Молекулярно-генетическая диагностика тромботической тромбоцитопенической пурпуры (экзоны 5, 6, 20, 24, 29 гена ADAMTS13)

Тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (ТТП) представляет собой заболевание, характеризующееся снижением активности фермента ADAMTS13, который участвует в расщеплении мультимеров фактора Виллебранда, что приводит к персистенции последних и спонтанной агрегации тромбоцитов. Для ТТП характерны неиммунная микроангиопатическая гемолитическая анемия, неиммунная тромбоцитопения потребления, лихорадка, почечная недостаточность и неврологические нарушения.

Синонимы русские

Тромботическая тромбоцитопеническая пурпура, болезнь Мошковица, синдром Апшоу – Шульмана.

Синонимы английские

Thrombotic thrombocytopenic purpura (TTP), Upshaw-Schulman syndrome.

Название гена

ADAMTS13.

Метод исследования

Диагностическое секвенирование, полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозная кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (ТТП, болезнь Мошковица) представляет собой заболевание, характеризующееся снижением активности фермента ADAMTS13, который участвует в расщеплении мультимеров фактора Виллебранда. Нарушение работы данного фермента приводит к персистенции мультимерного состояния фактора Виллебранда и спонтанной агрегации тромбоцитов.

Недостаток активности ADAMTS13 может быть обусловлен либо аберрациями в активном центре, либо наличием аутоантител – ингибиторов ADAMTS-13. В соответствии с этим ТТП подразделяется на наследственную форму (синдром Апшоу – Шульмана, наследуется аутосомно-рецессивно) и иммуноопосредованную.

Для ТТП характерны неиммунная микроангиопатическая гемолитическая анемия, неиммунная тромбоцитопения потребления, лихорадка, почечная недостаточность и неврологические нарушения. ТТП – довольно редкий синдром (частота – 4–6 : 1 000 000 человек), однако без своевременной диагностики и лечения он приводит к летальному исходу в 95 % случаев.

Диагноз "ТТП" подтверждается при активности ADAMTS13 в плазме менее 10 %. При подозрении на врождённую форму необходимо тестирование на наличие патогенных вариантов гена ADAMTS13.

Для чего используется исследование?

Диагностика наследственной формы тромботической тромбоцитопенической пурпуры.

Что означают результаты?

• Обнаружение гомозиготного варианта или же двух гетерозиготных вариантов гена ADAMTS13 в транс-положении подтверждает диагноз "наследственная форма тромботической тромбоцитопенической пурпуры".
• Обнаружение гетерозиготного патогенного или условно-патогенного варианта гена ADAMTS13 не позволяет точно подтвердить наследственную форму тромботической тромбоцитопенической пурпуры, так как данное состояние имеет аутосомно-рецессивное наследование. Однако учитывая, что данный тест анализирует не всю последовательность гена ADAMTS13 и вторая аберрация может находиться в неисследованном участке гена, то при наличии лабораторных (снижение активности фермента ADAMTS13) и клинических симптомов вероятность наследственной формы тромботической тромбоцитопенической пурпуры значительно возрастает. Кроме того, рядом исследований было показано, что даже гетерозиготное носительство патогенных и условно патогенных вариантов гена ADAMTS13 вызывает клинически значимое снижение активности одноименного фермента и повышает риск развития тромбозов.
• Отсутствие патогенных и условно-патогенных вариантов в экзонах 5, 6, 20, 24, 29 гена ADAMTS13 значительно снижает вероятность наследственной формы тромботической тромбоцитопенической пурпуры. Данный результат не исключает диагноза "тромботическая тромбоцитопеническая пурпура", так как одна из причин данного состояния – спорадические случаи, связанные с синтезом аутоантител против белка ADAMTS13 или другими состояниями (онкологические заболевания, инфекции, химиотерапия и пр.). Также в редких случаях патогенные варианты могут присутствовать в других частях гена.

Важные замечания

Для получения заключения по результату исследования необходимо проконсультироваться у клинического генетика.

Кто назначает исследование?

Гематолог, нефролог, реаниматолог.

Литература

• Галстян Г. М., Клебанова Е. Е. Диагностика тромботической тромбоцитопенической пурпуры // Терапевтический архив. – 2020. – Т. 92. – № 12. – C. 207-217. doi: 10.26442/00403660.2020.12.200508.
• Kremer Hovinga JA, George JN. Hereditary Thrombotic Thrombocytopenic Purpura. N Engl J Med. 2019 Oct 24;381(17):1653-1662. doi: 10.1056/NEJMra1813013.
• Nusrat S, Beg K, Khan O, Sinha A, George J. Hereditary Thrombotic Thrombocytopenic Purpura. Genes (Basel). 2023 Oct 18;14(10):1956. doi: 10.3390/genes14101956.
• Scully M. Hereditary thrombotic thrombocytopenic purpura. Haematologica. 2019 Oct;104(10):1916-1918. doi: 10.3324/haematol. 2019. 225896.