Типирование и количественное определение ДНК грибов рода Candida (C. albicans, C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis / C. tropicalis)

Выявление ДНК и определение видовой принадлежности дрожжеподобных грибов рода Candida, используемое для диагностики и контроля лечения кандидоза слизистых оболочек.

Синонимы русские

• ПЦР-исследование на грибы рода Candida
• Кандидоз полости рта, генитальный кандидоз

Синонимы английские

• The typing and quantitation of fungi DNA of Candida

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), мазок из полости рта, первая порция утренней мочи, соскоб урогенитальный.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
• Сбор биоматериала рекомендуется проводить до начала противомикробной терапии.
• Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
• Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка или сбора мочи.
• Мужчинам рекомендуется не мочиться и не проводить туалет половых органов в течение 6 часов до сбора мочи.

Общая информация об исследовании

Кандидоз слизистой – это инфекционно-воспалительный процесс, вызываемый дрожжеподобными грибами рода Candida, на слизистых оболочках. Наибольшее клиническое значение имеет кандидоз полости рта и генитальный кандидоз.

Дрожжеподобные грибы рода Candida (Candida spp.) считаются представителями нормальной микробиоты слизистых организма человека. Действительно, они могут быть выявлены примерно у 60 % взрослых здоровых людей в полости рта и у 12 % женщин во влагалище. В норме дрожжевые грибы находятся в равновесии с бактериальными комменсалами слизистых оболочек и не вызывают никаких воспалительных изменений ("здоровое носительство"). В некоторых ситуациях, однако, рост дрожжевых грибов усиливается, что сопровождается локальным инфекционно-воспалительным процессом – кандидозом, который также известен под названием "молочница".

Существует более 150 видов кандид, некоторые из них являются патогенными для человека: С. albicans, C. tropicalis, C. pseudotropicalis, C. krusei, C. parakrusei, C. parapsilosis, C. guillermondi. Candida albicans – наиболее частый возбудитель заболевания.

Кандидоз слизистых встречается очень часто. Факторами риска кандидоза полости рта являются младенческий и пожилой возраст, наличие тяжелых заболеваний с иммунодефицитом (особенно лейкоза, лимфомы, карциноматоза и ВИЧ), недостаточная гигиена полости рта, синдром Шегрена, сахарный диабет и другие эндокринологические заболевания, ношение зубных протезов, применение ингаляционных и системных глюкокортикоидов. Факторы риска генитального кандидоза (вульвовагинита) менее ясны, однако предполагается значение нарушения баланса эстрогенов и применения антибиотиков.

Клиническая картина кандидоза слизистых достаточна характерна (наличие крошковатых налетов белого цвета на фоне гиперемии при псевдомембранозной форме кандидоза), однако она может напоминать другие заболевания, в первую очередь лейкоплакию и красный плоский лишай. Для дифференциальной диагностики этих заболеваний проводят лабораторные тесты.

С учетом большой распространенности "здорового носительства" грибов рода Candida, у многих людей может быть определен незначительный рост дрожжеподобных грибов. При отсутствии каких-либо клинических признаков кандидоза такой рост не имеет никакого клинического значения. С другой стороны, обилие колоний дрожжевых грибов (более 10⁴ КОЕ/мл) у пациента с минимальными признаками кандидоза или вовсе без них, но с факторами риска этого заболевания, должно насторожить врача и, возможно, потребует назначения антимикотических препаратов.

ПЦР-анализ (полимеразная цепная реакция) – современный метод диагностики, который основан на обнаружении в исследуемом биологическом материале характерных только для определенного возбудителя уникальных последовательностей ДНК. В исследуемом материале находят специфическое ДНК возбудителя молочницы – разновидностей грибка Candidа – C. albicans, C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis / C. tropicalis. Обнаружение кандиды ПЦР-методом является наиболее объективным и точным среди прочих методов исследования. Высокая точность обязательно покажет наличие грибка в организме, однако это не означает, что именно он стал причиной заболевания пациента.

С учетом того, что иногда кандидоз слизистой (в первую очередь, полости рта) является симптомом более серьезного заболевания, в некоторых случаях могут быть рекомендованы дополнительные лабораторные тесты, в том числе анализ на глюкозу в крови, определение гормонов щитовидной, паращитовидной, половых желез и надпочечников, анализ на ВИЧ и иммунологические исследования. Более широкое лабораторное обследование также показано при наличии хронического кандидоза кожи и слизистых. Следует отметить, что генитальный кандидоз не относится к числу инфекций, передающихся половым путем (ИППП), поэтому при выявлении этого заболевания у пациента обследование его половых партнеров не показано.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики и контроля лечения кандидоза слизистых оболочек.

Когда назначается исследование?

• При наличии признаков кандидоза слизистых оболочек: жжение, болезненность, зуд, крошковатый налет белого цвета на фоне гиперемии;
• при наличии факторов риска кандидоза полости рта: младенческий и пожилой возраст, тяжелые заболевания с иммунодефицитом (лейкоз, лимфомы, карциноматоз и ВИЧ), недостаточная гигиена полости рта, синдром Шегрена, сахарный диабет и другие эндокринологические заболевания, ношение зубных протезов, применение ингаляционных и системных глюкокортикоидов.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: не обнаружено.

Концентрация: от < 1.0*10^2 до > 1.0*10^8.

Положительный результат:

• кандидоз слизистых;
• "здоровое носительство".

Отрицательный результат:

• норма;
• эффективное лечение противогрибковыми препаратами.

Важные замечания

• Иногда кандидоз слизистой является симптомом более серьезного заболевания, поэтому могут быть рекомендованы дополнительные лабораторные тесты.

Также рекомендуется

• Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
• Глюкоза в плазме
• Тиреотропный гормон (ТТГ)
• Паратиреоидный гормон, интактный
• HIV 1,2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Кто назначает исследование?

Терапевт, дерматовенеролог, врач общей практики.

Литература

• Gonsalves WC, Chi AC, Neville BW. Common oral lesions: Part I. Superficial mucosal lesions. Am Fam Physician. 2007 Feb 15;75(4):501–7.
• Burns T., Breathnach S., Cox N., Griffiths C. Rook’s Textbook of Dermatology / T. Burns, S. Breathnach , N. Cox, C. Griffiths; 8th ed. – Wiley-Blackwell, 2010.