Санкт-Петербург
+7 (812) 309 12 21
+7 (800) 700 03 03

Ваш город Санкт-Петербург?

 

закрыть

Результаты поиска: Количество результатов: 0

Анализы База знаний Акции Страницы Адреса
База знаний в вашем смартфоне или планшете
для iPhone и iPad
для Android
Пересчёт
единиц измерения
Нормы в
микробиологии

← вернуться к списку статей

Версия для печати


[12-077] Морфологическое исследование трепанобиоптата костного мозга

Гистологическое исследование образца губчатой кости с кроветворной тканью, которое позволяет оценивать тканевые взаимодействия в костном мозге, выявить подавление или активацию отдельных линий кроветворения, а также атипичные клеточные структуры.

Синонимы русские

Трепанобиопсия костного мозга, гистологическое исследование костного мозга.

Синонимы английские

Bone marrow biopsy, trephine biopsy, bone marrow histology.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Миелодиспластический синдром (МДС) - это гетерогенная группа клональных заболеваний системы кроветворения, для которой характерны цитопения в периферической крови (неэффективный гемопоэз), признаки дисмиелопоэза, клональные хромосомные изменения и высокая частота трансформации в острый лейкоз - 30-40%. Диагностика МДС до сих пор основывается на данных цитологического исследования периферической крови и/или костного мозга и наличии цитогенетических поломок. По мере изучения МДС появляется вс ебольше данных о гистологической диагностике этого заболевания на основании исследования трепанобиоптатов костного мозга (ТБКМ), хотя их гистологическая верификация очень сложна и требует высокой квалификации.

В отличие от цитологического исследования периферической крови или костного мозга, гистологическое исследование более точно позволяет оценить клеточность костного мозга, соотношение и локализацию клеток различных ростков гемопоэза, состояние стромы, васкуляризацию костного мозга, наличие реактивных изменений в виде лимфоидной гиперплазии, в том числе с формированием реактивных лимфоидных узелков, наличия плазматических клеток, гистиоцитов, макрофагов, тучных клеток, нарушения обмена железа.

При МДС в ТБКМ чаще выявляется гиперплазия костного мозга. При нем в костном мозге отмечается гиперплазия клеток эритроидного ростка с признаками дизэритропоэза, что проявляется увеличением количества эритробластов, среди которых видны дву- и многоядерные формы, появлением мегабластоидных форм. Как правило, увеличивается содержание мегакариоцитов, основную массу которых составляют микроформы, встречаются голоядерные и безъядерные формы, клетки с гиполобулярным или несегментированным ядром, клетки с фрагментированным ядром, признаки дисмегакариоцитопоэза. Иногда отмечается увеличение количества клеток гранулоцитарного ростка с наличием или отсутствием признаков задержки созревания. Редкими являются нормоклеточный и особенно гипоклеточный варианты МДС. При этом варианте количество ядросодержащих элементов костного мозга существенно ниже возрастной нормы, что в первую очередь касается клеток эритроидного и гранулоцитарного ростка. Среди эритрокариоцитов есть диспластически измененные формы: видны дву- и многоядерные эритробласты, мегалобластоидные формы, лежащие группами и поодиночке. Количество мегакариоцитов, как правило, снижено в меньшей степени, в них выражены признаки дисмегакариоцитопоэза. Выявление гипопластического варианта МДС возможно только при гистологическом исследовании ТБКМ.

Гипопластический вариант представляет большие трудности в диагностике, при этом нужно проводить дифференциальную диагностику в первую очередь с апластической анемией и гипопластическим вариантом острого лейкоза. Часто для их дифференциации необходимо динамическое исследование ТБКМ в сопоставлении с клиническими и цитогенетическими данными. В отличие от МДС, при апластической анемии мегакариоциты полностью отсутствуют или их количество минимальное, в них отсутствуют признаки дисплазии. Дифференциация с гипопластическим вариантом острого лейкоза возможна в основном только с привлечением иммуногистохимического (ИГХ) исследования.

В отличие от цитологических препаратов, только ТБКМ позволяет охарактеризовать локализацию клеток гемопоэза. Это особенно важно для атипичной локализации клеток-предшественников миелопоэза.

