Иммуногистохимическое исследование клинического материала (с использованием 6 антител)

Исследование клеток ткани, которое проводится с помощью специальных реактивов.

Выполняется только при наличии готового микропрепарата на предметном стекле и образца ткани в парафиновом блоке, а также гистологического заключения к ним.
Для проведения любого иммуногистохимического исследования (ИГХ) требуется предварительная оценка гистологической картины врачом-патоморфологом, для чего сначала проводится рутинное гистологическое исследование материала. Полученные данные позволяют выбрать необходимую методику ИГХ, типы применяемых антител, сформулировать окончательный гистологический диагноз. (Предварительное исследование 12-065 "Консультация биопсийного (операционного) материала любой группы сложности (по готовому материалу, 1 стекло)" не требуется, если это дозаказ к ранее уже проведенной в Хеликсе гистологии, в результате которой рекомендуется ИГХ).

Синонимы русские

ИГХ, иммуногистохимия, иммуногистохимический анализ.

Синонимы английские

Immunohistochemistry, IHС, immunohistochemical analysis.

Метод исследования

Иммуногистохимический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Образец ткани / образец ткани в парафиновом блоке.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Иммуногистохимическое исследование клинического материала проводится в целях выявления в нем искомых веществ. Готовые гистологические препараты обрабатываются специальными реактивами, содержащими меченые специфические антитела к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Если искомое вещество находится в исследуемом материале, то антитело связывается с его определенными участками. В результате этого между ними образуется комплекс и происходит окрашивание ткани.

Данный метод используется в диагностике различных патологических состояний, особенно велика его роль в области онкологии. Иммуногистохимическое (ИГХ) исследование помогает не только диагностировать опухоль, определить ее нозологический вариант, выявить первичный опухолевый очаг и обнаружить раковое перерождение клеток, но также спрогнозировать варианты течения заболевания и успешность лечения. К факторам, влияющим на прогноз, относятся рецепторы к эстрогенам и к прогестерону, Ki-67 (маркер активности опухоли), her-2 neu (эпидермальный фактор роста, определяет чувствительность опухоли к химиопрепарату трастузумабу/герцептину), VEGF (сосудистый фактор роста), Bcl-2, р53 и др. В отличие от иммуногистохимического анализа, их невозможно определить при обычном гистологическом исследовании.

Также этот метод нашел применение в диагностике системных заболеваний соединительной ткани и болезней почек, позволяет выявлять бактерии и вирусы в изучаемых тканях, например вирус Эпштейна – Барр, папиллома-вирус, Helicobacter Pylori (у больных хроническим гастритом), микобактерии при диагностике туберкулеза и др.

На основе ИГХ-анализа врач получает заключение с положительными и отрицательными маркерами, и это помогает подтвердить или опровергнуть гипотезу других клинико-лабораторных исследований.

Рак шейки матки относится к наиболее распространенным видам рака у женщин. Эпидемиологические и лабораторные данные подтверждают роль человеческого папиллома-вируса (ВПЧ, HPV) в качестве запускающего агента для подавляющего большинства предраковых и злокачественных поражений эпителия слизистой оболочки шейки матки. При этом ДНК ВПЧ могут быть обнаружены в 95-100% всех случаев.

Вирус папилломы человека представляет собой небольшие циркулярные двухцепочечные вирусы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), принадлежащие к семейству Papillomaviridae. Известно более 130 типов ВПЧ. Они классифицируются по степени риска, основанного на их связи с цервикальной карциномой. ВПЧ 16 и 18 являются наиболее часто встречающимися типами высокого риска. Внедряясь в эпителиальные клетки, вирус вызывает в них дефекты генов, тем самым способствуя развитию опухоли. При помощи ИХГ легко обнаружить в клетках, пораженных HPV, экспрессию белков p16 и p18, и их позитивность сильно коррелирует с позитивностью HPV. Это помогает различить неопухолевую дисплазию (как результат воспаления) и опухолевую (вызванную вирусом папилломы и способную переродиться в рак), а также позволяет провести дифференциальную диагностику дисплазии умеренной и высокой степени тяжести (CIN II/III) и начальных форм рака шейки матки, выявление поражений, склонных к прогрессированию и развитию инвазивной карциномы. В дисплазиях умеренной и высокой степени (в 80-100% случаев CIN II и практически во всех случаях CIN III) и инвазивном раке шейки матки определяется усиленная экспрессия белка p16, и она усиливается по мере нарастания тяжести поражения.

У женщин с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями низкой степени тяжести очаговая и диффузная экспрессия свидетельствует о прогрессировании заболевания. Отсутствие или очаговая экспрессия p16 в поражениях высокой степени может служить дополнительным признаком благоприятного течения патологического процесса.

Применяется иммуногистохимическое исследование и при дифференциальной диагностике целиакии.

Целиакия – это системное заболевание, обусловленное генетической непереносимостью глютена или соответствующих проламинов, которые содержатся в семенах злаков. Характеризуется данная патология повреждением слизистой оболочки тонкой кишки (развитием атрофической энтеропатии), появлением в сыворотке крови специфических антител и широким спектром глютензависимых клинических проявлений. Заболевание встречается в два раза чаще среди женщин, чем среди мужчин, может впервые проявиться как в детстве, так и у взрослых. Целиакия может протекать с ярко выраженной или со стертой клинической картиной, а также без гастроэнтерологической симптоматики. Чаще всего встречается стертый вариант течения заболевания, поэтому диагностика глютеновой энтеропатии (ГЭ) затруднена. 
На первичном лабораторном этапе проводится серологическое исследование, определяющее в крови специфические биомаркеры. Лицам с положительными результатами показана эндоскопия тонкой кишки с биопсией и последующим гистологическим и ИГХ анализом взятого материала.

