Полное молекулярно‑генетическое исследование цитологического материала щитовидной железы (KRAS, NRAS, HRAS, TERT, BRAF, RET/PTC, PAX8/PPARG)

Определение мутаций в генах BRAF, KRAS, NRAS, HRAS, TERT, а также транслокаций RET/PTC, PAX8/PPARG рекомендовано для диагностики рака щитовидной железы в цитологическом материале промежуточного риска злокачественности по Bethesda (III-V). Исследование мутации BRAF V600E и мутаций в промотерном регионе гена TERT рекомендовано при послеоперационной стратификации риска рецидива рака щитовидной железы для определения тактики ведения пациентов.

Синонимы русские

BRAF, мутация BRAF, BRAFV600E, диагностика рака щитовидной железы, узлы щитовидной железы, рак щитовидной железы, ингибиторы BRAF, BRAF/MEK ингибиторы, RAS, KRAS, NRAS, HRAS, TERT, RET/PTC, PAX8/PPARG.

Синонимы английские

BRAF, BRAF mutation, BRAF V600E, thyroid cancer diagnosis, thyroid nodules, thyroid cancer, BRAF inhibitors, BRAF / MEK inhibitors, RAS, KRAS, NRAS, HRAS, TERT, RET / PTC, PAX8 / PPARG.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани, образец ткани в парафиновом блоке.

Общая информация об исследовании

Тонкоигольная аспирационная биопсия (ТАБ) с последующим цитологическим исследованием – золотой стандарт диагностики рака щитовидной железы. В настоящее время в соответствии с системой Bethesda цитологическое заключение включает в себя несколько диагностических категорий: недиагностический или неудовлетворительный пунктат (Bethesda I), доброкачественный (Bethesda II), атипия неопределенного значения или фолликулярные изменения неопределенного значения (Bethesda III), фолликулярная неоплазия или подозрение на фолликулярную неоплазию (Bethesda IV), подозрение на рак (Bethesda V), рак (Bethesda VI). Несмотря на комплексность системы Bethesda, данный метод имеет ряд существенных недостатков. Один из них - возможность получения цитологии промежуточного риска злокачественности (по Bethesda III-V). Пациентам с цитологическим заключением Bethesda III-V проводят повторную процедуру ТАБ или диагностическую операцию, которую можно избежать большинству пациентов с доброкачественными новообразованиями. Использование дополнительных молекулярно-генетических методов диагностики в некоторых случаях позволяет избежать как ненужной операции, так и повторного вмешательства. В связи с этим в зарубежных и отечественных рекомендациях пациентам с неясной цитологией показано проведение генетического анализа на широкий спектр аберраций в генах BRAF, TERT, KRAS, NRAS, HRAS, RET/PTC, PAX8/PPARG, который позволяет увеличить точность диагностики карцином щитовидной железы.

Мутация BRAF V600E представляет собой наиболее частую аберрацию, обнаруживаемую при папиллярном раке щитовидной железы (40-50 % случаев). Также данная мутация встречается в 20-40 % случаев низкодифференцированных карцином и 30-40 % случаев анапластических карцином. Наличие мутации BRAFV600E обуславливает риск обнаружения злокачественной опухоли в цитологическом материале категории Bethesda III-V более чем в 95 % случаев.

Распространенность мутаций в промотерном регионе гена TERT варьируется и составляет от 7 до 50 %. Риск обнаружения злокачественного процесса в материале Bethesda III-V - более 95 %. Определение мутаций в гене TERT вместе с мутацией BRAF V600E рекомендовано всем пациентам с высокодифференцированным раком щитовидной железы для послеоперационной стратификации риска рецидива для определения тактики ведения пациентов.

Распространенность мутаций в генах семейства RAS при фолликулярном варианте папиллярной карциномы составляет 30-45 %, при фолликулярной карциноме – около 45 %, при анапластической карциноме – 10-20 %. Цитологические образцы категории Bethesda III, IV с наличием мутаций в генах семейства RAS могут рассматриваться как цитологическая категория с подозрением на рак (Bethesda V).

Распространенность транслокаций RET/PTC, PAX8/PPARG значительно варьируется и составляет 3-20 % всех случаев карцином щитовидной железы. Обнаружение данных аберраций в цитологическом материале промежуточных категорий обуславливает более чем 95-процентный риск злокачественного процесса.

Для чего используется исследование?

• Исследование мутаций в генах BRAF, KRAS, NRAS, HRAS, TERT, а также транслокаций RET/PTC, PAX8/PPARG используется для диагностики рака щитовидной железы в цитологическом материале промежуточного риска злокачественности по Bethesda (III-V).
• Исследование мутации BRAFV600E, мутаций в промотерном регионе гена TERT также используется для диагностики рака щитовидной железы и послеоперационной стратификации риска рецидива рака щитовидной железы.

Когда назначается исследование?

• Рекомендовано всем пациентам с подозрением на рак щитовидной железы (категория BethesdaIII-V) для диагностики злокачественного процесса.
• Для послеоперационной стратификации риска рецидива карциномы щитовидной железы для персонализации ведения пациентов.

Что означают результаты?

Референсные значения

Мутации V600E в гене BRAF не обнаружено. Мутаций в генах KRAS, NRAS, HRAS, а также транслокаций RET/PTC, PAX8/PPARG не обнаружено.

Положительный результат

Обнаружена патогенная мутация V600E в гене BRAF.

Обнаружена патогенная мутация в гене KRAS/NRAS/HRAS.

Обнаружена патогенная транслокация RET/PTC, PAX8/PPARG.

Важные замечания

Для получения заключения по результату обследования необходимо проконсультироваться у врача-онколога.

Кто назначает исследование?

Врач-онколог.

Литература

• Haugen BR, Alexander EK, Bible KC, et al. 2015 American Thyroid Association Management Guidelines for Adult Patients with Thyroid Nodules and Differentiated Thyroid Cancer: The American Thyroid Association Guidelines Task Force on Thyroid Nodules and Differentiated Thyroid Cancer. Thyroid. 2016;26(1):1‐133. doi:10.1089/thy.2015.0020.
• Filetti S, Durante C, Hartl D, Leboulleux S, Locati LD, Newbold K, et al. Thyroid cancer: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up. Ann Oncol 2019. doi:10.1093/annonc/mdz400.
• Nishino M, Nikiforova M. Update on molecular testing for cytologically indeterminate thyroid nodules. Arch. Pathol. Lab. Med., 2018. doi:10.5858/arpa.2017-0174-RA.
• Sahli ZT, Smith PW, Umbricht CB, Zeiger MA. Preoperative Molecular Markers in Thyroid Nodules. Front Endocrinol (Lausanne). 2018;9:179. Published 2018 Apr 18. doi:10.3389/fendo.2018.00179.
• Roth MY, Witt RL, Steward DL. Molecular testing for thyroid nodules: Review and current state. Cancer 2018. doi:10.1002/cncr.30708.