Диагностика системного мастоцитоза (мутация в гене KIT D816V)

Мастоцитоз – гетерогенная группа заболеваний, которые характеризуются патологической локальной или диффузной пролиферацией и накоплением клональных (неопластических) тучных клеток (мастоцитов) в коже и/или других органах (костный мозг, печень, селезенка, лимфатические узлы). Точечная мутация D816V в экзоне 17 гена c-KIT выявляется более чем у 90 % взрослых, больных мастоцитозом, и у 40 % детей; реже выявляются другие мутации. Выявление мутаций в гене c-KIT определяет тактику лечения (таргетная терапия).

Синонимы русские

Мастоцитоз, системный мастоцитоз.

Синонимы английские

Mastocytosis, systemic mastocytosis.

Название гена

c-KIT

Метод исследования

Диагностическое секвенирование, полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозная кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.

Общая информация об исследовании

Мастоцитоз – гетерогенная группа заболеваний, которые характеризуются патологической локальной или диффузной пролиферацией и накоплением клональных (неопластических) тучных клеток (ТК, мастоциты) в коже и/или других органах (костный мозг, печень, селезенка, лимфатические узлы). Мастоцитоз – редкое заболевание, распространенность составляет 9 случаев на 100 000 населения.

Мастоциты происходят из стволовых кроветворных клеток костного мозга и могут мигрировать через эндотелий в периферические ткани, где проходят окончательные стадии дифференцировки и созревания. Специфические гранулы мастоцитов содержат медиаторы воспаления и вазоактивные вещества, высвобождающиеся при связывании иммуноглобулина E с аллергенами или другими стимулирующими агентами. Специфическим ферментом, секретируемым ТК, является триптаза, концентрация которой в сыворотке крови в норме составляет 0–15 нг/мл и коррелирует с количеством мастоцитов и клинической формой мастоцитоза.

Другая специфическая характеристика ТК – наличие на поверхности зрелых клеток рецептора CD117 (c-KIT), лигандом которого является фактор стволовых клеток. CD117 – трансмембранный белок с тирозинкиназной активностью.

Патогенез мастоцитоза связан с возникновением соматических мутаций в генах, участвующих в регуляции активации ТК. Наиболее часто при мастоцитозе встречаются мутации в гене c-KIT. Мутации приводят к лиганд-независимому конститутивному фосфорилированию тирозинкиназы, блоку апоптоза и активации пролиферации ТК. Точечная аберрация D816V в экзоне 17 гена c-KIT D816V выявляется более чем у 90 % взрослых, больных мастоцитозом, и у 40 % детей. Реже определяются другие мутации c-KIT: V560G, D815K, D816Y, D816F, D816H, D816G, D816I, D820G, I817V, N819Y, L799F, D820G, N822L, N822I, InsVI815-816, E839K, S840N, S849I. Аберрации в других генах считаются неспецифическими для мастоцитоза.

Пролиферация и накопление ТК в тканях лежит в основе клинических проявлений мастоцитоза. При мастоцитозе ТК могут быть активированы IgE-зависимыми (аллергены) и IgE-независимыми механизмами, что ведет к высвобождению медиаторов воспаления и цитокинов. В результате высвобождения большого количества секреторных гранул, содержащих гистамин, серотонин и другие воспалительные медиаторы, развиваются клинические проявления заболевания. Они разнообразны. Кожные проявления при мастоцитозе могут как возникать изолированно, так и являться проявлением системного заболевания. Кожный мастоцитоз считается доброкачественным заболеванием с высокой вероятностью спонтанного регресса. У взрослых больных чаще встречается распространенный системный мастоцитоз (СМ), который включает в себя агрессивный системный мастоцитоз (АСМ), СМ с ассоциированным гематологическим заболеванием (СМ-АГЗ), тучноклеточный лейкоз (ТКЛ). Кожа вовлечена в патологический процесс практически в 100 % случаев мастоцитоза у детей и в 85 % случаев у взрослых. Однако отсутствие высыпаний не исключает диагноза "СМ". Если у больного наблюдаются рецидивирующие анафилактические реакции, приливы жара, остеопороз, язвенная болезнь, диарея неясной этиологии, должна быть настороженность в отношении мастоцитоза.

