ЭПР-тест расширенный (исследование транспортных свойств альбумина методом электронного парамагнитного резонанса)

Комплексное исследование для ранней in vitro диагностики онкологических заболеваний. Исследование включает в себя анализ транспортной активности альбумина – инновационный тест, позволяющий выявить онкологический процесс любой локализации, в том числе на ранних, доклинических стадиях. В результате клинических исследований было доказано, что у пациентов с различными видами злокачественных новообразований наблюдается специфическое изменение пространственной структуры и физико-химических свойств молекул альбумина. При возникновении онкологического заболевания в организме вырабатываются низкомолекулярные вещества (биологические маркеры), которые, соединяясь с альбумином, меняют его структуру и функциональные свойства. В основе метода лежит регистрация конформационных изменений молекулы альбумина методом электронно-парамагнитного резонанса (ЭПР), что позволяет in vitro проводить диагностику и мониторинг активности злокачественной пролиферации. Может применяться в целях неспецифического контроля физиологических и патологических изменений гомеостаза в процессе лечения онкологического заболевания для последующей корректировки применяемого лечения.

При диагностике и мониторинге онкологических заболеваний сочетание с другими лабораторными тестами позволяет исключить прочие воспалительные процессы и значительно повысить точность диагностики.

Состав комплексного расширенного исследования:

• Клинический анализ крови (c лейкоцитарной формулой)
• Альбумин в сыворотке
• Белок общий в сыворотке
• С-реактивный белок, количественно (метод с нормальной чувствительностью)
• ЭПР-тест (исследование транспортных свойств альбумина методом электронного парамагнитного резонанса)
• Липидограмма

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Метод исследования

Метод электронно-парамагнитного резонанса (ЭПР).

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

ЭПР-тест (исследование транспортных свойств альбумина методом электронного парамагнитного резонанса) является уникальным скрининговым тестом для ранней диагностики онкологических заболеваний. Позволяет выявить онкологический процесс любой локализации, в том числе на ранних, доклинических стадиях. В результате клинических исследований было доказано, что у пациентов с различными видами злокачественных новообразований наблюдается специфическое изменение пространственной структуры и физико-химических свойств молекул альбумина. При возникновении онкологического заболевания в организме вырабатываются низкомолекулярные вещества (биологические маркеры), которые, соединяясь с альбумином, меняют его структуру и функциональные свойства. В основе метода лежит регистрация конформационных изменений молекулы альбумина методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР), что позволяет in vitro проводить диагностику и мониторинг активности злокачественной пролиферации. Может применяться в целях неспецифического контроля физиологических и патологических изменений гомеостаза в процессе лечения онкологического заболевания для последующей корректировки применяемого лечения.

Человеческий сывороточный альбумин является наиболее распространенным циркулирующим белком плазмы. Помимо значительного вклада в осмотическое давление, он также участвует в регуляции многих других физиологических процессов, включая баланс окислительно-восстановительного состояния, воспалительные и/или иммунологические реакции, а также фармакокинетику и фармакодинамику многих лекарств. Наиболее клинически значимыми функциями этого белка считаются транспортная, антиоксидантная и детоксикационная (инактивирует токсичные соединения). С каждым годом появляется все больше данных, свидетельствующих, что альбумин подвергается структурному и функциональному повреждению при заболеваниях, характеризующихся повышенной системной воспалительной реакцией и окислительным стрессом, как это происходит, например, при хронических заболеваниях печени, сепсисе, злокачественных процессах. Поэтому при накоплении и переносе специфичных для злокачественного процесса молекул альбумин изменяется структурно и функционально.

