ДНК Ehrlichia chaffeensis / Ehrlichia muris (без дифференциации)

Выявление возбудителя моноцитарного эрлихиоза Ehrlichia chaffeensis / Ehrlichia muris (без дифференциации), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции определяется генетический материал (ДНК) микроорганизма.

Синонимы русские

Эрлихии, возбудитель моноцитарного эрлихиоза человека.

Синонимы английские

E. chaffeensis, E. muris, DNA [Polymerase chain reaction], Human monocytic ehrlichiosis (HME).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь, ликвор.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Ehrlichia chaffeensis / Ehrlichia muris – грамотрицательные бактерии, являющиеся возбудителями моноцитарного эрлихиоза человека. Заболевание получило свое название благодаря особенностям жизненного цикла микроорганизма: бактерии обладают антифагоцитарной активностью и способна персистировать внутри мононуклеарных фагоцитов.

Моноцитарный эрлихиоз – это системное заболевание, при котором поражаются различные органы и ткани, но в первую очередь относящиеся к ретикулоэндотелиальной системе (костный мозг, печень, селезенка, тимус и лимфатические узлы). Основным "резервуаром" инфекции в нашей стране служат лисы, козы, а также домашние собаки и некоторые птицы. В качестве переносчика инфекции выступают клещи рода Ixodes и Dermacentor. Активность клещей возрастает весной и летом, и наиболее распространены они в Приволжском федеральном округе.

Клиническая картина моноцитарного эрлихиоза не имеет каких-либо специфических признаков, поэтому ведущее значение в диагностике этого заболевания принадлежит методам лабораторной диагностики. Ehrlichia chaffeensis / Ehrlichia muris можно идентифицировать с помощью серологических тестов, бактериологического посева, световой микроскопии и молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. С помощью ПЦР можно исследовать как образцы различных биологических жидкостей (например, кровь или ликвор), так и фрагменты ткани (биоптат).

ПЦР следует отдать предпочтение при диагностике моноцитарного эрлихиоза в первые 7-10 дней от начала заболевания. В этот период титр защитных антител еще недостаточно высок, поэтому серологические тесты характеризуются частыми ложноотрицательными результатами. Так, например, чувствительность исследования IgG с помощью непрямой реакции иммунофлюоресценции (РНИФ) в начальный период заболевания не превышает 20  %. Для сравнения: чувствительность ПЦР достигает 85  %. Кроме того, чувствительность теста практически не изменяется, если биопсия была произведена на фоне начатого лечения антибактериальными препаратами. Следует, однако, отметить, что исследование защитных антител в парных сыворотках крови является хорошим дополнением к ПЦР и, как правило, выполняется в комплексе с ним.

Использование высокоспецифичного теста имеет особое значение в дифференциальной диагностике моноцитарного эрлихиоза и других трансмиссивных инфекций (боррелиоза, пятнистой лихорадки скалистых гор, бабезиоза, клещевых энцефалитов и гранулоцитарного анаплазмоза человека), имеющих схожие клиническую картину и особенности анамнеза. При этом положительный результат теста у пациента с признаками острого инфекционного процесса позволяет подтвердить диагноз "моноцитарный эрлихиоз". Такая высокая специфичность ПЦР достигается благодаря использованию в реакции специфической именно для E. chaffeensis пары праймеров.

Для моноцитарного эрлихиоза характерны некоторые отклонения общего и биохимического анализа крови: нейтропения, относительная лимфопения, тромбоцитопения, повышение печеночных ферментов и С-реактивного белка. Поэтому для диагностики моноцитарного эрлихиоза в комплексе с исследованием с помощью ПЦР рекомендуется также проводить и общеклинические тесты. У 17  % больных моноцитарным эрлихиозом наблюдаются осложнения в виде острой печеночной и почечной недостаточности, асептического менингита, синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови и др. В связи с этим при подтверждении диагноза "моноцитарный эрлихиоз" рекомендуются дополнительные лабораторные исследования, оценивающие функцию жизненно важных органов.

Следует отметить, что клещи рода Ixodes и Dermacentor являются переносчиками клещевого энцефалита, боррелиоза, анаплазмоза. Поэтому, если человека укусил клещ, вне зависимости от результата исследования на Ehrlichia chaffeensis / Ehrlichia muris, ему следует сдать дополнительные анализы для исключения других трансмиссивных инфекций.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики моноцитарного эрлихиоза.

Когда назначается исследование?

• При симптомах моноцитарного эрлихиоза: высокой лихорадке (более 39 °С), миалгии и артралгии, головной боли, тошноте, слабости, а также лимфаденопатии, кашле, боли в горле, нарушении сознания.
• Если известно, что пациента укусил клещ или что он пребывал в районах, где высока вероятность заразиться моноцитарным эрлихиозом (южные штаты Северной Америки, в России – Пермская область).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Отрицательный результат:

• отсутствие моноцитарного эрлихиоза.

Положительный результат:

• моноцитарный эрлихиоз.

Что может влиять на результат?

Применение доксициклина или рифампицина может приводить к ложноотрицательному результату.

Важные замечания

• Результат исследования следует оценивать с учетом дополнительных анамнестических, лабораторных и инструментальных данных.

Также рекомендуется

• Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
• С-реактивный белок, количественно (высокочувствительный метод)
• Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
• Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
• Anaplasma phagocytophilum, ДНК [ПЦР]
• Borrelia burgdorferi s.l., ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Borrelia burgdorferi, IgM, титр
• Borrelia burgdorferi, IgG, титр
• Вирус клещевого энцефалита, IgG
• Вирус клещевого энцефалита, IgM
• Полное серологическое обследование на "клещевые" инфекции
• Серологическая диагностика клещевого анаплазмоза и эрлихиоза
• Серологическая диагностика клещевого боррелиоза и энцефалита

Кто назначает исследование?

Инфекционист, врач общей практики.

Литература

• Ismail N, Bloch KC, McBride JW. Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261–92.
• Fauci et al. Harrison's PRINCIPLES OF INTERNAL MEDICINE /A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. – The McGraw-Hill Companies, 2008.
• Paddock CD, Childs JE. Ehrlichia chaffeensis: a prototypical emerging pathogen. Clin Microbiol Rev. 2003 Jan;16(1):37-64.
• Olano JP, Hogrefe W, Seaton B, Walker DH. Clinical manifestations, epidemiology, and laboratory diagnosis of human monocytotropic ehrlichiosis in acommercial laboratory setting. Clin Diagn Lab Immunol. 2003 Sep;10(5):891–6.