Стероидный профиль в слюне (расширенный), ВЭЖХ

Комплексное исследование, направленное на количественную оценку содержания основных стероидных гормонов в слюне, что необходимо для определения их баланса в организме и выявления каких-либо его нарушений. В состав комплекса входит анализ следующих гормонов: кортизон, кортизол, андростендион, дегидроэпиандростерон, тестостерон свободный, эстрадиол свободный, прогестерон свободный, 17-ОН-прогестерон, прегненолон.

Состав исследования:

08-160 Стероидный профиль в слюне, ВЭЖХ

08-170 Прегненолон в слюне, ВЭЖХ

Синонимы русские

Комплексное исследование - кортикостероидные гормоны (кортизол, кортизон); половые гормоны; андрогены (андростендион, дегидроэпиандростерон, тестостерон); эстрогены (эстрадиол); прогестагены (прогестерон); 17-ОН-прогестерон, нейростероиды (прегненолон).

Синонимы английские

Complex analysis - corticosteroid hormones (cortisol, cortisone); gonadocorticoids, androgens (androstenedione, dehydroepiandrosterone, testosterone); estrogens (estradiol – 17-beta-estradiol, E2); progestagens (progesterone); 17-OH-progesterone, neurosteroids (pregnenolone).

Метод исследования

Высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией.

Единицы измерения

Нг/мл (нанограмм на миллилитр), пг/мл (пикограмм на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Слюну.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• За сутки и в течение всего периода сбора слюны исключить употребление кофеина, алкоголя, физические нагрузки.
• Прием седативных препаратов, кортизона ацетата, эстрогенов, пероральных контрацептивов, глюкокортикоидных препаратов (в т. ч. мазей) может вызвать повышение уровня кортизола. Отмена лекарственных препаратов осуществляется строго по рекомендации лечащего врача.
• Не курить в течение 1 часа до сбора слюны.
• За 10 минут до сбора слюны прополоскать рот водой.
• За 30 минут до сбора слюны воздержаться от приема пищи, чистки зубов, использования зубной нити, ополаскивателей полости рта и жевательной резинки.

Общая информация об исследовании

Группу стероидных гормонов составляют преимущественно кортикостероиды и гонадостероиды (половые гормоны), они синтезируются различными эндокринными железами, но объединены под общим названием по нескольким причинам. Так, источником их синтеза является одно вещество – холестерин, сами гормоны являются липидами и могут проникать через клеточные мембраны (т.к. жирорастворимы), имеют схожий механизм действия на клетки-"мишени", играют очень важную роль в поддержании жизнедеятельности организма, обеспечивая контроль всех необходимых процессов на клеточном уровне.

Как правило, для диагностики гормональной патологии редко используется анализ только одного гормона, т.к. большинство из них (в пределах одного профиля) находится в очень тесном взаимодействии друг с другом. Поэтому чаще всего необходимо оценивать единовременно несколько показателей (в каждой конкретной ситуации необходимый спектр определяется врачом). Комплексное исследование стероидных гормонов в слюне включает в себя определение концентраций всех основных представителей этой группы и направлено на определение их баланса в организме – это анализ кортикостероидных гормонов (кортизол, кортизон); андрогенов (андростендион, дегидроэпиандростерон, тестостерон); эстрогенов (эстрадиол); прогестагенов (прогестерон); 17-ОН-прогестерона.

Кортизол и кортизон относятся к группе глюкокортикостероидов, синтезируются корковым слоем надпочечников под воздействием адренокортикотропного гормона (АКТГ), вырабатываемого гипофизом. Кортизол считается одним из важнейших гормонов стресса, он формирует защитные реакции в организме путем перераспределения метаболических процессов в органах и тканях, в частности глюкозы, осуществляет контроль сосудистого тонуса, мышечной работы и т.д. То есть гормон способствует мобилизации всех процессов в организме и направлению их работы на борьбу с критической ситуацией. Также кортизол участвует во всех видах обменных реакций (углеводных, жировых, белковых, водно-электролитных). Кортизон – второй по значимости (после кортизола) глюкокортикостероидный гормон, секретируется в небольшом количестве и выполняет функции, схожие с кортизолом.

Адрогены – группа стероидных гормонов, объединяющая мужские половые гормоны (которые присутствуют и у женщин), синтезируемые в половых железах - семенниках – у мужчин, в небольшом количестве в яичниках у женщин и корой надпочечников у обоих полов. Тестостерон – один из основных представителей этой группы, отвечает за формирование половых органов и развитие вторичных половых признаков у мальчиков (оволосение по мужскому типу, тембр голоса, развитие мускулатуры и т.д.). Под контролем гормона находится половая функция (либидо, эректильная функция) и репродуктивное здоровье. У женщин тестостерон участвует в поддержании гормонального баланса половых гормонов и так же, как у мужчин, участвует в формировании половой и репродуктивной функции. Анростендион является андрогеном, но вырабатывается по большей части яичниками у женщин, а также яичками у мужчин и надпочечниками. Роль гормона состоит в том, что он является предшественником эстрогенов и андрогенов, формируя дополнительный путь их синтеза, помимо прямого. Имеет достаточно низкую самостоятельную биологическую активность. Дегидроэпиандростерон (ДГЭА) также является достаточно слабым андрогеном, синтезируется преимущественно корой надпочечников (до 95 %), меньшая часть (до 5 %) – половыми железами.  Как и андростендион, играет роль предшественника эстрогенов и андрогенов и является показателем их нормального синтеза в организме. Функции этих двух гормонов, по сути, те же, что и основных половых гормонов, только выполняются не прямо, а опосредованно через процессы синтеза.

