Молекулярно-генетическое исследование при 1, 2А, 2В, 2М, 2N, 3 типе болезни фон Виллебранда (экзоны 18-21 и 28 гена VWF)

Болезнь Виллебранда представляет собой одно из самых распространенных генетически-обусловленных заболеваний свертываемости крови. Заболевание вызвано аберрациями в гене VWF, кодирующем фактора Виллебранда. В зависимости от формы патологического изменений фактора Виллебранда различают типы болезни с его количественным изменением (тип 1 и тип 3) и с качественными изменениями (тип 2А, 2В, 2М, 2N).

Синонимы русские

Болезнь фон Виллебранда.

Синонимы английские

Von Willebrand disease.

Название гена

VWF.

Метод исследования

Диагностическое секвенирование.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозная кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Фактор фон Виллебранда (VWF) – ключевой компонент гемостаза. При повреждении сосудов в результате контакта с субэндотелиальными структурами (коллагеном) VWF меняет свою конформацию и связывается с тромбоцитами, индуцируя их адгезию и агрегацию в месте повреждения и формирование тромба. Также VWF переносит в крови фактор свертывания VIII, защищая его от инактивации. Нарушение этих функций при дефиците VWF ведет к патологии гемостаза и склонности к кровотечениям.

Болезнь фон Виллебранда (БФВ) представляет собой одно из самых распространенных заболеваний, связанных с повышенным риском кровотечений. При БФВ кровотечения могут возникать как в младенчестве (при 3-м типе), так и в более позднем возрасте. Чаще всего состояние проявляется эпизодами кровоизлияний на слизистых и коже при физическом воздействии. Кроме этого, может наблюдаться меноррагия, тромбоцитопения, а также кровоизлияния в ткани мышц и суставы. Тяжесть кровотечения обратно коррелирует с концентрацией фактора фон Виллебранда.

В зависимости от формы патологического изменения фактора фон Виллебранда различают типы болезни с его количественным изменением (тип 1 и 3) и с качественными изменениями (тип 2А, 2В, 2М, 2N).

Тип 1 БФВ представляет собой наиболее распространенную форму и связан со снижением концентрации белка. Состояние наследуется аутосомно-доминантно, однако примерно у 25 % пациентов не удается найти патогенных изменений в гене VWF.

При типе 3 БФВ наблюдается практически полное отсутствие фактора, что приводит к тяжелым кровотечениям, наследуется аутосомно-рецессивно.

При типах 2А, 2В, 2М БФВ наблюдается нарушение функциональной активности фактора Виллебранда. Данные типы БФВ наследуются аутосомно-доминантно.

При 2N типе заболевания не наблюдается снижение концентрации фактора фон Виллебранда, однако нарушается связывание данного белка с фактором VIII, что приводит к повышенной скорости протеолиза последнего. В связи с описанным патогенезом, симптомы 2N типа БФВ схожи с проявлениями гемофилии А. Тип 2N наследуется аутосомно-рецессивно. Большинство патогенных вариантов при 2N типе (80 %) обнаруживаются в экзонах 18-20.

Для чего используется исследование?

• Диагностика наследственных форм болезни Виллебранда.
• Дифференциальная диагностика причин тяжелых спонтанных кровотечений.

Что означают результаты?

Обнаружение патогенного или условно патогенного вариант гена VWF, ассоциированного с болезнью фон Виллебранда, при наличии характерных клинических и лабораторных данных позволяет подтвердить наследственную форму БФВ.

При отсутствии патогенных и условно-патогенных вариантов в экзоне 18-21 и 28 гена VWF, кодирующего фактор фон Виллебранда, значительно снижается вероятность наличия у пациента болезни фон Виллебранда типа 2В, 2N и 2М. Однако при типах 2А, а также при 1-м и 3-м типе данного заболевания патогенные варианты могут располагаться в других участках гена. В связи с этим данный результат не позволяет на 100 % исключить тип 1, 2А и 3. Кроме этого, примерно в 25 % случаев 1-го типа БФВ патогенных и условно патогенных вариантов выявить не удается.

Выявление гетерозиготного патогенного или условно-патогенного варианта гена VWF не позволяет с уверенностью подтвердить диагноз "БФВ 2N типа", так как данное состояние наследуется аутосомно-рецессивно. Однако при клинических и лабораторных проявлениях БФВ гетерозиготное носительство патогенного варианта значительно повышает вероятность наличия у пациента данного заболевания. При обнаружении гомозиготного патогенного варианта диагноз "БФВ 2N типа" подтверждается. Обнаружение двух гетерозиготных вариантов в гене VWF требует оценки цис- и транс-положения выявленных изменений путем генотипирования отца и матери больного.

Что может влиять на результат?

Несмотря на то что генетические исследования являются точным методом лабораторной диагностики, время возникновения клинических проявлений заболевания (пенетрантность болезни) зависит от факторов внешней среды, формы заболевания и индивидуальных генетических факторов.

Важные замечания

Для получения заключения по результату исследования необходимо проконсультироваться у клинического генетика.

Кто назначает исследование?

Гематолог, реаниматолог, хирург, акушер-гинеколог, педиатр, генетик.

Литература

• Goodeve A. Diagnosing von Willebrand disease: genetic analysis. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2016 Dec 2;2016(1):678-682.
• Zolkova J, Sokol J, Simurda T et al. Genetic Background of von Willebrand Disease: History, Current State, and Future Perspectives. Semin Thromb Hemost. 2020 Jun;46(4):484-500.
• Itzhar-Baikian N, Boisseau P, Joly B, Veyradier A. Updated overview on von Willebrand disease: focus on the interest of genotyping. Expert Rev Hematol. 2019 Dec;12(12):1023-1036.
• Borràs N, Batlle J, Pérez-Rodríguez A, López-Fernández MF et al. Molecular and clinical profile of von Willebrand disease in Spain (PCM-EVW-ES): comprehensive genetic analysis by next-generation sequencing of 480 patients. Haematologica. 2017 Dec;102(12):2005-2014.
• Seidizadeh O, Peyvandi F, Mannucci PM. Von Willebrand disease type 2N: An update. J Thromb Haemost. 2021 Apr;19(4):909-916.