Сывороточный альбумин человека синтезируется и секретируется в печени. Структурно он имеет девять двойных петель, охватывающих три гомологичные области (домена), обычно обозначаемых как I (аминокислоты 1–195), II (аминокислоты 196-383) и III (аминокислоты 384-585). Три домена имеют сложное строение и тесно связаны между собой. Они собираются асимметрично и напоминают по форме сердце. На них имеется девять участков связывания с различными молекулами, называемые FA1–FA9. Так, большинство лекарственных препаратов взаимодействует с FA1–FA4, а рядом с FA6 находится участок, обладающий способностью связывать некоторые бактерии, например Finegoldia MAGNA, ранее известную как Peptostreoptococcus magnus. Существуют и участки связывания с микроэлементами: Mg (II), Al (III), Ca (II), Mn (II), Co (II/III), Ni (II), Cu (I/II), Zn (II), Cd (II), Pt (II), Au (I / II), Hg (II) и Tb (III). Альбумин также участвует в связывании и переносе гормонов, например тироксина.

Хотя домены схожи по структуре, каждый из них имеет разные лиганд-связывающие сродства и функции. Такая структура способствует быстрому связыванию с молекулами эндогенных и экзогенных веществ (например, с гемом, билирубином, лекарствами, токсинами), включая широкий спектр лекарств.

Взаимодействие лекарственных средств с альбумином обычно улучшает их распределение и биодоступность в зависимости от конкретных фармакокинетических свойств каждого из них. Кроме того, сывороточный альбумин играет значительную роль в фармакокинетическом поведении различных лекарств, в том числе в периоде полувыведения, в регулировании эффективности, снижении токсичности и улучшении специфичности целевого препарата.

Человеческий сывороточный альбумин может подвергаться цистеинизации или добавлению другого цистеина в цистеин-34 через дисульфидную связь. Эта модификация была обнаружена у пациентов с заболеваниями печени и почек, а также у диабетиков. Цистеинированные уровни сывороточного альбумина человека коррелируют во время беременности с высоким риском маточно-плацентарной недостаточности. Повышенная цистеинизация альбумина в сыворотке крови также наблюдается при терминальной стадии у пациентов с почечной недостаточностью.

Во всех трех доменах альбумин имеет семь участков связывания с жирными кислотами с длинной цепью. Каждый участок имеет различное сродство к жирным кислотам. Связывающие жирные кислоты участки 1–5 связываются с карбоксилатной частью жирных кислот электростатическим/полярным взаимодействием.

Доказано, что при злокачественных процессах альбумин иначе связывается и переносит жирные кислоты. Поэтому при динамическом наблюдении за онкологическими больными вместе с определением содержания общего белка и альбумина в сыворотке крови рекомендуется исследовать его структурные и функциональные свойства. Это связано с тем, что белок, у которого первичная структура вполне нормальна, но нарушена вторичная и/или третичная структура, не может эффективно выполнять свою транспортную функцию.

У больных с впервые выявленным онкологическим заболеванием любой локализации также рекомендуется проводить исследование функциональных свойств альбумина для определения степени заблокированности его центров связывания и для оценки детоксикационной функции печени.

В ходе исследования методом электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) на основании полученных физических параметров производится автоматический расчет нескольких показателей функциональности альбумина в отношении жирных кислот: связывающая эффективность (BE), транспортная эффективность (RTQ), детоксикационная эффективность (DTE), а также показатель нативности конформации альбумина (DR).

При диагностике и мониторинге онкологических заболеваний расширенный ЭПР-тест – сочетание ЭПР с другими лабораторными тестами – позволяет исключить прочие воспалительные процессы и значительно повысить точность диагностики.

Для чего используется исследование?

• Для определения структурных и функциональных свойств альбумина;
• для своевременной диагностики нарушений транспортной системы крови при интоксикации;
• для ранней диагностики активно растущих опухолей в комплексе с другими анализами;
• для неспецифического контроля физиологических и патологических изменений гомеостаза в процессе лечения онкологического заболевания для последующей корректировки применяемого лечения;
• для определения риска возникновения послеоперационных осложнений при хирургическом лечении онкологических заболеваний;
• для мониторинга лечения злокачественных новообразований и раннего выявления рецидивов.

