В этом периоде уже выражено специфическое поражение кожи в месте внедрения возбудителя. На 2-3-й день развивается клиническая картина болезни: повышение температуры тела до 40 ºС, лихорадка, головная боль, бессонница, озноб, ломота и боли во всем теле, могут быть тошнота и рвота. Продолжительность лихорадки 3-18 дней. На 2-4-й день болезни появляется сыпь. Она является характерным признаком клещевого риккетсиоза. Высыпания начинаются с конечностей, вероятно наличие сыпи на ладонях и подошвах. Сыпь в течение 1,5-2 дней распространяется на туловище, иногда на лицо. Имеет вид крупных розеол и папул ярко-розового цвета. Размеры – от мелких элементов величиной с булавочную головку до крупных, размером в 2-3 мм. Наиболее характерны изменения со стороны сердечно-сосудистой системы: брадикардия и понижение артериального давления. Симптомы со стороны нервной системы: резкая головная боль, миалгии, артралгии, нарушения сна и аппетита. Общая клиническая картина клещевого риккетсиоза из-за многообразия форм может различаться течением и симптоматикой.

В связи с тем что основным "резервуаром" и переносчиком этих инфекций являются иксодовые клещи, в лабораторной диагностике и выявлении возбудителей данных заболеваний используется непосредственное исследование клещей. Возможно обследование экземпляров клещей из природных очагов их распространения в целях выявления наличия возбудителей, определения процента инфицированных клещей на обследуемых территориях, количественного содержания вируса в случае клещевого энцефалита. Необходимым является исследование отдельных экземпляров клещей при их укусе человека, попадании возбудителей инфекций со слюной клеща, при раздавливании внедрившегося насекомого. Это важно для определения возможного инфицирования клеща, своевременной диагностики заболеваний, экстренной специфической профилактики и проведении целенаправленного патогенетического лечения.

Для чего используется исследование?

• Для определения инфицированности исследуемых клещей и показаний для проведения целенаправленного лечения.

Когда назначается исследование?

• При обследовании клеща после укуса человека, раздавливания внедрившегося насекомого, извлечения клеща, в том числе в специализированном стационаре.
• При симптомах острого лихорадочного заболевания после укуса клеща.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно по всем видам возбудителей инфекций.

Важные замечания 

• При подозрении на наличие инфекций, но при отрицательных результатах исследования клеща рекомендуется исследование крови пациентов.

• Если клещ не является переносчиком инфекций, что выявляется при исследовании, это позволяет не проводить экстренную профилактику и (или) лечение. Требуется наблюдение за состоянием организма.

• Если при исследовании клеща выяснилось, что он является переносчиком инфекции, необходимо сразу обратиться к врачу-инфекционисту для проведения лечения. При выявлении в клеще вируса клещевого энцефалита экстренная серопрофилактика проводится не позднее четвертого дня после присасывания клеща.

• Если при исследовании клеща выяснилось, что он является переносчиком клещевого энцефалита, через 14 дней кровь исследуют на антитела к клещевому энцефалиту; если переносчиком боррелиоза (болезни Лайма) - через месяц после укуса необходимо исследовать кровь на наличие антител к боррелиям. Обязательно периодическое повторное исследование крови на антитела к боррелиям в течение полугода после укуса.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, вирусолог, паразитолог, эпидемиолог.

Литература

1. Wang G, Liveris D, Brei B, Wu H, Falco RC, Fish D, Schwartz I. Real-time PCR for simultaneous detection and quantification of Borrelia burgdorferi in field-collected Ixodes scapularis ticks from the Northeastern United States / Appl Environ Microbiol. 2003 Aug;69(8):4561–5.
2. Pancewicz SA, Garlicki AM, Moniuszko-Malinowska A, Zajkowska J, Kondrusik M, Grygorczuk S, Czupryna P, Dunaj J Diagnosis and treatment of tick-borne diseases recommendations of the Polish Society of Epidemiology and Infectious Diseases. Polish Society of Epidemiology and Infectious Diseases / Przegl Epidemiol. // 2015;69(2):309-16, 421–8.
3. Ткачев С. Е., Ливанова Н. Н., Ливанов С. Г. Исследование генетического разнообразия вируса клещевого энцефалита сибирского генетического типа, выявленного в клещах Ixodespersulcatus на Северном Урале в 2006 году / Сибирский научный медицинский журнал, № 4 (126). 2007.
4. Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. 2013.
5. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.