Эстрогены – общее название группы женских стероидных гормонов, которые вырабатываются в женских половых железах - яичниках, – а также в небольшом количестве у мужчин в семенниках и надпочечниках у обоих полов. Наиболее высокой биологической активностью обладает эстрадиол. Гормон отвечает за формирование вторичных половых признаков у девочек (женский тип фигуры, голос, оволосение, менархе и т.д.), регуляцию менструального цикла, нормальное развитие половой функции (либидо, способность к зачатию), наступление и вынашивание беременности, подготовку к родам, своевременное наступление менопаузы. Уровень гормона колеблется в зависимости от возраста, фазы менструального цикла, наличия беременности. Прогестерон считается главным гормоном беременности, хотя оказывает влияние на репродуктивную систему женщины и вне ее, все же свою ключевую роль играет именно в период подготовки и вынашивания плода. Вырабатывается преимущественно желтым телом, которое образуется в яичнике после выхода зрелого фолликула, и плацентой при наступлении беременности. Гормон отвечает за подготовку матки к имплантации яйцеклетки, ее мышц и связочного аппарата к вынашиванию беременности, молочных желез к лактации, участвует в формировании некоторых тканей и структур плода. Норма прогестерона также сильно варьируется в зависимости от фазы цикла и в период беременности.

17-ОН-прогестерон (или 17-гидроксипрогестерон) – еще один показатель комплекса, представляет собой промежуточный продукт в сложных гормональных превращениях, образуется из прогестерона и 17-гидропрегненолона в надпочечниках, гонадах, плаценте. Является субстратом для синтеза кортизола и андростендиона, который затем метаболизируется в эстрогены и андрогены.

Прегненолон - гормон, синтез которого в организме осуществляется на основе холестерина в надпочечниках. Он играет роль промежуточного звена в реакциях биосинтеза стероидных гормонов: кортизола, альдостерона, половых гормонов (эстрогенов, прогестерона, тестостерона и др.). Кроме того, гормон синтезируется в определенных локализациях мозга, где проявляет самостоятельную биологическую активность в качестве нейростероида. Это позволяет ему принимать участие в процессах развития нейронов, миелинизации, оказывать нейропротективное действие. Лабораторное выявление прегненолона в образце биологического материала наиболее часто применяется при диагностике адреногенитального синдрома, который представляет собой гиперплазию коры надпочечников врожденной этиологии, основой которой служит дефект одного из ферментов в каскаде синтеза стероидных гормонов. Это ведет к снижению их количества, что влечет за собой по принципу отрицательной обратной связи усиленное образование гормонов гипофиза с последующим увеличением размеров надпочечников и синтеза ими промежуточных звеньев реакций образования стероидных гормонов. Одним из таких промежуточных субстратов и является прегненолон. Адреногенитальный синдром имеет несколько типов, классифицируется по различным параметрам, каждый из которых имеет особенности клинических проявлений, возраст, в котором они возникли, течение и прогноз. Наиболее часто встречаются следующие виды ферментопатий при данном синдроме: дефицит 21–гидроксилазы (самая частая форма, встречается в 90 % случаев); дефицит 11–бета-гидроксилазы (5-8 % случаев); дефицит 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы (редкая форма, 3-5 % случаев) и другие более редкие формы. Например, для верификации дефицита 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы наиболее показателен анализ на определение уровня прегненолона.

Таким образом, стероидные гормоны образуют достаточно сложную систему, тесно взаимосвязанную между собой. Так как все они играют важнейшую роль в процессах жизнедеятельности и репродуктивной функции, существуют не только прямые способы их синтеза в эндокринных железах, но и обходные – путем многочисленных превращений из других гормонов. Это способствует обеспечению оптимальных концентраций – при нарушении в одном пути синтеза его может "подстраховать" другой, т.е. организм пытается поддерживать необходимый баланс. При возникновении какой-либо патологии концентрация гормонов может нарушаться, что необходимо своевременно диагностировать.