Когда назначается исследование?

• Скрининг групп риска – для первичного обнаружения роста злокачественной опухоли в организме пациента;
• исключение злокачественной опухоли при наличии характерных клинических симптомов у пациента;
• мониторинг проводимой противоопухолевой терапии;
• контроль рецидивов у пациентов после противоопухолевой терапии;
• диагностика воспалительных и гнойно-септических заболеваний;
• прогноз развития септических осложнений при гнойно-септических заболеваниях.

Что означают результаты?

Основным показателем при диагностике активных злокачественных образований, прошедшим клинические испытания на проверку диагностической эффективности, является показатель нативности конформации альбумина (DR). Это параметр, характеризующий степень модификации альбумина, вызванной захватом и накоплением в молекуле альбумина низкомолекулярных метаболитов, характерных для опухолевого роста. Другие показатели являются вспомогательными характеристиками, позволяющими оценить общее состояние альбумина и повысить достоверность результата.

DR – показатель нативности конформации альбумина;

ВЕ – связывающая эффективность альбумина;

RTQ – транспортная эффективность альбумина;

DTE – детоксикационная эффективность альбумина.

Показатель	Норма	Пограничный -  "серая зона"	патологический
DR	1,2-5	1,2-0,8	< 0,8
BE	65-135%	60-65%	< 60%
RTQ	60-100%	55-60%	< 55%
DTE	50-175%	40-50%	< 40%

Показатели DR, BE, RTQ и DTE в референтных пределах:

• Нет признаков злокачественного процесса в организме. В профилактических целях рекомендуется повторить тест через 12 месяцев.

Показатель DR патологический (<0,8); показатели BE, RTQ и DTE – норма или отклонения от нормы:

• Не исключено наличие активного злокачественного образования. Необходима дополнительная уточняющая диагностика. Кроме того, рекомендовано контрольное измерение ЭПР-спектра в течение месяца при исключении причин, снижающих точность и чувствительность метода.

Показатель DR в "серой зоне" (0,8; показатели BE, RTQ и DTE в референтных пределах:

• Повышенный риск возникновения активного злокачественного образования. Показано повторное обследование в течение месяца.

Показатель DR в "серой зоне", показатели BE, RTQ и DTE – отклонения от нормы:

• Для получения достоверного результата показано повторное обследование пациента в течение месяца при устранении причин, ведущих к нарушению функциональности альбумина.

Что может влиять на результат?

Состояния, снижающие точность измерения при диагностике онкологическогопроцесса

Ложноположительные результаты:

- сепсис, септический шок;

- печеночная недостаточность;

- острое вирусное либо воспалительное заболевание;

- ожоги высокой степени;

- тяжелая травма при высокой потере крови;

- тяжелая медикаментозная интоксикация;

- послеоперационный период (до 28 суток);

- воздействие алкоголя и наркотических средств;

- пониженное содержание в крови альбумина – гипоальбуминемия (< 35 г/л);

- период беременности.

Ложноотрицательные результаты:

- множественный отказ внутренних органов;

- повышенное содержание в сыворотке триглицеридов и липопротеинов (осуществляется автоматический контроль во время измерения);

- повышенное содержание в крови альбумина – гиперальбуминемия (> 55 г/л).

Список лекарственных препаратов, при употреблении которых в высоких дозировках не рекомендуется одновременное проведение ЭПР-теста:

• кортизон и производные;
• октаноаты и производные;
• салицилат и производные;
• варфарин и производные;
• лизофосфатическая кислота и производные;
• третиноин и производные;
• вальпроат и производные;
• латрозол и производные;
• диклофенак и производные;
• тамоксифен и производные.

Кто назначает исследование?

Онколог, гинеколог, уролог, терапевт.

Также рекомендуется

• 40-136 Общий лабораторный скрининг (онкологический)
• 08-143 ЭПР-тест (исследование транспортных свойств альбумина методом электронного парамагнитного резонанса)