Гистологическое и особенно ИГХ-исследование позволяет выявить наличие незрелых клеток гранулоцитарного ростка не только в зонах эндоста, что свойственно их расположению в норме, но и в центральных отделах костномозговых полостей. При гистологическом и ИГХ-исследовании ТБКМ можно обнаружить скопления бластных клеток, оценить характер их роста, локализацию, что имеет прогностическое значение и позволяет диагностировать начало бластной трансформации МДС. С помощью ИГХ-исследования в ТБКМ можно определить линейную принадлежность бластных клеток. Известно, что, как правило, развитие острого миелобластного лейкоза происходит на фоне МДС. Однако в части случаев доказана лимфоидная природа бластных клеток при трансформации МДС в острый лейкоз.

В гистологических препаратах ТБКМ, в отличие от цитологических препаратов костного мозга, можно охарактеризовать состояние стромы, что в первую очередь касается фиброзных изменений, степени их выраженности.

Гистологическое исследование костного мозга, особенно с использованием ИГХ-исследования, позволяет оценить выраженность ангиогенеза.

Заметное увеличение количества сосудов мелкого калибра, в том числе синусоидного типа, характерно для МДС, особенно для такого варианта, как рефрактерная анемия с мультилинейной дисплазией.

Примерно в 50% случаев МДС в ТБКМ выявляется лимфоидная гиперплазия разной степени выраженности. В ряде случаев она бывает выражена настолько значительно, что возникает необходимость проведения дифференциальной диагностики с лимфопролиферативными заболеваниями, в частности Т-клеточной природы, которые нередко протекают с цитопеническим синдромом и картиной гипоплазии костного мозга, часто сопровождаемой вторичным МДС. В таких случаях дифференциальная диагностика возможна только с привлечением иммуногистохимических методов исследования.

В развитии цитопении при МДС также может играть определенную роль наличие в клетках костного мозга различных вирусов. При ИГХ-исследовании ТБКМ в мегакариоцитах, лимфоидных клетках, клетках эритроидного и гранулоцитарного ростка выявляют вирус Эпштейна - Барр, цитомегаловирус, вирусы простого герпеса I и II типа.

Пункция костного мозга дает возможность достоверно оценить состояние стволовых клеток при лейкозе, гемобластозах, лимфомах. Процедура инвазивна, но является необходимой для точной верификации вида и степени выраженности рака крови. Она нужна для верификации диагноза, оценки качества лечения. При микроскопическом исследовании пунктата удается определить соотношение разных элементов, что помогает при планировании тактики терапии. Трепанобиопсия костного мозга используется для анализа костномозговой структуры, изучения особенностей форменных элементов крови.

Трепанобиопсия при лимфомах – это более предпочтительный вариант перед пункцией, так как требуется получение полноценной информации не только об изменении лимфоцитов, но и состояния других кроветворных ростков.

Осуществляется прокол специальной иглой с ограничителем, исключающим проникновение на большую глубину. При трепанобиопсии взятие вещества костной ткани оптимальнее всего проводить из задней ости подвздошной кости.

После проведения процедуры трепанобиопсии - после извлечения иглы с костным столбиком с помощью специального стержня его выталкивают из иглы на предметное стекло и делают мазки-отпечатки для цитологического исследования, а после сам биоптат помещают в фиксирующую жидкость.

После фиксации биоптат декальцинируют, обезвоживают, пропитывают парафином и нарезают на микроноже тончайшие гистологические препараты. Эти срезы прикрепляют к предметным стеклам, красят специальными красителями и исследуют с помощью микроскопа. Анализ предполагает подсчет предшественников форменных элементов (миелокариоцитов). В норме в мазке наблюдается от 15 до 25 данных клеток. При превышении количества отмечается гиперклеточность, а при снижении – гипоклеточность мазка.

Для чего используется исследование?

Гистологическое исследование костного мозга дает наиболее информативную картину костномозгового кроветворения. Оно превосходит подсчет миелограммы в костномозговом аспирате в количественной оценке клеточности костного мозга и диагностике инфильтративных заболеваний костного мозга.