Лабораторная диагностика концентраций стероидных гормонов в слюне осуществляется современным методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (ВЭЖХ). Это исследование позволяет разделить все компоненты в полученном образце слюны, то есть выделить отдельно каждый интересующий гормон, а затем подсчитать его концентрацию. Анализ сочетает простоту сбора материала с высокой точностью полученных результатов.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики патологии коры надпочечников и половых желез (новообразований, воспалительные процессов, врождённых аномалий развития и т.д.);
• для оценки функции системы гипоталамус - гипофиз – надпочечники (половые железы);
• для диагностики причин нарушений полового созревания (преждевременного или задержки) у девочек и мальчиков;
• у женщин – для диагностики причин нарушения менструального цикла, репродуктивной функции, патологии беременности, подозрении на бесплодие;
• у мужчин – при гинекомастии, эректильной дисфункции, бесплодии;
• для контроля терапии при лечении препаратами стероидных гормонов;
• для оценки гормонального статуса при применении вспомогательных репродуктивных технологий (при планировании ЭКО);
• для дифференциальной диагностики нарушений обмена веществ, водно-солевого баланса (при подозрении на гормональную этиологию данных нарушений);
• для диагностики адреногенитального синдрома (в частности, дефицита 3-бета-гидроксистероиддегидрогеназы).

Когда назначается исследование?

• Женщинам при тазовых болях, нарушениях менструального цикла, маточных кровотечениях, нарушениях зачатия, патологии беременности, бесплодии;
• при обследовании женщин с признаками гиперандрогении: гирсутизм (рост волос на коже над верхней губой, подбородка, белой линии живота), акне, андрогенная алопеция, нарушение менструального цикла;
• мужчинам при нарушении половой и репродуктивной функции, симптомах феминизации, из которых наиболее часто встречается гинекомастия;
• при обследовании младенца с признаками нарушения дифференцировки пола (наружные половые органы, обладающие чертами как женского, так и мужского пола);
• при преждевременном или запоздалом развитии вторичных половых признаков и половой системы;
• при использовании вспомогательных репродуктивных технологий;
• при наступлении менопаузы, сопровождающейся приливами, психоэмоциональной лабильностью, бессонницей, аномальными кровотечениями;
• при нарушении обменных процессов с подозрением на гормональную причину.

Что означают результаты?

Референсные значения

1. 08-160 Стероидный профиль в слюне, ВЭЖХ: https://helix.ru/kb/item/08-160#subj11

2. 08-170 Прегненолон в слюне, ВЭЖХ: https://helix.ru/kb/item/08-170#subj11

Что может влиять на результат?

Необходимо отметить, что норма концентрации стероидных гормонов зависит от времени суток, в которые был взят материал, возраста и пола, у женщин – от фазы менструального цикла, наличия беременности. Кроме того, на результат может повлиять наличие сопутствующих заболеваний и прием некоторых лекарственных препаратов (особенно, гормональных). Перед исследованием необходимо проконсультироваться с врачом, а также принимать во внимание все вышеперечисленные факторы, влияющие на результат исследования.

Важные замечания

• Для получения точного результата необходимо выполнять рекомендации по подготовке к исследованию.
• Результат анализа необходимо оценивать с учетом всех значимых клинических, лабораторных и инструментальных исследований.

Также рекомендуется

[40-148] Мужской гормональный статус – базовые лабораторные показатели

[40-149] Женский гормональный статус – базовые лабораторные показатели

Кто назначает исследование?

Гинеколог, уролог, эндокринолог, репродуктолог, терапевт, онколог, педиатр, генетик.

Литература

• Koal T, Schmiederer D, Pham-Tuan H, Röhring C, Rauh M. Standardized LC-MS/MS based steroid. J Steroid Biochem Mol Biol. 2012 Apr; 129(3-5):129-38.
• Soldin SJ, Soldin OP. Steroid hormone analysis by tandem mass spectrometry. Clin Chem. 2009 Jun; 55(6):1061–6.
• Vieira JG, Nakamura OH, Carvalho VM. Determination of cortisol and cortisone in human saliva by a liquid chromatography-tandem mass spectrometry method. Arq Bras Endocrinol Metabol. 2014 Nov; 58(8):844-50. Epub 2014 Nov 1.
• Zhang K, Fent K. Determination of two progestin metabolites (17α-hydroxypregnanolone and pregnanediol) and different classes of steroids (androgens, estrogens, corticosteroids, progestins) in rivers and wastewaters by - performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Sci Total Environ. 2018 Jan 1;610-611:1164-1172.
• Miyashita T, Okubo M, Shinomiya T, Nakagawa K, Kawaguchi M. Pregnenolone biosynthesis in the rat salivary gland and its inhibitory effect on secretion. J Pharmacol Sci. 2011;115(1):56-62.
• Dušková M, Šimůnková K, Vítků J, Sosvorová L, Jandíková H, Pospíšilová H, Šrámková M, Kosák M, Kršek M, Hána V, Žánová M, Springer D, Stárka L. A Comparison of Salivary Steroid Levels during Diagnostic Tests for Adrenal Insufficiency. Prague Med Rep. 2016;117(1):18-33.
• Shimizu Y. [Pregnenolone, pregnenolone sulfate]. Nihon Rinsho. 2005 Aug;63 Suppl 8:336-9.
• Katsumata N. Genetic defects in pregnenolone synthesis. Pediatr Endocrinol Rev. 2012 Oct;10 Suppl 1:98-109.