Появление симптомов может быть индуцировано многочисленными экзогенными факторами, такими как трение, тепло, укус насекомых, стресс, употребление наркотических веществ. Интенсивность симптомов варьируется от умеренной до тяжелой или даже угрожающей жизни. Клинические проявления заболевания неспецифичны: кожа – зуд и покраснение, желудочно-кишечный тракт – диспептические расстройства, центральная нервная система – головная боль, депрессия, когнитивные расстройства, костно-мышечная система – остеопения, остеопороз. Гепарин является одним из медиаторов, выделяемых ТК. У больных могут наблюдаться нарушения адгезии и агрегации тромбоцитов, коагуляционного каскада. При мастоцитозе есть риск как самопроизвольных кровотечений, так и кровотечений после выполнения инвазивных манипуляций.

Диагностика мастоцитоза регламентирована критериями ВОЗ 2022 г. В них входит молекулярно-генетическое исследование на D816V и другие мутации гена KIT. При выявлении специфических мутаций возможно проведение высокоспецифичной таргетной терапии.

Мидостаурин одобрен к применению при мутациях киназного домена c-KIT (D816Y и D816V).

Авапритиниб одобрен для лечения поздних стадий СМ, он избирательно и эффективно воздействует на KIT D816V, обладая в десять раз большей эффективностью по сравнению с мидостаурином.

Иматиниб утвержден FDA для лечения взрослых больных АСМ без аберрации KITD816V или с неизвестным статусом мутаций c-KIT, однако его применение у больных СМ ограничено, поскольку большинство из них является носителями KITD816V. Терапия иматинибом целесообразна в редких случаях СМ с аберрацией c-KIT, чувствительной к иматинибу (F522C, V560G) либо у больных с отсутствием KIT D816V.

В эксперименте на клеточных линиях было показано, что дазатиниб ингибирует тирозинкиназу c-KIT, в том числе с аберрацией KITD816V.

Для чего используется исследование?

• Диагностика мастоцитоза.
• Диагностика системного мастоцитоза.
• Дифференциальная диагностика при рецидивирующих анафилактических реакциях, остеопорозе, язвенной болезни, диарее неясной этиологии.

Что означают результаты?

Референсные значения

Мутации D816V в гене с-KIT обнаружено не было.

Выявление мутацииD816V гена KIT позволяет с учетом другой лабораторной и клинической картины подтвердить наличие у пациента системного мастоцитоза. Также положительный результат по мутации D816V гена KIT является показанием к назначению таргетной терапии.

Отрицательный результат не исключает у пациента системного мастоцитоза, так как описаны редкие мутации в других регионах гена c-KIT при данном заболевании.

Важные замечания

Для получения заключения по результату исследования необходимо проконсультироваться у клинического генетика.

Кто назначает исследование?

Терапевт, гематолог, аллерголог, дерматолог, гастроэнтеролог.

Литература

• Меликян А.Л., Суборцева И.Н., Шуваев В.А. и др. Национальные клинические рекомендации по диагностике и лечению мастоцитоза. Гематология и трансфузиология. 2021;66(2):280-311. https://doi.org/10.35754/0234-5730-2021-66-2-280-311.
• El Hussein S, Chifotides HT, Khoury JD et al. Systemic Mastocytosis and Other Entities Involving Mast Cells: A Practical Review and Update. Cancers (Basel). 2022 Jul 17;14(14):3474. doi:10.3390/cancers14143474.
• Costa A, Scalzulli E, Carmosino I et al. Systemic mastocytosis: 2023 update on diagnosis and management in adults. Expert Opin Emerg Drugs. 2023 Dec;28(3):153-165. doi: 10.1080/14728214.2023.2221028.
• Nicolosi M, Patriarca A, Andorno A et al. Precision Medicine in Systemic Mastocytosis. Medicina (Kaunas). 2021 Oct 20;57(11):1135. doi: 10.3390/medicina57111135.