Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии KI-67, а также риска прогрессирования дисплазии и развития рака шейки матки по экспрессии p16INK4a

Исследование ткани с помощью специальных реактивов по принципу антиген-антитело. Ki-67 – маркер пролиферативной активности опухолевой клетки. Он оценивается в процентах и показывает, какой процент опухолевых клеток активно делится. Является фактором прогноза опухолевого заболевания и ответа опухоли на химиотерапевтическое лечение. Чем ниже показатель Ki-67, тем хуже опухоль реагирует на химиотерапевтическое лечение (и наоборот). Морфологическое описание и определение экспрессии белка p16^INK4a на поверхности эпителиальных клеток шейки матки выполняется для оценки риска озлокачествления дисплазии и развития рака шейки матки.

Состав исследования:

• Гистологическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии Ki-67, а также риска прогрессирования дисплазии и развития рака шейки матки по экспрессии p16INK4a
• Иммуногистохимическое исследование с определением пролиферативной активности по экспрессии Ki-67, а также риска прогрессирования дисплазии и развития рака шейки матки по экспрессии p16INK4a

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимическое исследование ткани, исследование образца опухолевой ткани, исследование ткани опухоли;

Белок p16^INK4a; онкопротеин; гистологическое исследование, иммуногистохимическое исследование (ИГХ).

Метод исследования

Гистологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани (биоптат) образования шейки матки.

Общая информация об исследовании

Дисплазия и рак шейки матки занимают значительное место в структуре онкологических заболеваний среди женщин. Дисплазия представляет собой изменение эпителия влагалищной части шейки матки и появление в нем клеток с признаками атипии. Считается предраковым заболеванием, но при своевременном обнаружении и лечении процесс обратим и не приводит к развитию рака шейки матки. Рак шейки матки является достаточно распространенной и важной проблемой среди всех онкологических заболеваний у женщин. Доказано, что в развитии данной патологии играет роль наличие некоторых типов вируса папилломы человека (ВПЧ), способных при определенных условиях вызывать озлокачествление дисплазии (или других предраковых заболеваний).

На современном этапе диагностики рака шейки матки одним из достоверных методов исследования является комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование по экспрессии p16INK4a, дающее наиболее объективную и полную оценку происходящим процессам.

p16INK4a – это белок, который обладает функцией регулирования клеточного цикла и предотвращает процесс бесконтрольного деления клеток. При определенных условиях вирус папилломы человека (ВПЧ) способен встраиваться в геном клетки и оказывать влияние на процесс ее деления, что приводит к усиленной пролиферации. При этом в опухолевых клетках, процесс деления которых происходит уже под контролем измененного генома, происходит реактивное увеличение количества белка p16INK4a. Таким образом, в опухолевых клетках увеличивается экспрессия белка p16INK4a, что сигнализирует о встраивании ВПЧ в геном клетки и ее перерождении в опухолевый процесс.

Гистологическое исследование, являющееся первым этапом комплексной диагностики, представляет собой морфологическое описание патологического процесса, в том числе определение "злокачественности". Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) выполняется вторым этапом и позволяет определить "пролиферативный потенциал" новообразования, т.е. возможность злокачественного перерождения клеток, а также спрогнозировать течение уже имеющейся опухоли. ИГХ проводится путем добавления к исследуемому материалу специальных антител, которые связываются с белком p16INK4a. Затем происходит качественная оценка образовавшегося комплекса антиген-антитело и делается вывод об экспрессии белка p16INK4a на поверхности клеток.

Антиген Ki-67 представляет собой специфический белок, находящийся в ядерном материале опухолевой клетки, и является необходимым для осуществления ее пролиферации, т.е. деления. Обнаружение Ki-67 указывает на опухолевые клетки, которые находятся в фазе деления клеточного цикла. Это позволяет понять, насколько активно и быстро происходит деление опухолевых клеток, а следовательно, и скорость роста новообразования, оценить риск метастазирования, определиться с тактикой терапии и вероятным ответом на нее, прогнозом заболевания.

Считается, что выявление маркера Ki-67 наиболее показательно при раке молочной железы, однако ряд исследований доказывает целесообразность проведения анализа при наличии доброкачественных новообразований с оценкой риска их озлокачествления.

Совместное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого материала позволяет сначала получить морфологическое описание процесса, а затем определить его пролиферативную активность – степень и скорость деления клеток. Это дает достаточно точную и объективную оценку степени злокачественности опухоли и прогноз ее дальнейшего развития.

Гистологическое исследование проводится путем изучения срезов опухолевого материала под микроскопом после предварительного окрашивания, которое позволяет выявить и описать отклонения от нормы в структуре ткани, дать характеристику изменениям и сделать вывод о доброкачественности или злокачественности процесса. Далее проводится иммуногистохимическое исследование (ИГХ), направленное на выявление активности роста опухоли. В ходе ИГХ в образец патологической ткани, имеющей в своем составе клетки с антигенами Ki-67, добавляют специально синтезированные меченые антитела. В процессе реакции образуется комплексы "антиген-антитело", доля которых свидетельствует о количестве клеток, находящихся в активной фазе деления. В заключении указывается индекс Ki-67 – индекс пролиферативной активности, выраженный в процентах. При низких значениях индекса опухоль считается менее агрессивной, при высоких – высокоагрессивной. Также по индексу пролиферативной активности можно судить о возможном ответе опухолевого процесса на терапию, оценить эффективность уже проведенного лечения.

Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухолевого процесса является достаточно сложным и трудоемким анализом. Однако объективность и целесообразность его проведения оправдана точными результатами диагностики, наиболее верным выбором терапии и ответом на нее, более качественным прогнозом течения заболевания.

Для чего используется исследование?

• Морфологическое описание опухолевого процесса;
• определение пролиферативной активности (скрытого потенциала деления клеток и увеличения в размерах новообразования);
• верификация наличия опухолевого процесса и его доброкачественности/злокачественности;
• прогноз дальнейшего течения процесса, оценка скорости роста новообразования, риска метастазирования, прогноза заболевания;
• подбор наиболее адекватного и объективного метода лечения/выбор терапии, назначение специфической терапии, контроль эффективности проведенной терапии;
• для скрининговой диагностики рака шейки матки и предраковых состояний у женщин;
• для контроля лечения рака шейки матки, предраковых состояний, цервикальной интраэпителиальной неоплазии.

Когда назначается исследование?

• При наличии ракового процесса, неопластических изменений слизистой шейки матки (дисплазии шейки матки);
• при наличии доброкачественного образования для исключения озлокачествления;
• при обследовании женщин с высоким риском онкологических заболеваний, наличием рака шейки матки у родственников, с хроническими воспалительными и инфекционными гинекологическими заболеваниями;
• при обнаружении положительных результатов на инфицирование ВПЧ онкогенных серотипов;
• при наличии рака шейки матки для определения биологического потенциала опухоли;
• при назначении специфической терапии или контроле проведенного лечения, при подборе и контроле терапии.

Что означают результаты?

1) Результат исследования представляет собой морфологическое описание препарата и подсчет количества клеток, имеющих или не имеющих антиген Ki-67. Высчитывается индекс пролиферативной активности (процент клеток с наличием экспрессии белка Ki-67). Интерпретация полученного результата проводится врачом, назначившим исследование, в зависимости от локализации опухолевого процесса, его типа, проведенного лечения и т.д.

2) Повышение экспрессии p16INK4a:

• поражение низкой степени тяжести – воспалительные изменения, характерные для инфекции ВПЧ, слабая дисплазия эпителия;
• поражение высокой степени тяжести – умеренная дисплазия эпителия;
• тяжелая дисплазия эпителия и рак шейки матки.

Результат представлен в виде морфологического описания исследуемой ткани после окрашивания специальными красителями и характера изменений. Значения зависят от типа опухоли, анамнеза, проведенного лечения и других факторов. Окончательную интерпретацию проводит врач в каждом конкретном случае.

Также рекомендуется

• Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16 и Ki-67 (включая жидкостную цитологию – окрашивание по Папаниколау)
• Комплексное гистологическое и иммуногистохимическое исследование с определением рецепторного статуса Прогестерона и Эстрогена

• Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию

• Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]

• Лабораторные маркеры рака шейки матки

Кто назначает исследование?

Онколог, акушер-гинеколог.

Литература

• Sales Gil R, Vagnarelli P. Ki-67: More Hidden behind a 'Classic Proliferation Marker'. Trends Biochem Sci. 2018 Aug 18.
• Du R, Zhang H, Shu W, Chen B, Li Y, Zhang X, Wu X, Wang Z. Correlation between Ki-67 Expression and Hemodynamics of Contrast-Enhanced Ultrasound in Patients with Breast Infiltrative Ductal Carcinoma. Am Surg. 2018 Jun 1;84(6):856-861.
• Fu HC, Chuang IC, Yang YC, Chuang PC, Lin H, Ou YC, Chang Chien CC, Huang HS, Kang HY. Low P16_INK4A Expression Associated with High Expression of Cancer Stem Cell Markers Predicts Poor Prognosis in Cervical Cancer after Radiotherapy. Int J Mol Sci. 2018 Aug 27; 19(9).
• Lechner M, Chakravarthy AR, Walter V, Masterson L, Feber A, Jay A, Weinberger PM, McIndoe RA, Forde CT, Chester K, Kalavrezos N, O'Flynn P, Forster M, Jones TM, Vaz FM, Hayes DN, Fenton TR. Frequent HPV-independent p16/INK4A overexpression in head and neck cancer. Oral Oncol. 2018 Aug;83:32-37.
• van Zummeren M, Leeman A, Kremer WW, Bleeker MCG, Jenkins D, van de Sandt M, Heideman DAM, Steenbergen R, Snijders PJF, Quint WGV, Berkhof J, Meijer CJLM. Three-tiered score for Ki-67 and p16_ink4a improves accuracy and reproducibility of grading CIN lesions. J Clin Pathol. 2018 Jul 16.
• Inoue K, Fry EA. Aberrant expression of p16_INK4a in human cancers – a new biomarker? Cancer Rep Rev. 2018 Mar;2(2).