Посев на грибы родов Candida, Aspergillus, Cryptococcus с подбором антимикотических препаратов для Candida spp. (мазки различных локализаций)

Исследование, в ходе которого с помощью специальной питательной среды выявляют возбудителей грибковых инфекций (Candida spp., Aspergillus spp., Cryptococcus spp.).

В ходе исследования проводится идентификация видов грибка и подбор антимикотических препаратов для дальнейшего лечения.

Синонимы русские

• Бакпосев на грибковые инфекции (Candida spp., Aspergillus spp., Cryptococcus spp.)
• Бактериологический (культуральный) метод

Синонимы английские

• Fungal culture (Candida spp., Aspergillus spp., Cryptococcus spp.)

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), мазок с конъюнктивы, мазок из носа, мазок из носоглотки, мазок из носовых пазух, мазок урогенитальный, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), мазок из уретры, мазок из цервикального канала, мазок с внутренней поверхности шейки матки (из цервикального канала), отделяемое абсцесса полости рта, отделяемое раны, отделяемое уха.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• За 3-4 часа до взятия мазков из ротоглотки (зева) не употреблять пищу, не пить, не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не жевать жевательную резинку, не курить. За 3-4 часа до взятия мазков из носа не закапывать капли/спреи и не промывать нос. Взятие мазков оптимально выполнять утром, сразу после ночного сна.
• Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
• Мужчинам – не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.
• Не проводить туалет полости рта в день взятия биоматериала на исследование.

Общая информация об исследовании

Грибковые инфекции (микозы) – обширная группа инфекционных заболеваний человека, вызываемых дрожжевыми, плесневыми или диморфными грибами. Микозы можно разделить на поверхностные, при которых поражение ограничивается кожей и слизистыми оболочками (например, кандидозный стоматит), и глубокие (инвазивные), при которых могут поражаться практически любые внутренние органы, например легкие, головной мозг, клапаны сердца, почки, суставы. Наибольшую трудность представляет диагностика инвазивных микозов.

Наиболее часто возбудителями инвазивных микозов являются грибы Candida albicans (инвазивный кандидоз), Cryptococcus neoformans (криптококкоз) и Aspergillus fumigatus (инвазивный аспергиллез). Эти разные заболевания имеют много общего. Во-первых, риск развития любого из трех указанных микозов повышен у людей с иммуносупрессией, возникающей при ВИЧ-инфекции, после трансплантации органов и тканей или на фоне онкогематологических заболеваний. Во-вторых, эти микозы могут протекать практически одинаково и сопровождаться неспецифическими признаками локального и системного инфекционного процесса (лихорадка, слабость, кашель, боль в грудной клетке, головная боль). Поэтому провести дифференциальную диагностику этих инвазивных микозов между собой на основании только клинических симптомов невозможно. Основную роль в диагностике инвазивных микозов играют лабораторные методы.

Как правило, диагностика инвазивных микозов носит комплексный характер, однако посев (бактериологический, или культуральный, метод) на грибы по-прежнему остается "золотым стандартом" диагностики. Бакпосев выступает в роли подтверждающего теста, в то время как предварительная диагностика инвазивных микозов основывается на менее точных, но более "быстрых" лабораторных методах, например анализе на криптококковый антиген при подозрении на криптококкоз, обработке раствором гидроксида калия KOH при подозрении на кандидоз или методе ПЦР при подозрении на аспергиллез.

В ходе бактериологического исследования анализируемый биоматериал вносят в специальную питательную среду. Скорость роста колоний разных видов грибов несколько отличается. Так, рост Aspergillus spp. будет заметен уже через 48 часов, Cryptococcus spp. – через 48-72 часа, а грибам Candida albicans потребуется до 1 недели и более. Следует отметить, что чувствительность бактериологического метода зависит от характера биоматериала, используемого для исследования. Так, например, выделить культуру гриба из крови, даже в случае диссеминированной инфекции, удается нечасто (особенно при инфекции Aspergillus spp. или Candida spp.). Другой фактор, влияющий на точность результата теста, – это использование антимикотических препаратов до взятия биоматериала. Применение азолов, амфотерицина и эхинокандинов до взятия биоматериала на исследование может приводить к ложноотрицательному результату. Учитывая эти особенности, важно подчеркнуть, что отрицательный результат посева не всегда позволяет полностью исключить инвазивный микоз.

Характер биоматериала также следует учитывать и при интерпретации положительного результата. Нестерильные среды (мокрота, моча, смывы с бронхов) могут в норме содержать грибы, поэтому положительный результат исследования нестерильных сред не позволяет говорить о наличии инвазивного микоза. Так, Candida spp. и Aspergillus spp. являются условно-патогенной флорой дыхательных путей и могут быть выделены в культуре при посеве мокроты здоровых людей. Cryptococcus spp. не относятся к нормальной микрофлоре человека, но также могут присутствовать на слизистых в течение короткого периода времени (транзиторное носительство) без каких-либо серьезных последствий для здорового человека. С другой стороны, обнаружение грибов в стерильных средах (кровь, образец ткани), особенно у пациента с иммуносупрессией, – это всегда патологический признак, который указывает на наличие инвазивного микоза.

Бактериологический метод целесообразно дополнить другими лабораторными исследованиями, в первую очередь гистологическим исследованием.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики инвазивных микозов.

Когда назначается исследование?

• При наличии у пациента факторов риска инвазивной грибковой инфекции: онкогематологических заболеваний, лекарственной иммуносупрессии, ВИЧ-инфекции;
• при наличии клинических или рентгенологических признаков инвазивных грибковых инфекций.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат:

• стерильный биоматериал (кровь, образец ткани): инвазивный микоз (кандидоз/криптококкоз/аспергиллез);
• нестерильный биоматериал (мокрота, мазки, отделяемое): инвазивный микоз или "здоровое носительство".

Отрицательный результат:

• норма;
• ложноотрицательный результат.

Что может влиять на результат?

• Применение антимикотических препаратов (азолы, амфотерицин, эхинокандины) до взятия биоматериала на исследование (может приводить к ложноотрицательному результату);
• характер биоматериала для исследования (стерильный или нестерильный).

Важные замечания

• Результат исследования следует интерпретировать с учетом факторов риска, клинических и рентгенологических признаков инвазивного микоза.
• Отрицательный результат исследования не позволяет исключить инвазивный микоз.

Также рекомендуется

• Посев на Aspergillus spp. без определения чувствительности к антимикотическим препаратам
• Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов
• Candida albicans, ДНК [реал-тайм ПЦР]
• Гистологическое исследование биоптатов органов и тканей (за исключением печени, почек, предстательной железы, лимфатических узлов)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, пульмонолог, аллерголог, врач общей практики.

Литература

• Ellepola AN, Morrison CJ. Laboratory diagnosis of invasive candidiasis. J Microbiol. 2005 Feb;43 Spec No:65-84. Review.
• GOLDMAN L, AUSIELLO D. Cecil MEDICINE/L. Goldman, D. Ausiello; 23 ed. – Saunder Elsevier, 2007.
• Fauci et al. Harrison's PRINCIPLES OF INTERNAL MEDICINE/A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. – The McGraw-Hill Companies, 2008.