В гистологическом препарате оценивают:

  • состояние тканей (костной, соединительной, жировой и кроветворной);
  • характер клеточного состава кроветворной ткани (в том числе наличие патологических клеток при лейкозах и метастазах рака в костный мозг);
  • особенности роста и распределения клеток костного мозга, включая признаки дисплазии кроветворения;
  • характер инфильтративного роста опухолевых клеток кроветворного происхождения и морфологические признаки опухолевых клеток.

Когда назначается исследование?

  • Невозможность получить адекватный материал при аспирации костного мозга («сухой пунктат»);
  • выявление и стадирование лимфомы Ходжкина и неходжкинских лимфом;
  • диагностика и оценка эффективности терапии апластической анемии;
  • хронические миелопролиферативные заболевания (истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, первичный миелофиброз);
  • выявление, оценка распространенности и ответа на лечение некоторых солидных опухолей (нейробластома, рабдомиосаркома);
  • обследование пациента с подозрением на множественную миелому;
  • обследование пациентов с заболеваниями костной ткани (туберкулез костей, системные остеопороз и остеомаляция).

Что означают результаты?

Обнаружение атипичных клеток гемопоэтического происхождения может свидетельствовать об опухолевом заболевании крови (лейкозы или лимфомы), которое можно уточнить, оценив характерные морфологические признаки опухолевых клеток.

Появление в биоптате атипичных клеток внекостномозгового происхождения наблюдается при метастазах других опухолей в костный мозг. Выявление признаков дисплазии кроветворения может указывать на различные клинические формы миелодиспластического синдрома.

Преобладание жирового костного мозга над красным (кроветворным) характерно для апластической анемии.

Что может влиять на результат?

  • Качество выполнения трепанобиопсии (при нарушениях техники манипуляции полученный материал может быть непригодным для гистологического исследования);
  • опыт и квалификация врача-патоморфолога.

Важные замечания

  • В связи с длительностью приготовления гистологических препаратов исследование занимает сравнительно долгое время (до 2 недель).

Кто назначает исследование?

Гематолог, онколог, онкогематолог.

Литература.

  1. Wintrobe’s clinical hematology / editors, John P. Greer, Daniel A. Arber, Bertil Glader, Alan F. List, Robert T. Means Jr., Frixos Paraskevas, George M. Rodgers. – 13th edition. Lippincott Williams & Wilkins, 2014. Pages 10-13.
  2. Williams Hematology. 9th edition. By: Kenneth Kaushansky, Marshall Lichtman, Josef Prchal, Marcel M. Levi, Oliver Press, Linda Burns, Michael Caligiuri. McGraw-Hill Education, 2016. Pages 27-35.
  3. Hematology: Clinical Principles and Applications, 4e. Bernadette F. Rodak MS MLS, George A. Fritsma MS MLS, Elaine Keohane PhD MLS. Saunders, 2012. Pages 210-224.
  4. Parker J.E., Mufti Ch.J., Rasool F., Mijovic A., Devereux S., Pagliuca A. The role of apoptosis, proliferation, and the Bcl-2-related proteins in myelodysplastic syndromes and acute myeloid leukemia secondary to MDS. Blood. 2000; 96 (12): 3932-38.
  5. Schmitt-Graeff A.N., Muller M.J., Fisch P. Myelodysplastic syndromes. Epidemiology, molecular and morphological characteristics and risk stratification. Pathologe. 2013; 34 (10): 45-55.
  6. Orazi A., Czader M.B. Myelodysplastic syndromes. Am. J. Clin. Pathol. 2009; 132: 290-305.
  7. Nimer S.D. Myelodysplastic syndromes. Blood. 2008; 11 (10): 4841-51.
  8. И. Б. Капланская. ФГБУ "Гематологический научный центр" Минздрава России, Москва. Архив патологии. 2014;76(1): 50-56
  9. Грицаев С.В. Клинико-гематологическая и биологическая вариабельность миелодиспластического синдрома и смешанных миелоидных заболеваний: Автореф. дис. д-ра мед. наук. СПб.; 2007.
  10. Криволапов Ю. А. Биопсии костного мозга: научно-практическое издание / Ю. А. Криволапов. – М.: Практическая медицина, 2014. С. 15-50.
Лабораторная служба Хеликс
г. Санкт-Петербург, Б. Сампсониевский пр-т, д. 20
Телефон: +7 (800) 700-03-03