Молекулярно-генетическая диагностика дефицита лизосомной кислой липазы (ген LIPA)

Дефицит лизосомной кислой липазы (ДЛКЛ) – редкое наследственное заболевание, которое может проявляться в двух формах, различающихся по степени тяжести: болезнь Вольмана (тяжелая форма) и болезнь накопления эфиров холестерина (более легкая форма). При подтверждении диагноза "ДЛКЛ" показана пожизненная заместительная ферментная терапия.

Синонимы русские

Дефицит лизосомной кислой липазы (ДЛКЛ), болезнь Вольмана, болезнь накопления эфиров холестерина (БНЭХ).

Синонимы английские

Lysosomal acid lipase deficiency (LAL-D), Wolman disease, cholesteryl ester storage disease.

Название гена

LIPA.

Метод исследования

Секвенирование по Сэнгеру.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозная кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую газированную воду.

Общая информация об исследовании

Дефицит лизосомной кислой липазы (ДЛКЛ) – редкое наследственное заболевание, в основе которого лежит наличие патогенных вариантов в гене LIPA, кодирующем лизосомную кислую липазу (ЛКЛ). Дефицит данного фермента приводит к нарушению разрушения триглицеридов и эфиров холестерина и их накоплению в лизосомах с развитием дислипидемии и накоплением липидов в печени, селезенке, стенках кровеносных сосудов и других тканях. Заболевание сопровождается дислипидемией с повышением уровня общего холестерина в крови, высоким уровнем холестерина липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), низким уровнем холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛПВП), также возможно повышение уровня триглицеридов. Почти всегда повышается уровень трансаминаз (аланинаминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ). Диагноз "дефицит лизосомальной кислой липазы" устанавливается по совокупности клинических данных и результатов лабораторных исследований, ведущее среди которых – определение активности лизосомальной кислой липазы в сухих пятнах крови. Частота ДЛКЛ в Европе составляет 1 : 40 000 – 1 : 300 000. В России она предположительно составляет от 1 : 150 000 до 1 : 100 000.

Клинические проявления болезни зависят от остаточной активности фермента ЛКЛ. Заболевание может протекать в двух формах:

• болезнь Вольмана – быстро развивающаяся тяжелая форма ДЛКЛ с началом во младенческом возрасте;
• болезнь накопления эфиров холестерина (БНЭХ), которая манифестирует позже (в среднем в 2,5 года) и прогрессирует более медленно.

Болезнь Вольмана – редкая быстро развивающаяся прогрессирующая форма ДЛКЛ, вызванная тяжелым дефицитом ЛКЛ, проявляющаяся с первых месяцев жизни. При отсутствии ферментозаместительной терапии дети погибают в течение первых 6–12 месяцев жизни в результате истощения на фоне синдрома мальабсорбции (нарушения всасывания питательных веществ в тонкой кишке) в сочетании с прогрессирующей недостаточностью функций печени и надпочечников.

Клиническая картина болезни Вольмана: прогрессирующее увеличение печени и селезенки; рвота, диарея, дефицит массы тела и задержкой темпов физического развития; в ряде случаев развивается паралитическая кишечная непроходимость; отличительная черта болезни Вольмана – увеличение и кальцификация надпочечников с развитием недостаточности коры надпочечников; к неврологическим проявлениям болезни Вольмана относят прогрессирующую задержку психомоторного развития, положительный симптом Бабинского и другие патологические рефлексы.

Болезнь накопления эфиров холестерина (БНЭХ) вызвана частичным дефицитом ЛКЛ и характеризуется более медленным развитием и отсутствием неврологической симптоматики. Возраст манифестации БНЭХ колеблется от 1 месяца до 8,5 лет и в среднем составляет 2,5 года. Ведущие симптомы: поражение печени и дислипидемия. Прогрессирующее поражение печени, которое характеризуется синдромом цитолиза (проявляется повышением АЛТ и АСТ), увеличением печени и селезенки с формированием фиброза и цирроза печени. Дислипидемия – повышение в сыворотке крови уровня холестерина ЛПНП и триглицеридов при нормальном или низком уровне холестерина ЛПВП (гиперлипопротеинемия типа IIb) может приводить к ускоренному развитию атеросклероза.

Для чего используется исследование?

Для диагностики дефицита лизосомной кислой липазы, болезни Вольмана, болезни накопления эфиров холестерина.

Когда назначается исследование?

При сочетании у ребенка симптомов: повышенного холестерина и/или триглицеридов, повышенных АЛТ и АСТ, увеличения печени и селезенки, тошноты, рвоты, поноса, кальцинатов в надпочечниках, задержки роста и развития.

Что означают результаты?

Референсные значения: патогенных вариантов в гене LIPA обнаружено не было.

Норма

Отсутствие патогенных и вероятно патогенных вариантов при исследовании 1–10 экзонов гена LIPA значительно снижает вероятность дефицита лизосомальной кислой липазы. В связи с тем что данный тест не направлен на выявление протяженных делеций и дупликаций гена и интронных вариантов (< 1 % всех вариантов), результаты исследования не позволяет полностью исключить данную патологию, однако значительно снижают ее вероятность.

Не норма

Выявление патогенного гомозиготного варианта гена LIPA подтверждает диагноз "дефицит лизосомальной кислой липазы". При выявлении двух патологических гетерозиготных вариантов требуется подтверждение их транс-положения, для этого проводится генотипирование родителей обследуемого.

Что может влиять на результат?

Данный тест не направлен на выявление протяженных делеций и дупликаций гена и интронных вариантов (< 1 % всех вариантов).

Важные замечания

Для получения заключения по результату обследования необходимо проконсультироваться у клинического генетика.

Кто назначает исследование?

Педиатр, генетик.

Литература

1) Другие нарушения накопления липидов (дефицит лизосомой кислой липазы). Клинические рекомендации МЗ РФ. 2023 г.

2) Пшеничникова И. И., Захарова И. Н., Скоробогатова Е. В., Бочарова Т. И., Коба Ю. В. Дефицит лизосомной кислой липазы – недооцененная причина гиперхолестеринемии у детей. Медицинский совет. 2022;(1):250-255. https://doi.org/10.21518/2079-701X-2022-16-1-250-255.

3) Korbelius M, Kuentzel KB, Bradić I, Vujić N, Kratky D. Recent insights into lysosomal acid lipase deficiency. Trends Mol Med. 2023 Jun;29(6):425-438. doi: 10.1016/j.molmed.2023.03.001.

4) Balwani M, Balistreri W, D'Antiga L, Evans J, Ros E, Abel F, Wilson DP. Lysosomal acid lipase deficiency manifestations in children and adults: Baseline data from an international registry. LiverInt. 2023 Jul;43(7):1537-1547. doi: 10.1111/liv.15620.

5) Штыкалова С. В., Егорова А. А., Глотов О. С., Киселев А. В., Коган И. Ю. Итоги селективного биохимического скрининга дефицита лизосомной кислой липазы и секвенирования гена LIPAу пациентов группы риска. Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2024;34(6):20-27. https://doi.org/10.22416/1382-4376-2024-1360-3612.