Известно, что целиакия сопровождается повышением числа лимфоцитов внутри эпителиальных клеток тонкой кишки. При этом отличительной особенностью является то, что большинство интраэпитиальных лимфоцитов (ИЭЛ) несут на своей поверхности специфический Т-клеточный рецептор (CD3 γ и CD3δ-положительные клетки). Чем активнее протекает заболевание, тем больше ИЭЛ. Эта особенность используется при проведении иммуногистохимического исследования, позволяющего определить преобладающий тип лимфоцитов. Особенно важен этот анализ, когда существует расхождение между данными серологического исследования и гистологической оценкой на стандартных участках.

Для чего используется исследование?

• Для определения вида и подвида опухоли, степени ее злокачественности и распространенности онкологического процесса;
• для дифференциальной диагностики пролиферативных заболеваний;
• для определения этиологического фактора, вызвавшего изменения в клетках;
• для подбора эффективной терапии;
• для оценки пролиферативной активности клеток опухоли;
• для оценки эффективности лечения;
• для диагностики рецепторного статуса при онкологическом заболевании (например, раке молочной железы, предстательной железы);
• для определения первичного очага опухоли;
• для выявления злокачественного потенциала пораженных клеток;
• для первичного отбора пациентов для диспансерного учета и дальнейшего обследования;

Когда назначается исследование?

• При дифференциальной диагностике дисплазии (высокой и умеренной степени) и начальной стадии рака шейки матки;
• при раке молочной железы, желудка, предстательной железы в целях определения чувствительности к различным видам терапии;
• при определении степени злокачественности и оценки прогноза заболевания;
• при оценке эффективности терапии;
• при поиске источника метастазов;
• при диагностике гастроинтестинальных стромальных опухолей (GIST) с помощью расширенной панели антител, включающей DOG1;
• при диагностике нейроэндокринных опухолей;
• при дифференциальной диагностике целиакии, сопровождающейся неясной гистологической картиной;
• при расхождении результатов серологического исследования и гистологической оценки.

Что означают результаты?

Референсные значения

Диапазон значений индивидуален для каждого заболевания, зависит от используемых антител.

Расшифровка результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом.

Проводится морфологическая оценка препарата (опухоли классифицируются согласно ВОЗ), дается описательный ответ с указанием оценки экспрессии антитела. ИХГ всегда следует использовать в качестве дополнения к морфологическому исследованию, результаты не следует интерпретировать изолированно.

Что может влиять на результат?

При некоторых заболеваниях есть факторы, которые могут влиять на результат. Так, при диагностике целиакии назначение безглютеновой диеты до исследования может приводить к получению ложноотрицательного результата.

Также рекомендуется

• [12-006] Цитологическое исследование пунктатов, соскобов других органов и тканей
• [12-015] Гистологическое исследование биоптатов органов и тканей (за исключением печени, почек, предстательной железы, лимфатических узлов)
• [12-026] Консультация биопсийного (операционного) материала любой сложности (по готовому материалу)
• [12-059] Дополнительное изготовление микропрепаратов
• [12-071] Гистологическое исследование биопсийного материала
• [13-033] Антитела к тканевой трансглутаминазе, IgG
• [13-034] Антитела к тканевой трансглутаминазе, IgA
• [40-156] Целиакия. Скрининг при селективном дефиците IgA
• [13-017] Антитела к глиадину, IgA
• [13-018] Антитела к глиадину, IgG
• [13-032] Антитела к эндомизию, IgA
• [13-035] Антиретикулиновые антитела (APA)
• [13-078] Целиакия. Скрининг (взрослые и дети старше 2 лет)
• [18-086] Диагностика целиакии (типирование HLA DQ2/DQ8)
• [12-001] Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
• [08-042] Раковый эмбриональный антиген (РЭА)
• [12-037] Иммуноцитохимическое исследование соскобов шейки матки с определением белка р16
• [40-528] Скрининг рака шейки матки (цитологическое исследование клинического материала методом жидкостной цитологии c ВПЧ-тестом (Roche Cobas4800)
• [12-051] Жидкостная цитология. Исследование соскоба шейки матки и цервикального канала (окрашивание по Папаниколау)

Кто назначает исследование?

Онколог, гинеколог, гастроэнтеролог, терапевт, педиатр.

Литература

• Далленбах-Хеллвег Г., Трунк М.Й., Кнебель Дебериц М. Традиционные и новые молекулярные методы для ранней детекции рака шейки матки//Архив патологии 2004 – №5 – с. 35-39.
• Brunner M, Koperek O, Wrba F, Erovic BM, Heiduschka G, Schoppper C, et al. HPV infection and p16 expression in carcinomas of the minor salivary glands. Eur Arch Otorhinolaryngol. 2012;269:2265 – 9.
• Galgano MT, Castle PE, Atkins KA, Brix WK, Nassau SR, Stoler MH. Using biomarkers as objective standards in the diagnosis of cervical biopsies. Am J Surg Pathol. 2010;34:1077 – 87.
• McCluggage WG. Immunohistochemistry as a diagnostic aid in cervical pathology. Pathology. 2007;39(1):97 – 111.